بيرد باركر أجار: الأساس والتحضير والاستخدام - مادة الاحياء - 2026

و أجار بيرد باركر هو انتقائية المتوسطة الصلبة والثقافة التفاضلية. تم إنشاؤه في عام 1962 لاكتشاف وإحصاء المكورات العنقودية الموجبة للتخثر (Staphylococcus aureus).

يتكون من هيدروليسات البنكرياس من الكازين ، ومستخلص اللحوم ، ومستخلص الخميرة ، وكلوريد الليثيوم ، والجليسين ، وبيروفات الصوديوم ، وتيلوريت البوتاسيوم ، ومستحلب الأجار وصفار البيض.

مستعمرات Staphylococcus aureus النموذجية في بيرد باركر أجار. المصدر: دايزي جون

يعتمد Baird Parker Agar على قدرة S. aureus على تقليل التيلوريت وإنتاج الليسيثيناز. كلتا الخواص تولد مستعمرة ذات خصائص محددة لهذا النوع لذلك ، فهي فعالة للغاية في الكشف عن هذه الكائنات الحية الدقيقة.

تكون المستعمرات النموذجية للبكتيريا العنقودية الذهبية سوداء أو رمادية داكنة ، مع حدود عديمة اللون وهالة ضوئية تحيط بها ، مما يميزها عن الكائنات الحية الدقيقة الأخرى. يمكن العثور على هذا العامل الممرض في العينات السريرية والمياه ومستحضرات التجميل والأطعمة النيئة أو المطبوخة.

يعتبر تشخيصه أو اكتشافه ذا أهمية قصوى ، نظرًا لتنوع الأمراض التي ينتجها ، مثل التسمم الغذائي ، ومتلازمة الجلد المسموط ، ومتلازمة الصدمة السامة ، والخراجات ، والتهاب السحايا ، وتسمم الدم ، والتهاب الشغاف ، وغيرها.

أساس

قوة مغذية

تحلل البنكرياس للكازين ومستخلص اللحوم وخلاصة الخميرة هي مصادر المغذيات والفيتامينات والمعادن الضرورية للتطور الميكروبي العام ، في حين أن البيروفات والجليسين هي مركبات تساعد على نمو محدد للمكورات العنقودية الذهبية.

انتقائي

يعتبر Baird Parker Agar انتقائيًا لأنه يحتوي على مواد تمنع نمو النباتات المصاحبة ، مع تعزيز تطور S. aureus. المركبات المثبطة هي كلوريد الليثيوم وتيلوريت البوتاسيوم.

التفاضليه

هذا الوسيط يجعل من الممكن التفريق بين S. aureus وبقية المكورات العنقودية السلبية المخثرة. المكورات العنقودية الذهبية لديها القدرة على تقليل التيلوريت لتحرير التيلوريوم الأسود المعدني ، وتشكيل مستعمرات سوداء أو رمادية داكنة.

وبالمثل ، يوفر صفار البيض ركائز لإثبات وجود إنزيم الليسيثيناز والليباز. المكورات العنقودية الذهبية موجبة ليسيثيناز وبالتالي ستلاحظ هالة واضحة حول المستعمرة ، مما يشير إلى أن الليسيثين قد تحلل بالماء.

وبهذا المعنى ، فإن ظهور مستعمرات سوداء لامعة أو رمادية داكنة مع وجود هالة ضوئية حولها يشير إلى وجود بكتيريا S. aureus.

إذا تشكلت منطقة هطول ، فهذا يدل على نشاط الليباز. بعض سلالات المكورات العنقودية الذهبية موجبة للليباز وأخرى سلبية.

في حالة كون بكتيريا S. aureus موجبة للليباز ، ستلاحظ منطقة معتمة حول المستعمرة السوداء أو الرمادية الداكنة ، تليها هالة ضوئية بسبب تأثير الليسيثيناز.

مستعمرات البكتيريا غير العنقودية الذهبية القادرة على النمو على هذا الوسط سوف تطور مستعمرات عديمة اللون أو بنية اللون بدون هالة محيطة.

يمكن أيضًا رؤية المستعمرات السوداء غير النمطية بحدود عديمة اللون أو بدونها ، ولكن بدون هالة ضوئية. لا ينبغي أن تؤخذ هذه المستعمرات في الاعتبار ، فهي لا تتوافق مع S. aureus.

تجهيز

مستحلب صفار البيض

خذ بيضة دجاج طازجة واغسلها جيدًا وضعها في 70٪ كحول لمدة 2 إلى 3 ساعات. ثم يتم فتح البيضة معقمًا معقمًا ويفصل البياض بعناية عن الصفار. بعد ذلك ، يتم أخذ 50 مل من صفار البيض وخلطها مع 50 مل من محلول فسيولوجي معقم.

تيلوريت البوتاسيوم 1٪ وزن / حجم

تبيع بعض البيوت التجارية 1٪ تيلوريت بوتاسيوم جاهز للاستخدام. يضاف إلى الوسط قبل أن يصلب الوسط.

لتحضير هذا المحلول في المختبر ، يتم وزن 1.0 جرام من تيلوريت البوتاسيوم وإذابه في جزء واحد من الماء. بعد ذلك ، تكتمل كمية الماء حتى تصل إلى 100 مل. يجب تعقيم المحلول بطريقة الترشيح.

تحضير وسط الثقافة

يزن 60 جم ​​من الوسط المجفف ويذوب في 940 مل من الماء المقطر. دع الخليط يجلس لمدة 5-10 دقائق.

استخدم الحرارة عن طريق تحريك الوسط بشكل متكرر لتحسين عملية الذوبان. دعها تغلي لمدة دقيقة. تعقيم في الأوتوكلاف عند 121 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة.

اتركيها حتى تصل إلى درجة حرارة 45 درجة مئوية وأضيفي 50 مل من مستحلب صفار البيض و 10 مل من 1٪ تيلوريت. يُمزج جيدًا ويُسكب 15-20 مل في أطباق بتري المعقمة.

دعه يتجمد ، اطلبه مقلوبًا في لوحات وقم بتخزينه في الثلاجة حتى الاستخدام.

يجب أن يكون الرقم الهيدروجيني النهائي للوسط المحضر 6.8 ± 0.2.

قبل زرع عينة ، انتظر حتى تصل اللوحة إلى درجة حرارة الغرفة. قم بزرع الألواح عن طريق وضع خطوط أو بذر سطحي باستخدام ملعقة Drigalski.

لون الوسط المجفف أسمر فاتح ولون الوسط المحضر كهرماني فاتح.

استعمال

العينات السريرية

يتم زرع العينات السريرية مباشرة ، مما يؤدي إلى تفريغ جزء من المادة في أحد طرفي الصفيحة ، ومن هناك يتم تشويهها بالإرهاق. احتضان لمدة 24 إلى 48 ساعة عند 35-37 درجة مئوية.

عينات الطعام

تزن 10 جم من عينة الطعام وتجانس في 90 مل من 0.1٪ ماء ببتون ، ويتم تحضير التخفيفات إذا لزم الأمر. تلقيح الأطباق في ثلاث نسخ بـ 0.3 مل من المحاليل المحضرة ، والبذر على السطح باستخدام ملعقة Drigalski. احتضان لمدة 24 إلى 48 ساعة عند 35-37 درجة مئوية.

تسمح هذه المنهجية بإحصاء عدد المستعمرات النموذجية التي تم الحصول عليها وهي مثالية عند الاشتباه في وجود بكتيريا S. aureus فوق 10 CFU لكل جم / مل من العينة.

إذا كان هناك شك في أن كمية بكتريا S. aureus صغيرة أو كان هناك الكثير من النباتات المصاحبة ، يُقترح إثراء العينة في مرق الصويا trypticase بـ 10٪ كلوريد الصوديوم و 1٪ بيروفات الصوديوم. سيؤدي ذلك إلى تعزيز نمو بكتريا S. aureus ويمنع نمو النباتات المصاحبة. يتم زرع أنابيب التعكر على أجار بيرد باركر.

عينات المياه

في نظام الترشيح الفراغي المعقم ، يتم ترشيح 100 مل من ماء الدراسة ، وبعد ذلك يتم إزالة غشاء 0.4 ميكرون الذي يسهل اختراقه باستخدام ملقط معقم ويوضع على لوحة بيرد باركر. احتضان لمدة 24 إلى 48 ساعة عند 35-37 درجة مئوية. تسمح هذه التقنية بإحصاء مستعمرات العنقودية الذهبية النموذجية.

سؤال وجواب

يمكن استخدام السلالات المعروفة مثل Staphylococcus aureus ATCC 25923 ، Staphylococcus aureus ATCC 6538 ، Staphylococcus epidermidis ATCC 12228 ، Escherichia coli ATCC 25922 أو Proteus mirabilis ATCC 43071 لتقييم جودة بيرد باركر آجار.

في حالة سلالات S. aureus ATCC ، من المعروف أنها تقلل من التيلوريت ، وهي موجبة الليباز والليسيثيناز. لذلك ، يجب أن يكون هناك تطور مرض وأن تنمو مستعمرات محدبة ذات مركز أسود وحدود عديمة اللون ، بهالة غير شفافة وهالة خارجية فاتحة.

من جانبها ، من المتوقع أن تتطور S. epidermidis بشكل ضعيف في هذا الوسط ، مع مستعمرات رمادية بنية إلى سوداء ، بدون هالة خفيفة.

بالنسبة للإشريكية القولونية والمتصورة ميرابيليس فمن المتوقع أن يتم تثبيطها كليًا أو جزئيًا. في حالة النمو ، تتطور المستعمرات البنية بدون منطقة معتمة أو هالة خفيفة.

التوصيات

- لا يجب تسخين الوسط بعد إضافة التيلوريت وصفار البيض.

- يعد تحضير مستحلب صفار البيض وإضافته في الوسط خطوة شديدة التأثر بالتلوث. يجب توخي الحذر الشديد.

- في حالة وجود مستعمرات نموذجية من بكتيريا S. aureus ، يجب تأكيد ذلك بإجراء اختبار تجلط الدم على السلالة المذكورة.

- إذا كانت هناك نتائج مشكوك فيها مع تجلط الدم ، فيجب إجراء اختبارات تأكيدية أخرى.

- احرص على عدم الخلط بين وجود مستعمرات بكتريا المكورة العنقودية البرتقالية النموذجية والمستعمرات السوداء غير النمطية.

المراجع

1. المساهمين في ويكيبيديا. بيرد باركر أجار. ويكيبيديا، الموسوعة الحرة. 15 آذار (مارس) 2017 ، الساعة 19:36 بالتوقيت العالمي المنسق. متاح على: wikipedia.org/ تم الوصول إليه في 18 فبراير 2019.
2. مختبرات BD. بيرد باركر أجار. 2006 متاح في: bd.com
3. مختبرات بريتانيا. قاعدة أجار بيرد باركر. 2015 متاح على: britanialab.com
4. معامل فرانسيسكو سوريا ملغيزو. 2009. بيرد باركر أجار. متاح على:
5. مختبرات بريتانيا. تيلوريت البوتاسيوم. 2015 متاح على: britanialab.com
6. Alarcón-Lavín M، Oyarzo C، Escudero C، Cerda-Leal F، Valenzuela F. حمل المكورات العنقودية الذهبية المعوية من النوع A ، في مسحات البلعوم الأنفي في مناولات الطعام. القس ميد تشيلي 2017 ؛ 145: 1559-1564
7. المعيار الفنزويلي كوفينين 1292-89. (1989). أغذية. عزل وتعداد Staphylococcus aureus. متاح على: sencamer.gob.ve