و أجار سيتريميد أو سيتريميد هو انتقائي مستنبت الصلبة المصممة لعزل الزائفة الزنجارية. يعتمد على إظهار إنتاج أصباغ مميزة لهذا النوع وتم صنعه من تعديل Tech agar ، الذي أنشأه King و Ward و Raney.
تحتوي الصيغة الأصلية على أملاح كلوريد المغنيسيوم وكبريتات البوتاسيوم وهضم البنكرياس للجيلاتين وأجار أجار. يتكون تعديل الصيغة من إضافة سيتريميد (سيتيل تراي ميثيل بروميد الأمونيوم) والجلسرين.
أجار سيتريميد المصنف مع Pseudomonas aeruginosa المصدر: BiotechMichael ، من ويكيميديا كومنز
أجار سيتريميد مفيد للدراسة الميكروبيولوجية للعينات التي يشتبه في وجود الزائفة الزنجارية فيها. وتجدر الإشارة إلى أن هذه البكتيريا مهمة للغاية ، لأنها على الرغم من أنها جزء من الكائنات الحية الدقيقة البيئية الطبيعية ، إلا أنها تتصرف في كثير من الأحيان كممرض انتهازي.
لهذا السبب ، فإن إحدى أكثر المشاكل التي تسببها هذه الجرثومة شيوعًا هي التهابات المستشفيات ، أي تلك التي تحدث داخل بيئة المستشفى ، حيث تهاجم المرضى الذين يعانون من ضعف في جهاز المناعة.
من ناحية أخرى ، بسبب تقارب هذا الكائن الدقيق مع الرطوبة ، فإن أهداف التلوث الأكثر عرضة للخطر هي: معدات التنفس المساعدة ، الأدوية ، البخاخات ، مصادر المياه ، مكيفات الهواء ، المطهرات ، محاليل الصابون ، المحاليل القابلة للحقن ، الجروح المفتوحة والقسطرة وأنابيب المسالك البولية وغيرها.
وبهذا المعنى ، فإن أجار الستريميد مفيد لإجراء الضوابط الميكروبيولوجية والثقافات للعناصر المذكورة سابقًا.
أساس
يعتمد أجار سيتريميد على قدرة الوسط على تعزيز نمو P. aeruginosa ، وتحفيز إنتاج أصباغه ، وبالتالي منع نمو الكائنات الحية الدقيقة الأخرى.
هذه الخصائص ترجع إلى وظيفة كل من مكوناتها. يعمل ببتون الجيلاتين كمصدر للنيتروجين والفيتامينات والمعادن. يعمل الجلسرين أو الجلسرين كمصدر للكربون.
من جانبه ، فإن السيتريميد (سيتيل تراي ميثيل بروميد الأمونيوم) هو المادة التي تمنع نمو البكتيريا غير P. aeruginosa ، بما في ذلك الأنواع الأخرى التي تنتمي إلى نفس الجنس.
يحدث التثبيط لأن cetramide يعمل كمنظف كاتيوني ، مما يؤدي إلى زعزعة استقرار غشاء البلازما لمعظم البكتيريا ، باستثناء P. aeruginosa وبعض الأنواع الأخرى التي يمكنها البقاء على قيد الحياة.
من ناحية أخرى ، يحتوي على كلوريد المغنيسيوم وكبريتات البوتاسيوم. تحفز هذه المركبات التعبير الظاهري المتعلق بقدرة Pseudomonas aeruginosa على إنتاج أصباغ مختلفة ، بما في ذلك: البيوسيانين ، والبيوفردين ، والبيوروبين ، والبيوميلانين ، والفلوريسين. أخيرًا ، يحتوي على أجار أجار ، مما يمنحه تناسقًا قويًا.
ترجمة
يتم تفسير النمو الذي تم الحصول عليه في هذا الأجار على النحو التالي:
إن ملاحظة المستعمرات المستديرة الملساء ذات الحواف المنتظمة ، مع إنتاج أصباغ زرقاء مخضرة أو خضراء أو بنية أو حمراء ، بالإضافة إلى انبعاث رائحة الفواكه (aminoacetophenone) ، هي نتيجة افتراضية لوجود هذه البكتيريا في العينة المذكورة.
من ناحية أخرى ، فإن ملاحظة وجود صبغة صفراء مخضرة على المستعمرات تدل على P. الزنجارية عندما تتعرض الصفيحة للأشعة فوق البنفسجية.
تألق مستعمرات P. aeruginosa على أجار سيتريميد تحت الضوء فوق البنفسجي.
وتجدر الإشارة إلى أن كل لون تمت ملاحظته ناتج عن إنتاج صبغة معينة. الصباغ الأزرق والأخضر يتوافق مع إنتاج البيوسيانين ، والأخضر إلى البيوفيردين ، والأحمر إلى البيوروبين ، والبني إلى البيوميلانين ، واللمعان الأصفر والأخضر الساطع تحت ضوء الأشعة فوق البنفسجية للفلوريسين.
تجهيز
تزن 43 جم من الوسط المجفف وتذوب في الماء المقطر. أضف 10 مل من الجلسرين. خذ الخليط إلى مصدر حرارة. اتركه يغلي لبضع دقائق حتى يذوب تمامًا.
الأوتوكلاف عند 121 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة. دعها تقف وتقدم في أطباق بتري المعقمة عندما تكون درجة الحرارة حوالي 50 درجة مئوية.
دعه يتصلب ، قلبه ، اطلبه في بلاكويرو واحفظه في الثلاجة حتى الاستخدام. يجب إزالة ألواح أجار سيتريميد من الثلاجة مسبقًا إلى البذر وتركها تصل إلى درجة حرارة الغرفة.
يجب أن يكون الرقم الهيدروجيني النهائي للوسيط 7.2 ± 0.2.
لون الوسط المجفف بيج والمستحضر أبيض معتم.
التطبيقات
يمكن زرع جميع أنواع العينات التي يشتبه في وجود Pseudomonas aeruginosa فيها على أجار سيتريميد. لذلك فهو مفيد في جميع مجالات علم الأحياء الدقيقة (البيئية ، الصناعية ، السريرية ، المائية والغذائية).
من الأهمية بمكان تحليل بيئات المستشفى وبالتالي التمكن من تطبيق الإجراءات التصحيحية ، حيث يصل هذا الكائن الدقيق إلى المرضى من خلال المعدات والأدوية والحلول والإمدادات الملوثة التي يستخدمها المريض.
بهذه الطريقة ، يمكن للكائنات الحية الدقيقة أن تصيب الجهاز التنفسي السفلي والمسالك البولية وجروح المرضى الذين يعانون من كبت المناعة.
يمكن أيضًا تعداد مستعمرات P. aeruginosa في اختبارات الحد الميكروبي.
زرعت
يمكن استخدام أجار الستريميد كثقافة أولية. يتم تلقيح الصفيحة على أحد حوافها ومن هناك يتم توزيعها عن طريق الإرهاق إلى بقية اللوحة. يمكن بذر العينات السائلة على السطح باستخدام ملعقة دريغالسكي.
يتم تحضين الصفائح الهوائية عند 37 درجة مئوية لمدة 24 ساعة من الحضانة.
محددات
- لا تنتج نسبة صغيرة من سلالات Pseudomonas aeruginosas مادة البيوسيانين ، لذلك يمكن تفسير نتيجة سلبية خاطئة.
- بعض أنواع Pseudomonas ذات الأهمية السريرية تم تثبيطها في هذا الوسط.
- على الرغم من ملاحظة الخصائص الموصوفة لـ Pseudomonas aeruginosa ، يجب دعمها باختبارات تعريف إضافية. الاختبار الذي لا ينبغي تفويته هو اختبار أوكسيديز ، ويجب أن يعطي نتائج إيجابية.
- يمكن لبعض البكتيريا المعوية أن تنمو في هذا الوسط وتتحول إلى صبغة صفراء ، ولكنها تختلف عن Pseudomonas aeruginosa في أنه عندما تتعرض الصفيحة للأشعة فوق البنفسجية فلا يوجد فلورة.
- تمكنت Serratia marcescens من تطوير وإنتاج صبغة وردية اللون.
- إذا تم تعريض الصفائح المصنّعة بأجار سيتريميد لبعض الوقت في درجة حرارة الغرفة ، فقد تفقد سلالات P. aeruginosa التألق الملحوظ تحت الضوء فوق البنفسجي ، ومع ذلك يتم استعادة الخاصية إذا تم تحضينها مرة أخرى عند 37 درجة مئوية.
سؤال وجواب
لتحليل الأداء الجيد لآجار الستريميد ، يمكن استخدام سلالات التحكم ، مثل: Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 ، Stenotrophomonas maltophilia ATCC 13637 ، Escherichia coli ATCC 25922 و Staphylococcus aureus ATCC 25923.
النتائج المتوقعة هي:
- نمو جيد لفيروس P. الزنجارية ، مع صبغة خضراء مزرقة وفلورسين إيجابي.
- سوف يتم تثبيط S. maltophilia و S. aureus جزئيًا إلى كليهما.
- من المتوقع أن يتم تثبيط الإشريكية القولونية تمامًا.
المراجع
- Callicó A، Cedré B، Sifontes S، Torres V، Pino Y، Callís A، Esnard S. التوصيف المظهري والمصلي للعزلات السريرية من Pseudomonas aeruginosa. VacciMonitor. 2004 ؛ 13 (3): 1-9.
- مختبرات كوندا بروناديسا. قاعدة أجار سيتريميد. 2014 متاح في: condalab.com
- مختبرات بريتانيا. أجار سيتريميد. 2015 متاح على: britanialab.com
- مختبرات BD. أجار BD Pseudosel (أجار سيتريميد). 2013 متاح في: bd.com
- مختبر فرانسيسكو سوريا ملغيزو ، كاليفورنيا أجار سيتريميد. 2009 متاح على: