ثاير مارتن أجار: الأساس والتحضير والاستخدامات - مادة الاحياء - 2026

و أجار ثاير مارتن هو وسيلة انتقائية ذات قيمة غذائية عالية ومتينة لعزل النيسرية السحائية والنيسرية البنية. كلاهما يعرف باسم Neisserias المسببة للأمراض أو المهم سريريا.

من أهم الخصائص المميزة لـ Thayer Martin Agar محتواه العالي من المكملات الغذائية. هذه الخاصية ضرورية ، لأن Neisserias تتطلب كائنات دقيقة للغاية من وجهة النظر التغذوية ، وبالتالي لا تنمو في الوسائط الشائعة.

ثاير مارتن / أغار ثاير مارتن وسط أعمال. مصدر الصورة 1: مأخوذة من قبل المؤلف ماجستير. Marielsa Gil ، الصورة 2. Pixinio.com جرثومي مستعمر ، معدل ، ثاير ، مارتن ، أجار.

من ناحية أخرى ، نظرًا لأن هذه الكائنات الحية الدقيقة توجد عادة في مناطق غير معقمة ، فإن إضافة المثبطات ضرورية لمنع نمو النباتات المصاحبة ، دون التأثير على تطور جنس النيسرية.

يتكون هذا الأجار من أجار القاعدة GC والهيموجلوبين والمكملات الغذائية الإضافية ومجموعة من المواد المثبطة (المضادات الحيوية ومضادات الفطريات). تبيع البيوت التجارية كل من المكملات على حدة.

ستعتمد العينة المراد زرعها في هذا الوسط على الكائن الدقيق المطلوب. بالنسبة إلى النيسرية البنية ، تكون العينات المثالية هي الإفرازات المهبلية والإحليل. في حين أن العينات الأكثر استخدامًا للنيسرية السحائية هي إفرازات السائل الدماغي النخاعي وإفرازات البلعوم والأنف البلعومي.

أساس

Neisserias هي كائنات دقيقة مصنفة على أنها مزعجة وبالتالي يصعب عزلها. لذلك ، يعد Thayer Martín وسيطًا معقدًا وكل مكون من مكوناته يؤدي وظيفة موضحة أدناه:

أجار قاعدة GC

يحتوي أجار GC على بروتين الببتون ونشا الذرة وكلوريد الصوديوم وفوسفات ثنائي البوتاسيوم وفوسفات أحادي البوتاسيوم وأجار أجار. توفر مكوناته العناصر الغذائية الأساسية للتطور الميكروبي ، وتحييد الأحماض الدهنية السامة ، وتساعد في الحفاظ على التوازن الأسموزي ، وتحديد الرقم الهيدروجيني ، وتوفير الاتساق القوي للوسط.

الهيموجلوبين

يوفر الهيموغلوبين العاملين الخامس والعاشر (نيكوتيناميد الأدينين ثنائي النوكليوتيد NAD والهيمين على التوالي). لهذا السبب ، تنمو أنواع المستدمية أيضًا في هذا الوسط. يمكن الحصول على الهيموجلوبين تجارياً في صورة مجففة أو يمكن إضافة دم بقري منزوع الليف إلى الوسط.

مكمل الإثراء

من ناحية أخرى ، يجب أيضًا إضافة مكمل التخصيب إلى وسط ثاير مارتن ، حيث إن العناصر الغذائية الموجودة في أجار القاعدة ليست كافية لمتطلبات جنس النيسرية.

يُطلق على مكمل الإثراء الأكثر استخدامًا إيزوفيتالكس. يحتوي على الجلوتامين ، الأدينين ، NAD ، كوكاربوكسيلاز ، الجوانين ، نترات الحديديك ، حمض أمينو بنزويك ، فيتامين ب 12 ، الثيامين ، والجلوكوز. كل هذه المركبات ضرورية للتطوير السليم للنيسرية الممرضة.

مثبطات

نظرًا لأنه وسيلة ذات قيمة غذائية عالية ، يجب استخدام مثبطات تمنع نمو الكائنات الحية الدقيقة من النباتات المعتادة في المنطقة ، وبالتالي تفضل عزل جنس النيسرية.

يتكون مركب المثبط من فانكومايسين وكوليستين ونيستاتين. فانكومايسين يمنع نمو البكتيريا موجبة الجرام ، والكوليستين يمنع نمو البكتيريا سالبة الجرام مثل Pseudomonas وبعض النيسرية الرمية ، والنيستاتين يعمل على الخمائر مثل المبيضات البيض.

ومع ذلك ، تم تعديل ثاير مارتن أجار لاحقًا ؛ تتألف التغييرات من إضافة تريميثوبريم ، وزيادة كمية الأجار وإضافة الجلوكوز الإضافي. أدت هذه التغييرات إلى تحسن كبير في انتعاش أنواع النيسرية البنية.

وتجدر الإشارة إلى أن تريميثوبريم يثبط نمو جنس المتقلبة وما يترتب على ذلك من تكوين أسراب. وبهذا المعنى ، فإن المضادات الحيوية هي التي توفر الصفة الانتقائية لوسط ثاير مارتن.

تجهيز

الأصل ثاير مارتن أجار

-GC أجار

يزن 8.2 جرام من وسط GC المجفف ويعلق في 100 مل. يُمزج ويُغلى لمدة دقيقة واحدة مع التحريك المتكرر ليذوب تمامًا. تعقيم الخليط في الأوتوكلاف عند 121 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة.

- 2٪ هيموجلوبين

علق 2 جم من الهيموجلوبين المجفف في 2 أو 3 مل من الماء المقطر الساخن حتى يتكون خليط موحد. أضف المزيد من الماء شيئًا فشيئًا لإكمال حجم 100 مل. يجب أن يكون التعليق متجانسًا قبل التعقيم.

تعقيمها في الأوتوكلاف لمدة 15 دقيقة.

- مكمل التخصيب

أعد تكوين القارورة التجارية بالمخفف المقدم من نفس الشركة التجارية. اخلط جيدا. سيتم تحديد كمية المادة المخففة المستخدمة في تعليمات المجموعة.

- مكمل تثبيط VCN (فانكومايسين ، كوليستين ، نيستاتين)

أعد تكوين القارورة بالمخفف المقدم من الشركة التجارية. اخلط جيدا. سيتم تحديد كمية المادة المخففة المستخدمة في تعليمات المجموعة.

-أعدت

لكل 100 مل من GC agar اتبع ما يلي:

عندما يخرج أجار GC من الأوتوكلاف ، اتركه يبرد إلى درجة حرارة تقارب 50 درجة مئوية وأضف 2 مل من محلول الهيموجلوبين المحضر ، 2 مل من مكمل التخصيب (أيزوبيتالكس أو بريتالكس) ، و 2 مل من مكمل التثبيط. تخلط وتقدم في أطباق بتري معقمة.

دعها تتصلب وتخزن في الثلاجة لحين الاستخدام.

لون الوسيط المحضر أحمر الكرز. الرقم الهيدروجيني النهائي للوسط هو 7.2 ± 0.2

تعديل ثاير مارتن أجار

يزن 8.2 جرام من وسط GC المجفف ويعلق في 100 مل. أضف 1 جم من أجار أجار وأضف 0.3 جم من الجلوكوز. يُمزج ويُغلى لمدة دقيقة واحدة مع التحريك المتكرر ليذوب تمامًا. تعقيم الخليط في الأوتوكلاف عند 121 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة.

تحضير الهيموجلوبين ومكمل التخصيب كما هو موضح سابقًا.

مكمل القمع المستخدم هو VCNT (فانكومايسين ، كوليستين ، نيستاتين ، تريميثوبريم).

-أعدت

تابع كما هو موصوف لأجار ثاير مارتن الأصلي.

استعمال

يجب السماح لـ Thayer Martin Agar بالتدفئة قبل تلطيخ العينات. العينات المستخدمة بشكل شائع هي مسحات البلعوم ومسحات الأنف والإفرازات المهبلية و / أو مجرى البول و / أو المستقيم و CSF.

استخدم عينات جديدة واصنع لقاحات قوية على الآجار. يتم بذر العينات مباشرة عن طريق تفريغ المواد ثم بعد ذلك يتم وضع خطوط على السطح.

يتم تحضين الألواح عند 35-37 درجة مئوية لمدة 24 إلى 48 ساعة في إناء دقيق (5٪ CO ₂). في نهاية فترة الحضانة ، يتم فحص الصفائح بحثًا عن مستعمرات صغيرة ورمادية وأحيانًا تشبه الغشاء المخاطي.

إجراء اختبارات الجرام والكيمياء الحيوية التأكيدية على الطوائف المشبوهة.

سؤال وجواب

يمكن استخدام السلالات الميكروبية التالية لمراقبة جودة ثاير مارتن أجار.

Neisseria gonorrhoeae ATCC 49226 و Neisseria meningitidis ATCC 13090 ؛ من المتوقع حدوث تطور مرض في كلا السلالتين.

يجب أيضًا تضمين السلالات التالية: Staphylococcus epidermidis ATCC 14990 ، Escherichia coli ATCC 25922 ، Proteus mirabilis ATCC 43071 و Candida albicans ATCC 10231. في كل منهم ، من المتوقع تثبيط كلي أو جزئي في هذا الوسط.

محددات

- يجب أن نضع في اعتبارنا أن البكتيريا المقاومة للمثبطات المستخدمة يمكن أن تنمو في الوسط.

- هناك سلالات من النيسرية البنية يمكن أن تكون حساسة لتركيز الفانكومايسين المستخدم. لهذا السبب ، يوصى باستخدام أجار الشوكولاتة المضاف إليه إيزوفيتالكس ، ولكن بدون مثبطات.

- هناك سلالات من الخميرة المقاومة للنيستاتين يمكن أن تنمو في هذا الوسط وتتداخل مع عزل Neisserias المسببة للأمراض وخاصة المكورات البنية.

المراجع

1. مختبرات التشخيص Valtek. ثاير مارتن أجار.2016. متاح على: com
2. مختبرات بريتانيا. ثاير مارتن متوسط ​​معدل. 2010 متاح على: britanialab.com
3. المساهمين في ويكيبيديا. ثاير مارتن أجار. ويكيبيديا، الموسوعة الحرة. 26 أكتوبر 2017 ، الساعة 16:33 بالتوقيت العالمي المنسق. متاح على: wikipedia.org 4. تم الوصول إليه في 28 فبراير 2019.
4. مختبرات بريتانيا. GC أجار. 2010 متاح على: britanialab.com.
5. مختبرات BBL ™ إثراء متوسط ​​للكائنات الدقيقة سريعة التحمل. 1999. متاح في: bd.com
6. Forbes B، Sahm D، Weissfeld A. (2009). بيلي وسكوت التشخيص الميكروبيولوجي. 12 إد. التحرير Panamericana SA Argentina.