و أجار مانيتول الملح أو ملح MANITOL هو انتقائية المتوسطة الصلبة والثقافة التفاضلية. تم إنشاؤه بواسطة تشابمان لعزل المكورات الممرضة إيجابية الجرام ، وخاصة المكورات العنقودية الذهبية.
ومع ذلك ، من المفيد أيضًا عزل Staphylococus epidermidis ، والذي يمكن أن يكون موجودًا في بعض الأحيان كممرض انتهازي ، و Staphylococcus saprophyticus ، أحد مسببات الأمراض البولية المعروفة ، من بين الأنواع الأخرى.
أ. فيولا مع وسط أجار مانيتول مالح محضر. B. ألواح أجار المانيتول المملحة المصنفة بسلالات بكتيرية مانيتول مخمرة وغير مخمرة. المصدر: أ و ب: الصور التي التقطها المؤلف ماجستير. مارييلسا جيل.
بعض المكورات المعوية قادرة على النمو في هذا الوسط ، بالإضافة إلى بعض قضبان تكوين الأبواغ إيجابية الجرام.
هذه الوسيلة مفيدة جدًا في تحليل العينات السريرية ، ولكنها تستخدم أيضًا في الدراسة الميكروبيولوجية للأغذية وفي مراقبة جودة المنتجات الصناعية ، مثل مستحضرات التجميل والأدوية وغيرها.
يتكون مالح مانيتول أجار من مستخلصات وبيبتون من لحوم البقر والتريبتين والمانيتول وكلوريد الصوديوم والفينول الأحمر والأجار.
أساس
أجار المانيتول انتقائي بفضل تركيزه العالي من الملح. تعمل الملوحة كمادة مثبطة وتمنع نمو البكتيريا سالبة الجرام.
كما أنه تفاضلي بسبب وجود مانيتول الكربوهيدرات ومؤشر درجة الحموضة الحمراء الفينول. من هذا ، فإن البكتيريا القادرة على تخمير المانيتول تنتج الأحماض ، وتحمض الوسط ، وتحول المستعمرات والأصفر المتوسط.
من ناحية أخرى ، تنمو المستعمرات التي لا تخمر المانيتول في الوسط وتأخذ العناصر الغذائية التي توفرها مستخلصات وبيبتون اللحوم والتريبتين. من هناك تستخرج البكتيريا الكربون والنيتروجين والفيتامينات والمعادن الضرورية لنموها.
يمكن أن تكون المستعمرات في هذه الحالة ضعيفة أو زهرية قوية ، ويظل الوسط بنفس اللون أو يتغير إلى اللون الفوشيا.
أجار هو المادة التي توفر الاتساق للوسط.
تجهيز
لتحضير لتر من أجار المانيتول المالح ، يتم وزن 111 جرام من الوسط المجفف من الشركة التجارية المفضلة وتذويبها في 1000 مل من الماء المقطر باستخدام دورق.
يتم تطبيق الحرارة مع التقليب المتكرر للوسط لتحسين عملية الذوبان. يغلي لمدة دقيقة.
يتم وضع القارورة في الأوتوكلاف عند 121 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة.
في نهاية الوقت ، أخرج القارورة من الأوتوكلاف ، واتركها ترتاح وتخدم ما بين 15 إلى 20 مل على أطباق بتري المعقمة عندما تكون درجة الحرارة حوالي 50 إلى 55 درجة مئوية.
يُسمح له بالتجميد ، والطلب بطريقة مقلوبة في البلاكيروس والاحتفاظ به في الثلاجة حتى الاستخدام. قبل زرع عينة ، انتظر حتى تصل اللوحة إلى درجة حرارة الغرفة.
يتم زرع الألواح عن طريق وضع خطوط أو بذر سطحي باستخدام ملعقة دريغالسكي. يجب أن يكون الرقم الهيدروجيني النهائي للوسط المحضر 7.4 ± 0.2
لون الوسط المجفف بيج فاتح ولون الوسيط المحضر أحمر برتقالي.
التطبيقات
نظرًا لانتقائية عالية ، تعتبر هذه الوسيلة مثالية لبذر العينات ذات النباتات المختلطة التي يتم فيها البحث عن وجود Staphylococus aureus ، باعتباره العامل الممرض الرئيسي لهذا الجنس.
وبهذا المعنى ، فإن أحد أكثر استخداماته شيوعًا هو التحليل الميكروبيولوجي للإفرازات البلعومية وعينات الإفرازات الأنفية ، وخاصة للكشف عن ناقلات العنقودية الذهبية بدون أعراض.
نفذت بعض البلدان هذا التحليل كشرط إلزامي للأشخاص الذين يرغبون في العمل كبائعي أغذية.
يمنع هذا التحكم الأشخاص الحاملين للمكورات العنقودية الذهبية من التوظيف ، وبالتالي تجنب التسمم الغذائي الهائل بسبب استهلاك الأطعمة الملوثة بالسموم المعوية العنقودية.
يمكن أيضًا تضمينه في نثر التهابات الجروح ، ومزارع الدم ، و CSF ، وغسيل القصبات الهوائية ، من بين أمور أخرى.
أجار المانيتول المملح مفيد لإعادة عزل المستعمرات من مزارع البول من أجار CLED أو أجار الدم الذي كشف غرامه عن مكورات إيجابية الجرام في مجموعات.
وهي صالحة أيضًا في التحليل الميكروبيولوجي للأغذية ومياه الشرب والتربة ، من بين تطبيقات أخرى.
سؤال وجواب
بمجرد تحضير مجموعة من الأطباق التي تحتوي على أجار مانيتول مالح ، يُنصح بإجراء مراقبة الجودة. يتم زرع سلالات التحكم لإظهار ما إذا كان هناك نمو أم لا.
يمكن استخدام سلالات Staphylococcus aureus المعروفة كعنصر تحكم إيجابي. يجب أن ينمو بشكل مرض مستعمرات صفراء ، ويتحول الوسط أيضًا إلى نفس اللون.
وبالمثل ، من الملائم تضمين سلالة معروفة من بكتيريا Staphylococcus epidermidis. يجب أن ينمو بشكل مرض مستعمرات وردية ، ويظل الوسط بنفس اللون أو يغمق إلى اللون الوردي الأقوى.
كعنصر تحكم سلبي ، يتم استخدام السلالات التي لا ينبغي أن تنمو على هذا الوسط. على سبيل المثال ، يمكن زراعة سلالة معروفة من Escherichia coli أو Klebsiella pneumoniae. النتيجة المتوقعة هي تثبيط كامل ، أي عدم نمو.
بالإضافة إلى ذلك ، يجب تحضين الصفيحة غير الملقحة. يجب ألا يكون هناك نمو أو تغيير في اللون.
من المهم عدم استخدام الصفيحة في حالة وجود علامات تدهور ، مثل التلوث والجفاف وتغير اللون وغيرها.
افكار اخيرة
عند استخدام وسط أجار المانيتول المالح ، هناك بعض الجوانب المهمة التي يجب مراعاتها:
- إن الحصول على نمو للمستعمرات الصفراء لا يدل على أنها Staphylococcus aureus. يجب أن نتذكر أن بعض سلالات المكورات المعوية قادرة على النمو في هذا الوسط وتخمر المانيتول ، بالإضافة إلى بعض العصي الموجبة للجرام المكونة للبوغ.
لذلك ، من المهم إجراء غرام على المستعمرة واختبار الكاتلاز.
-من ناحية أخرى ، يجب الأخذ في الاعتبار أن أنواع المكورات العنقودية الأخرى غير المذهبة قادرة أيضًا على تخمير المانيتول. لذلك ، من المهم تربية المستعمرة على مرق مغذي لأخذها وإجراء اختبار تجلط الدم.
من بين أنواع المكورات العنقودية ذات الأهمية السريرية للإنسان التي تخمر المانيتول: S. aureus ، S. simulans ، S. capitis ssp capitis ، S. capitis ssp urealyticus ، S. xylosus ، S. cohnii ssp urealyticum ، من بين أمور أخرى.
يمكن للآخرين إعطاء رد فعل متغير ، يكون إيجابيًا في بعض الأحيان وأحيانًا سلبيًا. البعض منها S. saprophyticus ، S. haemolyticus ، S. warneri ، S. intermedius ، من بين آخرين.
- لا ينصح بأخذ المستعمرات مباشرة من مانيتول أجار لإجراء اختبار تجلط الدم ، لأن التركيز العالي للملح في الوسط يمكن أن يتداخل مع النتيجة.
- أخيرًا ، يوصى باحتضان الأطباق المصنفة بالمانيتول المالح لمدة تصل إلى 48 ساعة ، لأن بعض سلالات S. aureus يمكن أن تخمر المانيتول ببطء ، على الرغم من أن هذا ليس متكررًا جدًا.
المراجع
- مختبرات بريتانيا. أجار مانيتول مالح. 2015 متاح على: britanialab.com
- "مالح مانيتول أجار". ويكيبيديا، الموسوعة الحرة. 31 أكتوبر 2018، 19:08 UTC. 17 يناير 2019 ، 20:55 ، متاح على: es.wikipedia.org.
- Koneman E ، Allen S ، Janda W ، Schreckenberger P ، Winn W. (2004). التشخيص الميكروبيولوجي. (الطبعة الخامسة). الأرجنتين ، الافتتاحية Panamericana SA
- Forbes B، Sahm D، Weissfeld A. (2009). بيلي وسكوت التشخيص الميكروبيولوجي. 12 إد. الأرجنتين. التحرير Panamericana SA
- مختبرات BD. BD مانيتول ملح أجار. 2013 متاح في: bd.com.