أجار الشوكولاتة: الأساس والاستخدامات والتحضير - مادة الاحياء - 2026

و أجار الشوكولاته هو مستنبت الصلبة، مما أثرى، غير - انتقائية وغير - التفاضلية. يتم استخدامه بشكل أساسي لعزل الكائنات الحية الدقيقة التي تتطلب وجهة نظر غذائية ، على الرغم من أن أي نوع من البكتيريا يمكن أن ينمو فيه.

لهذا السبب ، تزيد فائدته خاصة في بذر العينات التي تكون عقيمة عادة ، مثل السائل النخاعي وسوائل المفاصل. على الرغم من أنه يتم تضمينه أيضًا ضمن الوسائل المختارة لزرع العينات متعددة الميكروبات ، إلا أنه من الضروري في هذه الحالات إضافة مضادات حيوية تمنع النباتات المصاحبة.

أجار الشوكولاتة مع نمو البكتيريا

هذا الوسط له لون بني مميز يشبه إلى حد بعيد الشوكولاته ، ومن هنا جاء اسمه. المستحضر مشابه جدًا لمستحضر أجار الدم ، فقط في هذه الحالة يجب تسخين الدم حتى تتفكك خلايا الدم الحمراء.

تحضيره ، مثل أجار الدم ، حساس للغاية ، لأنه من السهل تلوثه. لهذا السبب تفضل العديد من المعامل اقتناء هذه الوسيلة المعدة بالفعل من قبل الشركات التجارية التي تضمن جودتها.

أساس

يتكون هذا الوسط من قاعدة أجار غنية بالمغذيات ودم ساخن. يوفر انحلال الدم في خلايا الدم الحمراء العامل X (الهيمين) والعامل الخامس (NAD) الضروريين لنمو بعض الكائنات الحية الدقيقة ، مثل جنس المستدمية. كما أنه مفيد جدًا لعزل Neisserias sp.

مثل أجار الدم ، يمكن استخدام وسائط مختلفة كأجار أساسي حسب الحاجة. من بين الوسائط المستخدمة ضخ قلب الدماغ وأجار الصويا تريبتيسيز ، على الرغم من أن الأكثر استخدامًا هو كولومبيا أجار ومولر هينتون وجي سي أجار وثاير مارتن أجار.

تتضمن بعض أنواع أجار الشوكولاتة مكملًا مدعمًا متاحًا تجاريًا يسمى Isovitalex أو Polivitex.

تحتوي هذه المكملات على فيتامين ب ₁₂ ، إل-جلوتامين ، الأدينين ، هيدروكلوريد الجوانين ، حمض ب-أمينوبنزويك ، نيكوتيناميد الأدينين ثنائي النوكليوتيد (NAD) ، بيروفوسفات الثيامين ، نترات الحديديك ، هيدروكلوريد الثيامين ، هيدروكلوريد السيستين ، إل سيستين ، والجلوكوز.

من المهم ملاحظة أن آجار الشوكولاتة أكثر إثراء من أجار الدم ، لكنه لا يسمح بمراقبة أنماط انحلال الدم.

التطبيقات

المصدر: pixnio.com. المؤلف:

بيت سيدل ، أماندا مور ، إم تي ، تود باركر ، دكتوراه ، أودرا مارش ، USCDCP

أجار الشوكولاتة المحضر مع أجار كولومبيا

يحتوي هذا الوسط على هضم البنكرياس للكازين والقلب ، والهضم الهضمي للحوم ، وكلوريد الصوديوم ، والأجار ، وخلاصة الخميرة ونشا الذرة. كما أنها غنية بالفيتامينات والمعادن والأحماض الأمينية الأساسية.

هذه القاعدة الدموية الساخنة مثالية لعزل البكتيريا من جنس النيسرية. من ناحية أخرى ، إذا تمت إضافة مكمل البروسيلا أيضًا إلى الوسط ، فيمكن عزل الكائنات الحية الدقيقة المذكورة. يتم تحسين النتائج باستخدام دم الحصان.

أجار الشوكولاتة المحضر بأجار القاعدة GC (للمكورات البنية)

تحتوي هذه الوسيلة على ببتون ، ونشا ذرة ، ومحاليل أحادية القاعدة وثنائية القاعدة ، وكلوريد الصوديوم ، وأجار.

تأتي معظم عروض أجار الشوكولاتة المحضرة تجارياً مع هذه القاعدة ولا تحتوي على دم ساخن ، بل خليط تركيبي من الهيمين ومكمل كيميائي لعوامل النمو والفيتامينات والمعادن والأحماض الأمينية والعامل الخامس والجلوكوز.

أجار الشوكولاتة المحضر بأجار مولر هينتون

يتم استخدامه لاختبار قابلية مضادات الميكروبات للكائنات الدقيقة الحساسة ، مثل Streptococcus pneumoniae باستخدام 5 ٪ من دم الأغنام الساخن.

كما أنها تستخدم للعزل الأولي للنيسرية والمستدمية ، ولكن في حالة عزل المستدمية ، يفضل استخدام دم الحصان ، حيث أنه مصدر غني للعامل X و V.

من ناحية أخرى ، إذا كانت العينة المراد زرعها تأتي من منطقة غير معقمة ، يوصى بإضافة المضادات الحيوية لتثبيط الفلورا الطبيعية في المنطقة.

مثال لعينات الجهاز التنفسي حيث يشتبه في وجود بكتيريا من جنس المستدمية ، يتم استخدام باسيتراسين لتثبيط نمو المكورات العنقودية والمكورات الدقيقة والمكورات العقدية والنيسرية الرخامية.

في حالة عينات القرحة التناسلية ، حيث يُشتبه في وجود Haemophilus ducreyi ، تم استخدام آجار الشوكولاتة المحضر على النحو التالي بنجاح: Müeller - Hinton Agar مع 5 ٪ من دم الحصان بالشوكولاتة ، 1 ٪ إثراء Isovitalex و 3 ميكروغرام / مل فانكومايسين.

أجار الشوكولاتة المحضر مع ثاير مارتن أجار

هذه الوسيلة خاصة لعزل النيسرية البنية. يجب أن تحتوي على مضادات حيوية لتثبيط النباتات المصاحبة. يستخدم دم الضأن.

تجهيز

يجب أن ترى مؤشرات لإعداد قاعدة أجار لاستخدامها. توجد على الجزء الخلفي من الحاوية من الوسط المجفف. يصفون عمومًا مقدار الوزن الذي يجب أن تزنه لإعداد لتر من وسط الثقافة.

يمكن تحضير الكمية الدقيقة المطلوبة في المختبر ، ويمكن أن تكون أكثر أو أقل من لتر.

العمليات الحسابية

تُستخدم القاعدة الثلاثة لحساب مقدار الوزن لتحضير الحجم المطلوب. مثال:

إذا كان من الضروري أن تزن 40 جرامًا لكل لتر 1 ويتطلب المختبر 800 مل ، فيقال:

1000 مل ----------- 40 جرام

800 مل -----------– X

ستكون الصيغة كما يلي:

X = 32 غرام (الكمية تزن 800 مل).

تزن وتذوب

يتم وزن الكمية اللازمة ووضعها في دورق مع الماء.

سخنيها على نار معتدلة واخلطيها بلطف بحركات دوارة حتى يذوب الوسط المجفف تمامًا ، مما يتركه يغلي لمدة دقيقة واحدة.

طهر

يتم وضع القارورة في الأوتوكلاف لتعقيم الوسط عند 121 درجة مئوية لمدة 20 دقيقة.

تجمع الدم

عند مغادرة الأوتوكلاف ، يُسمح له بالوقوف حتى تصل درجة حرارة الوسط تقريبًا بين 56 إلى 70 درجة مئوية لوضع الدم ويخلط حتى يتحول الوسط إلى اللون البني.

إذا كنت تضيف مكملات ، فهذا هو الوقت المناسب للقيام بذلك. تخلط فيما بعد وتقدم 20 مل لكل طبق بتري معقم.

يجب أن يتم الإجراء بأكمله في غطاء تدفق رقائقي أو حول موقد بنسن.

دعها تقف حتى تتصلب وتخزن في الثلاجة.

طريقة أخرى لتحضير أجار الشوكولاتة بدون استخدام الدم

يتم تحضير الوسط الأساسي كما هو موصوف أعلاه ، ويتم إذابة الهيموغلوبين المجفف الذي تم الحصول عليه تجاريًا وتعقيمه في الأوتوكلاف.

يُسمح لكلا الحلين بالتبريد إلى 50 درجة مئوية ، ويتم ضمهما وإضافة الملحق. تخلط في ظروف معقمة ثم تقدم في أطباق بتري المعقمة.

سؤال وجواب

من المهم أن يتم وضع الدم في درجة الحرارة المحددة ، حيث إنه الدم المثالي لاستيعاب خلايا الدم الحمراء وفي نفس الوقت الحفاظ على العامل الخامس ، وهو حساس للحرارة.

يجب ألا تبقى فقاعات على سطح الآجار. من كل دفعة مكونة من 100 لوحة ، يجب تحضين طبق أو لوحين في الفرن عند 37 درجة مئوية لمدة 24 ساعة للتحقق من عقمها.

للحصول على أفضل النتائج ، يجب استخدام أجار الشوكولاتة بعد وقت قصير من التحضير.

يجب الاحتفاظ بالسلالات البكتيرية المكافحة في المختبر لتقييم فعالية الوسط الجديد لنمو الكائنات الحية الدقيقة الرئيسية ذات الأهمية السريرية.

المراجع

1. García P، Paredes F، Fernández del Barrio M. (1994). علم الأحياء الدقيقة السريرية العملي. جامعة قادس الطبعة الثانية. خدمة منشورات UCA.
2. Forbes B، Sahm D، Weissfeld A. (2009). بيلي وسكوت التشخيص الميكروبيولوجي. 12 إد. الأرجنتين. التحرير Panamericana SA
3. Koneman E ، Allen S ، Janda W ، Schreckenberger P ، Winn W. (2004). التشخيص الميكروبيولوجي. (الطبعة الخامسة). الأرجنتين ، الافتتاحية Panamericana SA
4. Llanes R ، Reyes A ، Rodríguez C ، Guzmán D ، Llop A. جدوى استخدام وسط زراعة قاعدة GC-Biocen Agar في مختبر الأحياء الدقيقة. القس كوبانا ميد تروب ، 2004 ؛ 56 (3): 237-238. متاح على: scielo.sld.
5. المساهمين في ويكيبيديا. أجار الشوكولاتة. ويكيبيديا، الموسوعة الحرة. 17 ديسمبر 2018 ، الساعة 19:54 بالتوقيت العالمي المنسق. متاح على: en.wikipedia.org.