بهي أجار: الأساس والتحضير والاستخدامات - مادة الاحياء - 2025

و أجار BHI أو الدماغ القلب تسريب أجار المتوسطة هو ثقافة الصلبة الغذائية. في الإسبانية نشير إليه على أنه أجار ضخ قلب الدماغ. إنه وسط زراعة غير انتقائي ، مما يعني أن جميع أنواع البكتيريا موجبة الجرام وسالبة الجرام يمكن أن تتطور ، وكذلك بعض الخميرة والفطريات الخيطية.

وهو يتألف من تسريب دماغ العجل والقلب ، والتحلل الهضمي للأنسجة الحيوانية ، وتحلل البنكرياس للكازين ، وكلوريد الصوديوم ، والجلوكوز ، وفوسفات ثنائي الصوديوم ، والأجار.

لوحات BHI. المصدر: صورة التقطها المؤلف ماجستير. مارييلسا جيل.

وتجدر الإشارة إلى أن أجار BHI هو أحد أكثر وسائط الاستنبات استخدامًا في مختبرات علم الجراثيم. يمكن استخدامه بدون مكملات مثل الثقافة الأولية ، أو الثقافة الفرعية للمستعمرات التي تم الحصول عليها على وسائط انتقائية أخرى أو لصيانة السلالات في المختبر.

من ناحية أخرى ، تعتبر وسيلة مثالية لاستخدامها كقاعدة في تحضير الوسائط الغنية ، مثل أجار الدم وأجار الشوكولاتة. كلاهما مثالي لعزل الكائنات الحية الدقيقة المطلوبة من وجهة نظر غذائية. ومع ذلك ، تجدر الإشارة إلى أنه نظرًا لاحتوائه على الجلوكوز ، فإنه غير مناسب لمراقبة أنماط انحلال الدم.

وبالمثل ، يمكن استخدام أجار BHI لتحضير وسائط خاصة لعزل الكائنات الحية الدقيقة المسببة للأمراض التي يصعب نموها في الوسائط الشائعة ، من بينها المستدمية sp و Francisella tularensis و Corynebacterium diphtheriae و Histoplasma capsulatum.

مع إضافة المضادات الحيوية ، يصبح أجار BHI وسيلة انتقائية لعزل الفطريات.

أساس

إنها وسيلة استزراع مغذية لعزل الكائنات الحية الدقيقة التي تتطلب متطلبات معتدلة ، ويمكن زيادة تخصيبها بإضافة الدم والمكملات الغذائية الأخرى.

إنه وسط زراعة غير انتقائي ، لذلك فهو يسمح بنمو معظم البكتيريا موجبة الجرام وسالبة الجرام ، وكذلك بعض الفطريات. ومع ذلك ، يمكن جعله انتقائيًا بإضافة المضادات الحيوية.

تحتوي الوسيلة على ضخ دماغ العجل والقلب ، والتحلل الهضمي للأنسجة الحيوانية وتحلل البنكرياس للكازين ؛ تعمل كل هذه المركبات كمصادر للفيتامينات والأحماض الأمينية والنيتروجين والكربون.

الجلوكوز هو كربوهيدرات يوفر الطاقة للكائنات الحية الدقيقة بمجرد تخميرها. وفي الوقت نفسه ، يحافظ كلوريد الصوديوم وفوسفات ثنائي الصوديوم على التوازن الأسموزي ويوفران درجة حموضة قريبة من الحياد. أخيرًا ، يعطي الأجار الاتساق المتوسط ​​الصلب.

تجهيز

تزن 52 جرام من الوسط المجفف وتذوب في لتر واحد من الماء المقطر. ضعي الخليط في مصدر حرارة حتى الغليان مع التقليب المتكرر أثناء عملية الذوبان.

يمكن تحضير أطباق أو أسافين BHI بدون إضافات.

أسافين

لتحضير الأوتاد ، قدم التحضير حتى يتم ملء نصف كل أنبوب ، قم بتغطيته وتعقيمه في الأوتوكلاف عند 121 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة ، عند المغادرة ، ضعه على قاعدة حتى تتماسك. يُخزن لاحقًا في الثلاجة لحين الاستخدام.

أسافين BHI للبكتيريا. المصدر: صورة التقطها المؤلف ماجستير. مارييلسا جيل.

لوحات

يتم تعقيم الخليط المذاب في درجة حرارة 121 مئوية لمدة 15 دقيقة ، وعند تركه ، يُترك ليبرد حتى 50 درجة مئوية ويتم تقديم 20 مل من الوسط في أطباق بتري المعقمة. يُسمح لها بالتصلب وتقليبها وتخزينها في الثلاجة حتى الاستخدام. اترك الأطباق تصل إلى درجة حرارة الغرفة قبل البذر.

يجب أن يظل الأس الهيدروجيني للوسط عند 7.4 ± 0.2.

الوسط الخام لونه بيج والوسط المعدني لونه كهرماني فاتح.

تحضير أجار الدم

بعد تعقيم الوسط ، تبرد إلى درجة حرارة تقارب 45 إلى 50 درجة مئوية ، ثم أضف الدم (50 مل) ، واخلطها بلطف حتى تتجانس ، وقدم بطريقة معقمة 20 مل في كل طبق بتري. إذا تشكلت الفقاعات على اللوح ، فيجب أن يمر اللهب الأخف بسرعة فوق الفقاعات للتخلص منها.

وبالمثل ، يمكن تحضير وسائط خاصة بإضافة المواد المضافة المقابلة عندما يصل الخليط إلى درجة حرارة تتراوح من 45 إلى 50 درجة مئوية.

الوسط يبقى الكرز الأحمر.

التطبيقات

استخدم بدون مكملات

يعتبر أجار BHI بدون إضافات مفيدًا كثقافة أولية ولزرع سلالات نقية من الكائنات الدقيقة منخفضة أو متوسطة الطلب لتحديدها لاحقًا.

نظرًا لأنه وسيط فاتح اللون ، فهو مثالي لمراقبة الأصباغ ، ولأنه لا يحتوي على مواد متداخلة ، يمكن إجراء بعض الاختبارات الكيميائية الحيوية ، مثل أوكسيديز وكاتاليز ، أو يمكن إجراء اختبارات كيميائية حيوية أخرى من المستعمرات من هذا أجار.

وبالمثل ، يتم استخدام أسافين أجار BHI على نطاق واسع لصيانة السلالات لفترة معينة في المختبر (جرثومي).

يتم تحضين الصفائح أو الأوتاد التي يتم زرعها بواسطة سلالات بكتيرية عند 37 درجة مئوية لمدة 24 إلى 48 ساعة. وفي الوقت نفسه ، في الفطريات ستعتمد درجة الحرارة ووقت الحضانة على نوع الفطريات التي يتم البحث عنها.

كقاعدة أجار لإعداد الوسائط الأخرى

باستخدام هذه القاعدة ، يمكنك إعداد وسائط غنية وانتقائية.

غني

وتتمثل وظيفتها الرئيسية في أن تكون بمثابة أساس لتحضير أجار الدم للاستخدام الروتيني في مختبرات علم الأحياء الدقيقة. على وجه الخصوص ، تساعد قاعدة BHI على عزل Streptococcus sp. ومع ذلك ، فإن لها عيبًا يتمثل في عدم ملاءمتها لمراقبة أنماط انحلال الدم لأنها تحتوي على الجلوكوز.

كما أنها تستخدم في تحضير أجار دم الأرانب أو الحصان لعزل المستدمية sp. للحصول على أفضل النتائج ، يمكن إضافة مكمل التخصيب (IsoVitaleX).

إذا كانت العينات تأتي من الجهاز التنفسي ، فيمكن إضافة الباسيتراسين إلى الأجار لتثبيط النباتات المصاحبة وزيادة احتمالية تعافي المستدمية sp.

بدلاً من ذلك ، يمكن تحضير أجار الدم (لحم الضأن أو الإنسان) مع تيلوريت السيستين لعزل الوتدية الخناق. وبالمثل ، من المفيد تحضير أجار دم الأرانب ، مع إضافة السيستين والجلوكوز لعزل الفرنسيسيلا تولارنسيس.

يتم بذر ألواح أجار الدم عن طريق الإرهاق ويتم تحضينها في درجة حرارة 35-37 درجة مئوية لمدة 24-48 ساعة في ألفة دقيقة (5-10٪ CO ₂).

انتقائي

هذا الوسط مع إضافة المضادات الحيوية يمكن أن يحل محل Sabouraud آجار لعزل الفطريات.

يعتبر مزيج أجار BHI مع الكلورامفينيكول - الجنتاميسين أو البنسلين - والستربتومايسين ودم الحصان مثاليًا لعزل هيستوبلازما كابسولاتوم.

اعتمادًا على الكائن الدقيق المراد عزله ، يوصى بالاحتضان عند 35-37 درجة مئوية أو في درجة حرارة الغرفة في الهوائية. في بعض الأحيان ، تكون الحضانة ضرورية في كلا النطاقين من درجات الحرارة ، باستخدام صفيحتين لهذا الغرض.

يجب تحضين بعض الفطريات مثل Trichophyton mentagrophytes في درجة حرارة الغرفة لمدة تصل إلى 7 أيام.

سؤال وجواب

من كل دفعة معدة ، يوصى باحتضان لوح واحد أو إسفين عند 37 درجة مئوية لمدة 24 ساعة والتحقق من عدم وجود نمو ؛ إنه مهم بشكل خاص عند تحضير أجار الدم ، لأنه وسيلة ملوثة بسهولة.

من ناحية أخرى ، يمكن تقييم جودة الوسط عن طريق تلقيح سلالات معيارية معروفة أو معتمدة ومراقبة تطورها.

وبهذا المعنى ، لتقييم أجار BHI بدون إضافات ، يمكن استخدام سلالات Escherichia coli ATCC 25922 أو Staphylococcus aureus ATCC 25923 أو Candida albicans ATCC 10231 ، ويتم تحضينها عند 37 درجة مئوية في الهواء لمدة 24 إلى 48 ساعة. في جميع الحالات ، من المتوقع نمو مرض.

يمكن زرع سلالات من Streptococcus pyogenes ATCC 19615 أو Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 أو Trichophyton mentagrophytes ATCC 9533 لتقييم ألواح أجار الدم.

يتم تحضين السلالات البكتيرية عند 37 درجة مئوية في ميكرواريوفيليك لمدة 24 ساعة ، في حين يتم تحضين الفطريات في درجة حرارة الغرفة في غرفة رطبة لمدة تصل إلى 7 أيام. من المتوقع حدوث نمو مرض في جميع الحالات.

المراجع

1. مختبرات بريتانيا. آجار ضخ القلب في الدماغ. 2015. متاح على: britanialab.com.
2. مختبرات BD. آجار ضخ قلب الدماغ (BHI). 2013 متاح في: bd.com.
3. لابوراتوريوس ديفكو فرانسيسكو سوريا ملغيزو ، SA تسريب قلب الدماغ آغار. 2009.
4. مختبر نيوجين. آجار ضخ القلب في الدماغ. متاح على: foodafety.neogen.com
5. جيل إم الدم أجار: الأساس والاستخدامات والتحضير. 2018 متاح على: lifeder.com.
6. المساهمين في ويكيبيديا. ضخ قلب الدماغ. ويكيبيديا، الموسوعة الحرة. 19 سبتمبر 2018 ، 03:58 بالتوقيت العالمي المنسق. متاح على: wikipedia.org. تم الوصول إليه في 2 مارس 2019.
7. Forbes B، Sahm D، Weissfeld A. (2009). بيلي وسكوت التشخيص الميكروبيولوجي. 12 إد. التحرير Panamericana SA Argentina.