و البزموت سلفيت أجار هو انتقائية المتوسطة الصلبة والثقافة التفاضلية، وضعت خصيصا لعزل سلالات السالمونيلا الملهبة للالمصلي التيفية، من بين أنواع أخرى من السالمونيلا. يُعرف الوسيط باسم BSA agar لاختصاره باللغة الإنجليزية Bismuth Sulfite Agar.
تم إنشاء الصيغة الأصلية لأجار البزموت الكبريتيت في عام 1927 من قبل ويلسون وبلير (الجلوكوز البزموت كبريتات الحديد المتوسطة) ؛ كان يحتوي على كبريتات الصوديوم والجلوكوز ومحلول البزموت وسيترات الأمونيوم وكبريتات الحديدوز وأجار أجار.
نمو لمدة 48 ساعة من حضانة السالمونيلا sp على أجار البزموت كبريتات. المصدر: Pixnio.com المؤلف: Dr. WR Erving، USCDCP
يوجد اليوم تعديل للوسيط الأصلي ، يتكون من مستخلص اللحم ، بيبتون الكازين واللحوم ، مؤشر كبريتيت البزموت ، الجلوكوز ، فوسفات ثنائي الصوديوم ، كبريتات الحديدوز ، الأخضر الزاهي وأجار أجار.
هناك العديد من الوسائل لعزل أنواع السالمونيلا ، ولكن عندما يتعلق الأمر باستعادة النمط المصلي من التيفي ، فإن أجار البزموت الكبريتيت له ميزة ملحوظة عليها ، لأنه في معظم الحالات يتم الحصول على نسبة منخفضة جدًا من هذا الكائن الحي أو لا يتم استرداده..
ومع ذلك ، من الضروري استخدام أكثر من نوع واحد من الوسط عند محاولة عزل مسببات الأمراض المعوية ، لأن أجار البزموت كبريتيت أقل فعالية بالنسبة للأنواع الأخرى من السالمونيلا ولجنس الشيغيلا ، والتي يتم تثبيطها أو تطورها بشكل سيء للغاية. في هذا الاجار.
وتجدر الإشارة إلى أنه من بين جميع أنواع السالمونيلا ، يعد النمط المصلي التيفي أحد أهم مسببات الأمراض المعوية في البشر ، وهذا هو المستودع الوحيد له. يسبب هذا المصلي حمى التيفود والتهاب المعدة والأمعاء وتجرثم الدم وتسمم الدم.
لهذا السبب ، من المناسب تضمين هذا الأجار عند تحليل عينات المياه أو البراز أو الطعام حيث يشتبه في وجوده.
أساس
مثل معظم وسائط الاستزراع ، يحتوي Bismuth Sulfite Agar على عناصر مغذية لتعزيز نمو البكتيريا ، مثل البيبتون ومستخلص اللحوم. وبالمثل ، يعمل الجلوكوز كمصدر للطاقة والكربون.
ومع ذلك ، لن تنمو جميع البكتيريا على هذا الوسط ، لأن البزموت كبريتات أجار هو وسيط انتقائي. يحتوي على مركبات تمنع نمو الكائنات الحية الدقيقة إيجابية الجرام وبعض البكتيريا سالبة الجرام. هذه المركبات هي: مؤشر البزموت والكبريتيت والأخضر الفاتح.
من جانبه ، يحافظ فوسفات ثنائي الصوديوم على الأسمولية ودرجة الحموضة في الوسط.
بالإضافة إلى ذلك ، يعتبر أجار كبريت البزموت وسيطًا تفاضليًا بفضل وجود كبريتات الحديدوز ، مما يدل على تكوين H 2 S. يتفاعل H 2 S الذي تشكله البكتيريا مع كبريتات الحديدوز ويشكل ترسبًا أسود غير قابل للذوبان مرئيًا بوضوح.
أخيرًا ، يوفر أجار أجار الاتساق القوي للوسط.
تجهيز
تزن 52.3 جم من الوسط المجفف وتذوب في لتر واحد من الماء. سخني المزيج ليغلي لمدة دقيقة مع التحريك المتكرر حتى يذوب تمامًا. لا تسخن كثيرا. هذه الوسيلة غير قابلة للتعقيم ، لأن الحرارة الشديدة تلحق الضرر بوسط المزرعة.
اتركه ليبرد حتى 45 درجة مئوية ورجه قبل التقديم في أطباق بتري المعقمة. يوصى بعمل لوحات بسماكة جيدة. للقيام بذلك ، يجب سكب 25 مل في كل طبق. دعها تصلب. نظرًا لأنه وسيلة غير معقمة ، فمن الطبيعي اقتراح استخدامها الفوري.
ومع ذلك ، أظهرت دراسة أجراها داوست في عام 1977 أن هناك تعافيًا أفضل من السالمونيلا تيفيموريوم والسالمونيلا إنتريتيديس لأن أجار البزموت كبريتات متوسط العمر ، لا يؤثر على أداء المصليين Typhi و Paratyphi B.
يوصي داوست باستخدام الأطباق في اليوم الرابع من التبريد ، على الرغم من أنه يلاحظ أنه مع تقدم الأعمار المتوسطة ، تقل الانتقائية ، وتتطور سلالات المتقلبة الشائعة بسهولة أكبر.
لهذا السبب ، بالنسبة للعينات شديدة التلوث ، مثل البراز ، يفضل استخدام وسط طازج. وإلا استخدم في اليوم الرابع من تحضيره. يوصي مؤلفون آخرون باستخدام اللوحات في اليوم التالي لتحضيرها ، وتخزينها في الثلاجة.
يجب تقسية الألواح المبردة قبل الاستخدام. يجب أن يكون الأس الهيدروجيني للوسط 7.5 ± 0.2. الوسط الخام هو البيج والوسط المحضر رمادي مخضر براق.
التطبيقات
من بين العينات التي يمكن زراعتها في هذا الوسط عينات من البراز ومياه الشرب أو مياه الصرف الصحي والطعام.
لتحسين العزلات ، يوصى بإجراء معالجة ما قبل التخصيب باستخدام مرق اللاكتوز وبعد التخصيب بمرق رباعي أو مرق سيلينيت السيستين ، قبل البذر على أجار كبريتات البزموت.
يتم تحضين الألواح عند 35 درجة مئوية ± 0.2 لمدة 24 إلى 48 ساعة ، في التمارين الهوائية.
خصائص المستعمرات على أجار كبريتيت البزموت
عادة ما تُرى مستعمرات السالمونيلا التيفية على هذا الأجار في غضون 24 ساعة بمركز أسود وتحيط بها هالة خضراء زاهية. حيث أنه في غضون 48 ساعة يتحول لونها إلى اللون الأسود تمامًا بسبب تكوين كبريتيد الهيدروجين.
- يمنع هذا الوسط معظم أنواع جنس الشيغيلة.
- يمكن أن تعطي S. Typhi و S. arizonae مستعمرات متشابهة جدًا.
- تنتج البكتيريا القولونية التي تنتج H 2 S مثل Proteus و Citrobacter مستعمرات مماثلة لتلك الموجودة في السالمونيلا ، لذلك من الضروري إجراء اختبارات تحديد الكيمياء الحيوية.
- يجب إجراء تخطيط جيد للحصول على مستعمرات معزولة ؛ إنها الطريقة الوحيدة لمراقبة الخصائص النموذجية لمستعمرات جنس السالمونيلا.
سؤال وجواب
للتحكم في العقم ، يتم تحضين الصفيحة غير الملقحة عند 37 درجة مئوية ، ومن المتوقع ألا يكون هناك نمو أو تغير في اللون.
لمراقبة الجودة ، السلالات المعروفة مثل:
Escherichia coli ATCC 25922، Salmonella enteritidis ATCC 13076، Salmonella Typhi ATCC 19430، Shigella flexneri ATCC 12022، Enterococcus faecalis ATCC 29212.
من المتوقع أن يتم تثبيط الإشريكية القولونية والشيغيلة فلكسنري جزئيًا عن طريق تطوير مستعمرات بنية مخضرة وبنية على التوالي. في حين يجب أن يكون لكل من السلمونيلا تطورًا ممتازًا مع المستعمرات السوداء ذات البريق المعدني ، وفي النهاية يجب منع Enterococcus faecalis تمامًا.
المراجع
- ويلسون ، دبليو ، و إم ماكف. بلير. استخدام وسط الحديد الكبريتيت الجلوكوز البزموت لعزل B. التيفوسوس وبروتيوس. مجلة النظافة ، 1927 ؛ 26 (4) ، 374-391. تم الاسترجاع من.jstor.org
- داوست جي. تأثير ظروف التخزين لأداء آجار كبريتيت البزموت. ياء كلين ميكروبيول. 1977 ؛ 5 (2): 122-124. متاح في: ncbi.nlm.nih.gov
- مختبرات IVD. أجار البزموت الكبريتيت حسب ويلسون بلير. 2009 متاح في: BismuthSulfitagar_span_Jan_2009٪ 20 (2).pdf
- مختبرات Himedia. البزموت كبريتات آجار. 2017 متاح على: himedialabs.com
- Forbes B، Sahm D، Weissfeld A. (2009). بيلي وسكوت التشخيص الميكروبيولوجي. 12 إد. التحرير Panamericana SA Argentina.
- Morales R و de la Cruz D و Leyva G و Ybarra M. الجودة البكتريولوجية لحليب الماعز الخام المنتج في Miravalles ، بويبلا. Rev Mex de Ing Quím 2012 ؛ 11 (1): 45-54