و أجار السالمونيلا المعروف أيضا باسم SS أجار هو انتقائية والمتوسطة التفاضلية باعتدال، مصممة خصيصا لعزل البكتيريا ممرض للأمعاء من أجناس السالمونيلا والشيجلا، سواء العينات البيئية مثل السريرية.
يحتوي أجار SS على تركيبة معقدة ؛ يتكون من مستخلص اللحوم ، الببتون ، اللاكتوز ، أملاح الصفراء ، سترات الصوديوم ، ثيوكبريتات الصوديوم ، سترات الحديديك ، أجار ، أحمر محايد ، أخضر ساطع وماء مقطر. نظرًا لانتقائية كبيرة ، يمكن زرع عينات ذات نباتات مختلطة وفيرة.
أجار SS مع مستعمرات Salmonella sp. المصدر: Manurx27 ، من ويكيميديا كومنز
في مختبرات علم الأحياء الدقيقة ، يتم استخدام وسط السالمونيلا - الشيغيلا على نطاق واسع للتحقق من وجود السالمونيلا والشيجيلا في عينات البراز الإسهال ومياه الصرف الصحي ومياه الشرب والطعام.
في بعض الأحيان يكون من الضروري استخدام مرق ما قبل التخصيب (مرق اللاكتوز) ومرق التخصيب (مرق السيلينيت السيستين) لاستعادة سلالات السالمونيلا.
هذه الخطوات مطلوبة عند الاشتباه في وجود السالمونيلا بكميات منخفضة جدًا ، أو عندما يتم إساءة استخدام السلالة من خلال العمليات النموذجية للإنتاج الصناعي ، وخاصة الأطعمة المصنعة. يُنصح أيضًا بإثراء عينات البراز من المرضى الذين عولجوا بالمضادات الحيوية.
بعد ذلك ، يمكن زرع المرق المخصب على أجار السالمونيلا-شيغيلا وغيرها من الوسائط المماثلة ، مثل زيلوز أجار ، ليسين ديوكسيكولات (XLD) وأجار هيكتوين المعوي (HE).
أساس
كل مكون من مكونات وسط استزراع السالمونيلا-الشيغيلة له وظيفة محددة ، ويمنحه الخليط ككل الخصائص التي تميزه.
قوة مغذية
يوفر مستخلص اللحوم والببتون (المهضوم بالكازين والأنسجة الحيوانية) العناصر الغذائية المطلوبة (النيتروجين والكربون والفيتامينات) لتطوير الكائنات الحية الدقيقة القادرة على تحمل بقية المكونات.
التناسق
أجار أجار مسؤول عن توفير الاتساق الصلب للوسط.
انتقائي
هذا الوسط انتقائي للغاية لأنه يحتوي على أملاح الصفراء وسيترات الصوديوم والأخضر الفاتح. لذلك ، فإنه يمنع نمو جميع البكتيريا موجبة الجرام ومعظم العصيات سالبة الجرام ، بما في ذلك بعض القولونيات.
بينما البكتيريا من جنس السالمونيلا وبعض سلالات الشيغيلا تدعم هذه المركبات.
بشكل أساسي ، يعتبر جنس السالمونيلا مقاومًا جدًا للأملاح الصفراوية ، لدرجة أنهم قادرون على العيش في المرارة لدى بعض المرضى الحاملين للبكتيريا الذين يتخلصون باستمرار من البكتيريا في برازهم.
التفاضليه
اللاكتوز هو الكربوهيدرات القابلة للتخمر التي تساعد على التمييز بين سلالات تخمير اللاكتوز وبين السلالات غير المخمرة. تتضح هذه الخاصية من خلال وجود مؤشر الأس الهيدروجيني ، والذي يكون في هذا الوسط أحمر الفينول.
سلالات تخمير اللاكتوز تعطي مستعمرات حمراء ، في حين أن السلالات غير المخمرة تكون عديمة اللون. هذه الخاصية مهمة لأن السالمونيلا والشيجيلا لا تخمر اللاكتوز.
من ناحية أخرى ، تحتوي هذه الوسيلة على ثيوسلفات الصوديوم كمصدر للكبريتيد وسيترات الحديديك كمصدر للحديد. كلا المركبين قادران على تمييز البكتيريا القادرة على إنتاج كبريتيد الهيدروجين. تتفاعل هذه لتشكيل راسب كبريتيد الحديديك الأسود المرئي وغير القابل للذوبان.
تم العثور على هذه الخاصية في بعض سلالات من جنس السالمونيلا. عادة ما تكون مستعمراتهم مسطحة عديمة اللون مع وجود نقطة سوداء في وسطها. بقية السالمونيلا لا تنتج H 2 S وتطوير كما المستعمرات عديم اللون.
من ناحية أخرى ، تكون مستعمرات جنس الشيغيلة مسطحة عديمة اللون دون اسوداد.
تجهيز
هذه الوسيلة سهلة التحضير.
يزن 63 جم من الوسط التجاري المجفف ويذوب في لتر من الماء المقطر. سخني المحلول وحركيه. يمكن أن يغلي الخليط لمدة تصل إلى دقائق.
يجب عدم تعقيم هذه الوسيلة بالبخار المضغوط. بعد إذابته يتم تقديمه مباشرة على أطباق معقمة مفردة أو مزدوجة.
عندما تتصلب ، يتم ترتيبها بطريقة مقلوبة على الصفائح الدموية وتخزينها في الثلاجة (2-8 درجة مئوية) حتى الاستخدام.
يجب أن يظل الوسط بعد التحضير عند درجة الحموضة 7.2 ± 0.2 ولون برتقالي أحمر.
من المهم السماح للألواح بالتسخين قبل زرع العينات. يمكن زرع العينة الأصلية مباشرة ، وتفريغ المواد على جزء من الآجار ثم تسطير من هناك.
في حالة استخدام المرق المخصب ، مرر جزءًا من مرق السيلانيت وزرعه باستخدام ملعقة دريغالسكي.
احتضان عند 37 درجة مئوية لمدة 24 ساعة في الهوائية.
ضع في اعتبارك أن عدد الجرامات التي يجب وزنها ودرجة الحموضة النهائية للوسيط يمكن أن تختلف من منزل تجاري إلى آخر. تجلب القاعدة الوسطى دائمًا مؤشرات تحضيرها.
استعمال
كثيرا ما تستخدم في تحليل زراعة البراز وفي الدراسة الميكروبيولوجية لمياه الصرف الصحي ومياه الشرب وعينات الطعام.
يتم تحضير أطباق مزدوجة بشكل متكرر ، حيث يتم وضع أجار Salmonella-Shigella على جانب واحد وعلى أجار XLD الآخر.
محددات
- بعض سلالات الشيغيلا لا تنمو في هذا الوسط. لذلك ، لا ينصح بالعزل الأولي لهذا الجنس.
- ليست كل مستعمرة شفافة ذات مركز أسود تدل على السالمونيلا. يجب إجراء الاختبارات البيوكيميائية لتحديد الهوية بشكل صحيح ، لأن مستعمرات بعض سلالات المتقلبة لا يمكن تمييزها عن مستعمرات السالمونيلا.
- يجب أن يعتني الوسيط المجفف بالتعرض للبيئة ، لأنه شديد الرطوبة. لذلك ، يجب حفظها في بيئة جافة ومغلقة جيدًا. مفتوح لفترات قصيرة جدا.
- بمرور الوقت ، قد تترسب الأملاح الصفراوية في الوسط ، وتشكل صورة تشبه الحصيرة داخل الأجار ، لكن هذا لا يؤثر على النتائج.
- يمكن لبعض سلالات الشيغيلا تخمير اللاكتوز ببطء.
سؤال وجواب
لإثبات أن الوسيط يعمل بشكل صحيح ، يُنصح بزراعة سلالات تحكم معروفة أو معتمدة ومراقبة ما إذا كان النمو يلبي الخصائص المتوقعة.
لهذا الغرض ، يمكن استخدام سلالات E. coli أو Enterobacter sp أو Klebsiella pneumoniae أو Shigella flexneri أو Salmonella typhimurium أو Enterococcus faecalis.
النتائج المتوقعة هي:
Enterobacter and Klebsiella ------ مستعمرات كبيرة وغشاء مخاطي أحمر أو وردي.
Shigella flexneri ---------- مستعمرات مسطحة شفافة أو عديمة اللون.
Salmonella typhimurium ------ مستعمرات عديمة اللون مع مراكز سوداء.
Enterococcus faecalis -------- تثبيط كلي.
المراجع
- مختبرات ديفكو فرانسيسكو سوريا ملغيزو. السالمونيلا-الشيغيلا أجار. 2009 متاح في: f-soria.es
- مختبر BD. BD Salmonella-Shigella Agar. 2013 متاح في: bd.com
- مختبرات بريتانيا. السالمونيلا-شيغيلا أغار. 2015 متاح على: britanialab.com
- تشخيصات Valtek. Salmonella-Shigella Agar (SS Agar). 2010. متاح على: andinamedica.com
- Forbes B، Sahm D، Weissfeld A. (2009). بيلي وسكوت التشخيص الميكروبيولوجي. 12 إد. التحرير Panamericana SA Argentina.
- Koneman E ، Allen S ، Janda W ، Schreckenberger P ، Winn W. (2004). التشخيص الميكروبيولوجي. 5th إد. التحرير Panamericana SA Argentina.