و أجار BIGGY هو انتقائية المتوسطة الصلبة والثقافة التفاضلية. تم تصميمه لعزل والمساعدة في التعرف على أنواع المبيضات الرئيسية. يأتي اسمها BIGGY من الاسم المختصر باللغة الإنجليزية Bismuth Glucose Glycine Yeast.
تم إنشاء الصيغة الأصلية بواسطة Nickerson ، ولهذا السبب تُعرف هذه الوسيلة أيضًا باسم Nickerson agar. حاليًا يتكون من مستخلص الخميرة ، الجلايسين ، الدكستروز ، سترات الأمونيوم ، سترات البزموت ، كبريتات الصوديوم والأجار.
تمثيل رسومي لأجار بيجي. المصدر: Flickr.com
تمت صياغة BIGGY agar للتمييز بين الأنواع Complex C. albicans و C. و Saccharomyces cerevisiae.
تتمتع بحساسية وخصوصية جيدة ، ومع ذلك ، عند مقارنتها بالوسائط الأخرى ذات الوظيفة المماثلة ، فإنها تأتي في المرتبة الثانية ، حيث تم تجاوزها بواسطة CHROMagar. لهذا السبب ، تفضل العديد من المختبرات الأخيرة ، على الرغم من أنها باهظة الثمن.
يجب أن يكون واضحًا أن استخدام أجار BIGGY ، بالإضافة إلى وسائل أخرى مماثلة ، يساعد في تحديد سريع للافتراض ، ولكن لا يؤكد أبدًا. لذلك ، يجب توفير طرق تعريف إضافية ؛ على سبيل المثال ، أنظمة تعريف Vitek 32 و API 20.
أساس
يعتبر BiGGY agar وسيطًا انتقائيًا جزئيًا لعزل الخمائر ، خاصةً من جنس المبيضات ، على الرغم من أن الأجناس الأخرى يمكن أن تنمو.
وهو أيضًا وسيط تفاضلي لأنه اعتمادًا على الأنواع المعنية ، سيتم ملاحظة الخصائص المختلفة من حيث المظهر واللون والشكل والحجم. يعتبر وسطًا كروموجينيًا ، نظرًا لتطور ألوان مختلفة في المستعمرات.
يرجع لون مستعمرات الخميرة إلى وجود كبريتات البزموت في الأجار. أدرك نيكرسون أن الخمائر من جنس المبيضات تقوم باختزال خارج الخلية لكبريتيت البزموت ، وتحويلها إلى كبريتيد البزموت (مادة سوداء غير قابلة للذوبان). ينتج عن هذا مستعمرات بني فاتح إلى أسود.
يحتوي هذا الأجار على مستخلص الخميرة وسكر العنب ، الذي يوفر مصدرًا للعناصر الغذائية الأساسية والطاقة لتطوير الخميرة. الجليسين هو منبه لنمو الخميرة ، بينما يمنع نمو بعض البكتيريا.
بهذا المعنى نفسه ، تعمل سترات الأمونيوم والبزموت ، وكذلك كبريتيت الصوديوم كمثبطات لنمو البكتيريا. أجار هو العامل الذي يعطي الاتساق المتوسط الصلب.
تجهيز
يزن 45 جم من وسط الاستزراع المجفف ويذوب في لتر من الماء المقطر. يُرج ويُسخن المزيج ويُغلى لمدة دقيقة واحدة حتى يذوب تمامًا. وسيلة الثقافة هذه غير قابلة للتعقيم بالبخار المضغوط.
عند التبريد إلى حوالي 45 درجة مئوية في حمام مائي ، صب 20 مل في أطباق بتري المعقمة.
لون الوسط المجفف رمادي مصفر ويتم تحضيره على شكل جل أبيض مصفر ، حيث يمكن ملاحظة ترسب طفيف.
يجب أن يكون الأس الهيدروجيني 6.8 ± 0.2.
يجب تخزين الوسيط المحضر في الثلاجة (4 درجات مئوية) وحمايته من الضوء. نظرًا لأنه وسيلة لا يمكن تعقيمها ، يجب استخدامها في أسرع وقت ممكن. ينصح باستخدامه قبل 3 أيام من تحضيره.
استعمال
يتم تحضين الأطباق في درجة حرارة الغرفة (25 درجة مئوية) لمدة 24 و 48 و 72 ساعة ، ويمكن تمديد فترة الحضانة حتى 5 أيام.
يطور كل نوع من أنواع المبيضات خصائص معينة تجعله يميز أحدهما عن الآخر. يصف مصنعو الوسيط الخصائص التالية لكل نوع:
- معقد المبيضات البيض: يتطور على هذا الأجار كمستعمرات ناعمة ، مستديرة ، بنية أو سوداء ، مع حدود فطرية طفيفة. باستثناء أن اللون الداكن لا ينتشر إلى المنتصف.
- المبيضات الاستوائية: مستعمرات براقة ، صغيرة ، بنية داكنة مع مركز أسود وحدود فطرية طفيفة. ينتشر اللون الغامق باتجاه الوسط ، وهي خاصية مميزة لهذا النوع ، بعد أن تم تحضينها لمدة 72 ساعة.
- كانديدا كروسي تطور مستعمرات كبيرة ، مسطحة ، خشنة المظهر مع حدود بنية إلى سوداء.
- كانديدا باراكروسي: مستعمرات متوسطة الحجم ، خشنة في معظم الأحيان ، مسطحة. يمكن أن يختلف اللون من البني المحمر الداكن الفاتح إلى البني المحمر الفاتح. تحتوي حدود المستعمرات على أفطورة واسعة النطاق صفراء.
- المبيضات النجمية: تتطور إلى مستعمرات متوسطة ، مسطحة ، بنية داكنة ، سوداء تقريبًا. التنمية الفطرية نادرة جدا.
أظهرت دراسة أجراها Yücesoy و Marol في عام 2003 أن وسط CHROMagar لديه حساسية وخصوصية أفضل للتمييز والتعرف على أنواع المبيضات المختلفة من BIGGY agar.
سؤال وجواب
للتحكم في العقم ، يتم تحضين الصفائح غير الملقحة عند 25 درجة مئوية ، في الظلام لمدة 24 إلى 48 ساعة ، ومن المتوقع ألا يكون هناك نمو من أي نوع ، أو تغير في اللون.
سلالات ATCC الموصى بها لمراقبة جودة الوسط هي:
Candida albicans ATCC 60193 complex، Candida glabrata ATCC 2001، Candida krusei ATCC 34135. في كل منهم ، من المتوقع النمو كما هو موضح أعلاه.
يمكن أيضًا استخدام السلالات التالية:
Escherichia coli ATCC 25922 و Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 و Staphylococcus epidermidis ATCC 12228. في الأولين ، من المتوقع تثبيط كلي ، ولكن في حالة النمو الجزئي ستكون المستعمرات بلون الكريم.
في حالة بكتيريا S. aureus ، من المتوقع أن تكون مثبطة تمامًا ، ولكن إذا نمت جزئيًا ، تكون مستعمراتها بيضاء.
محددات
بعض البكتيريا قادرة على النمو في هذا الوسط ويمكن حتى أن تتحول إلى اللون الداكن ، محاكية مستعمرة الكانديدا ، ولكن عند تلطيخ المستعمرة ومراقبتها تحت المجهر ، يمكن التخلص منها بسهولة.
الجدول: خصائص مستعمرات بعض الخمائر على أجار BIGGY وفقًا لعمل Yücesoy M و Marol S.
المصدر: Yücesoy M و Marol S. Performance of CHROMAGAR candida و BIGGY agar لتحديد أنواع الخميرة. آن كلين ميكروبيول أنتي ميكروب. 2003 ؛ 2 (8): 1-7
المراجع
- Yücesoy M و Marol S. أداء CHROMAGAR candida و BIGGY agar لتحديد أنواع الخميرة. آن كلين ميكروبيول أنتي ميكروب. 2003 ؛ 2 (8): 1-7.
- مختبر MCD. ورقة البيانات الفنية BIGGY Agar. متاح على: mcdlab.net/
- مختبر نيوجين. بيجي أجار. متاح على: foodafety.neogen.com
- مختبرات كوندا بروناديسا. أجار بيجي. متاح في: condalab.com
- مختبرات BD. BD BiGGY Agar (Bismuth Glucose Glycine Yeast Agar). 2011 متوفر على: bd.com