أجار دقيق الذرة: الخلفية والتحضير والاستخدام - مادة الاحياء - 2025

و أجار وجبة الذرة هو مستنبت الصلبة، وانخفاض القوة الغذائية، ومفيد لsubculturing بعض الفطريات ومما يدل على chlamydospores في سلالات من المبيضات البيض المجمع. في اللغة الإنجليزية يُعرف باسم Corn Meal Agar.

يحتوي وسط دقيق الذرة التقليدي على تركيبة بسيطة للغاية ، فهو يحتوي على دقيق الذرة وأجار أجار والماء. نظرًا لانخفاض مستواها الغذائي ، فهو مثالي للاستخدام في الحفاظ على السلالات الفطرية لفترات زمنية معتدلة ، وخاصة الفطريات السوداء.

A. تمثيل رسومي لمجمع Candida albicans على أجار دقيق الذرة. B. Chlamydospores من مجمع Candida albicans تحت المجهر ، وتكونت على أجار دقيق الذرة. المصدر: A. GrahamColm / B. By: CDC / Dr. وليام كابلان ، بإذن من: مكتبة صور الصحة العامة.

يُفضل تكوين أبواغ مركب Candida albicans في هذا الوسط ، إذا تمت إضافة 1 ٪ من Tween 80 أثناء تحضير الأجار. يعتبر تكوين المتدثرة من سمات هذا النوع وعمليًا النوع الوحيد الذي يؤثر على البشر.

هناك أنواع أخرى تكوِّن الأبواغ المتدثرة ، ولكن من غير المحتمل أن تؤثر على البشر ، مثل المبيضات الأسترالية الموجودة في فضلات البطريق ، أو C. clausenii ، وهو نوع نادر الوجود. وبالمثل ، فإن النوعين C. stellatoidea و C.

من ناحية أخرى ، فإن إضافة الجلوكوز إلى وسط دقيق الذرة يساعد على تكوين أصباغ في سلالات Trichophytom rubrum.

من المهم أن نلاحظ أن هناك فطريات لا تشكل خيوط أو زائفة في أجار دقيق الذرة ، مثل Cryptococcus neoformans ، تختلف عن الأجناس الأخرى.

يمكن صنع أجار دقيق الذرة في المنزل في المختبر أو يمكن أيضًا استخدام الوسائط التجارية.

أساس

دقيق الذرة هو الركيزة ، والأجار هو عامل التصلب ، والماء هو المذيب.

يمكن استكمال أجار دقيق الذرة بـ توين 80 (سوربيتان أحادي أو بولي سوربات 80). يقلل هذا المركب من التوتر السطحي للوسط بسبب قدرته على الاستحلاب.

كما أنه يخلق بيئة معادية تمنع تكاثر الخلايا المبالغ فيه ويحفز نمو الخيوط ، ويفضل أيضًا إنتاج الأبواغ المتدثرة ؛ يعتبر الأخير هياكل المقاومة. يساعد هذا الهيكل في التعرف على أنواع المبيضات البيض.

من جانبه ، يزيد الجلوكوز في هذا الوسط من قدرة تكوين الصباغ لبعض الفطريات.

وتجدر الإشارة إلى أن وسط دقيق الذرة مع الجلوكوز ليس مفيدًا لتوضيح المتدثرة في مجمع المبيضات البيض.

تجهيز

تحضير أجار دقيق الذرة محلي الصنع

يزن 47 جم من دقيق الذرة الصفراء ويذوب في 500 مل من الماء المقطر. يُسخن إلى 60 درجة مئوية ، مع تحريك التحضير لمدة ساعة تقريبًا. ثم قم بالتصفية من خلال قطعة من الشاش والقطن ، ويمكن ترشيحها اختياريًا مرة أخرى عن طريق تمرير المستحضر عبر ورق ترشيح Whatman No. 2.

اجعل الحجم يصل إلى 1000 مل بالماء المقطر. أضف 17 جم من أجار أجار ، سخنه حتى يذوب. الأوتوكلاف لمدة 15 دقيقة عند 121 درجة مئوية.

تقدم في أطباق بتري معقمة. احفظه في الثلاجة.

لون الوسيط المحضر أبيض مع مظهر متكتل.

إذا كنت ترغب في تحضير دقيق الذرة بالجلوكوز إلى المستحضر الموصوف أعلاه ، أضف 10 جم من الجلوكوز.

أجار دقيق الذرة التجاري

تزن 17 جم من الوسط المجفف وتذوب في 1 لتر من الماء المقطر. يمكن تسخين الخليط مع رجّه بلطف ليذوب تمامًا. تعقيم في الأوتوكلاف عند 121 درجة مئوية ، عند 15 رطلاً ، لمدة 15 دقيقة.

تصب في أطباق بتري المعقمة. دعها تصلب. اقلبها واحفظها في الثلاجة لحين الاستخدام. المزاج قبل الاستخدام.

يجب أن يكون الأس الهيدروجيني 6.0 ± 0.2 عند 25 درجة مئوية.

أجار دقيق الذرة مع توين 80

للامتثال للمواصفة ISO 18416 ، يجب تحضير أجار دقيق الذرة على النحو التالي:

يزن 65 جرام لكل لتر ويضاف 10 مل من Tween 80. سخن واتركه يغلي لبضع دقائق حتى يذوب ، مع الحرص على عدم ارتفاع درجة الحرارة أكثر من اللازم. تعقيم عند 121 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة.

دقيق الذرة أجار مع الجلوكوز

لتحسين القوة الصبغية لمستعمرات Trichophyton rubrum وتمييزها عن T. mentagrophytes ، يمكن إضافة 0.2٪ من الجلوكوز إلى الصيغة الأصلية. لا تحتاج إلى أن يكون لديك توين 80 ، لأن الجلوكوز يثبط تكوين الأبواغ المتدثرة.

استعمال

بشكل أساسي ، فإن استخدام أجار دقيق الذرة مخصص لدراسة سلالات المبيضات ، مما يساعد على التعرف عليها من خلال الملاحظة المميزة للأبواغ المتدثرة في أنواع البيض. أي أن استخدام هذا الأجار بمثابة طريقة مساعدة لتحديد هذه الخمائر.

يمكن أن يتطور كلا النوعين الممرضين والممرضين على هذا الأجار ، لكن كل منها يشكل هياكل فطرية مميزة. على سبيل المثال ، لا تنتج الأنواع من جنس Torulopsis الفطريات وتتكاثر فقط بواسطة blastoconidia.

وبالمثل ، تنتج أنواع Trichosporon و Geotrichum arthroconidia على أجار دقيق الذرة ، ويصعب أحيانًا التمييز بين أحدهما والآخر.

ينتج Arthroconidia من جنس Geotrichum امتدادًا للخيوط يشبه عصا الهوكي.

كما أن إنتاج الأصباغ باستخدام أجار دقيق الذرة المضاف إليه الجلوكوز مفيد في تحديد Trichophytom rubrum.

زرعت

مستعمرات المبيضات المشبوهة التي تم الحصول عليها في وسط الاستزراع الأولي - Sabouraud agar - من العينات السريرية ، ومستحضرات التجميل ، والتربة ، من بين أمور أخرى ، تتم زراعتها على أجار دقيق الذرة. يتم بذر الوسط واحتضانه عند 22 درجة مئوية لمدة 24 إلى 48 ساعة. يمكن إطالة وقت الحضانة إذا لزم الأمر.

مظاهرة Chlamydospore

لهذا الغرض ، يجب تلقيح أجار دقيق الذرة مع توين 80 باستخدام تقنية Dalmau. تتكون هذه الطريقة من أخذ جزء من المستعمرة المشتبه بها بالمقبض البلاتيني وعمل ثلاث قطع متوازية في المنتصف ، مع إبقاء المقبض عند 45 درجة. يجب فصل القطع بمسافة 1 سم عن بعضها البعض.

بعد ذلك ، يتم وضع جسم غطاء ملتهب سابقًا على الخطوط التي تم زرعها ، بحيث يتم تغطية النصف والآخر غير مغطى.

احتضان اللوحات المصنفة عند 30 درجة مئوية لمدة 48-72 ساعة ثم فحصها تحت المجهر من خلال زلة الغطاء.

صيانة السلالات الفطرية

للحفاظ على السلالات ، يتم حفظ الأطباق المصنفة والمزروعة في الثلاجة (4 إلى 8 درجات مئوية). وبهذه الطريقة يمكن أن تستمر عدة أسابيع ويمكن استخدامها لأغراض التدريس أو البحث.

سؤال وجواب

للتحكم في التعقيم ، يتم تحضين الصفيحة دون تلقيح في درجة حرارة الغرفة ، ومن المتوقع ألا يكون هناك نمو أو تغير في اللون.

لمراقبة الجودة ، يمكن زرع سلالات معروفة مثل: Staphylococcus aureus ، ATCC 6538 ، Escherichia coli ATCC 25922 ، Aspergillus niger ATCC 16404 ، Candida albicans ATCC 1023 ، Saccharomyces cerevisiae ATCC 9763.

النتائج المتوقعة هي تثبيط جزئي للمكورات العنقودية الذهبية والإشريكية القولونية. بينما من المتوقع حدوث نمو مرضٍ في باقي السلالات.

ينمو Aspergillus niger مع مستعمرات سوداء ومبوغة في وقت تقريبي يبلغ 5 أيام من الحضانة.

مستعمرات خميرة المبيضات البيضاء مع إنتاج الكلاميديا.

تنتج خميرة الخميرة خلايا خميرة كبيرة.

محددات

يتشكل راسب أصفر في الجزء السفلي من الصفيحة لا ينبغي الخلط بينه وبين المستعمرات.

المراجع

1. مختبرات نيوجين. وجبة ذرة أجار. متاح على: foodafety.neogen.com.
2. ثقافة وسائل الإعلام Microkit. وجبة ذرة أجار. متاح على: Medioscultivo.com.
3. Linares M ، Solís F. دليل تحديد الخميرة. متاح على: http: //www.guia.revibero.
4. Urcia F، Guevara M. Rev. Per Med.Exp. الصحة العامة ، 2002 ؛ 19 (4): 206-208. متاح في: Scielo.com
5. Casas-Rincón G. علم الفطريات العام. 1994. الطبعة الثانية جامعة فنزويلا المركزية ، إصدارات المكتبات. فنزويلا كراكاس.
6. Forbes B، Sahm D، Weissfeld A. (2009). بيلي وسكوت التشخيص الميكروبيولوجي. 12 إد. التحرير Panamericana SA Argentina.
7. Koneman E ، Allen S ، Janda W ، Schreckenberger P ، Winn W. (2004). التشخيص الميكروبيولوجي. 5th إد. التحرير Panamericana SA Argentina.
8. Castillo E. دراسة مقارنة لبعض الطرق الكلية والميكروسكوبية لعزل والتعرف على جنس المبيضات. القس الكولومبي للعلوم الكيميائية الصيدلانية. 1970 ؛ 3 (1): 33-57. متاح على: Ciencias.unal.edu.co