أجار أخضر ناصع: الأساس المنطقي والتحضير والاستخدامات - مادة الاحياء - 2026

و أجار الأخضر اللامع هو مستنبت متينة مع درجة عالية من الانتقائية. يتم استخدامه حصريًا لعزل سلالات من جنس السالمونيلا ، ولكن هناك بعض الاستثناءات ، مثل الأنواع التيفية و paratyphi التي لا تنمو على هذا الوسط.

يتكرر البحث عن جنس السالمونيلا في عينات البراز أو الماء أو الطعام. بهذا المعنى ، يمكن أن تكون هذه الوسيلة مفيدة للغاية. تم إنشاء هذا الأجار في عام 1925 من قبل كريستنسن وليستر ويورجنز ، وتم تعديله لاحقًا بواسطة كوفمان.

أجار أخضر مشرق. المستعمرات المخمرة وغير المخمرة على التوالي. المصدر: إم جي ريتشاردسون / معرض العوالم الخفية - 2012geograph.org.uk/photo/2815842 رخصة المشاع الإبداعي.

وهو يتألف من pluripeptones من الهضم الهضمي للأنسجة الحيوانية وهضم البنكرياس للكازين ، كما يحتوي على مستخلص الخميرة ، وكلوريد الصوديوم ، واللاكتوز ، والسكروز ، والفينول الأحمر ، والأخضر الزاهي ، وأجار أجار.

يتميز بكونه بيئة غير مضيافة لمعظم البكتيريا ، ويفضل نمو السالمونيلا ، ولكن بعض القولونيات قادرة على العيش فيها ، وتتطور بشكل ضعيف.

من المهم ملاحظة أن جنس الشيغيلة لا ينمو على هذا الوسط ، ولا السالمونيلا تيفيموريوم أو السالمونيلا بارايفي. لذلك ، إذا كنت ترغب في عزل هذه الكائنات الحية الدقيقة ، فيجب استخدام وسائط أخرى ، مثل XLD أجار ، من بين أمور أخرى.

أساس

أجار أخضر مشرق

كل مكون من المكونات التي يتكون منها الوسيط يؤدي وظيفة محددة تحدد خصائص وخصائص أجار.

تعد بلوريبتونس وخلاصة الخميرة مصدرًا للعناصر الغذائية التي تأخذ منها الكائنات الحية الدقيقة النيتروجين والمعادن اللازمة لتطورها. اللاكتوز والسكروز مصادر طاقة للكائنات الحية الدقيقة القادرة على تخميرها.

اللون الأخضر الفاتح هو المادة المثبطة التي تمنع نمو البكتيريا الموجبة للجرام وعدد كبير من الكائنات الدقيقة سالبة الجرام.

يوفر كلوريد الصوديوم الاستقرار التناضحي للوسط. بينما أحمر الفينول هو مؤشر الأس الهيدروجيني ، فإنه يتحول إلى اللون عند اكتشاف إنتاج الحمض من تخمر الكربوهيدرات.

تنمو مستعمرات اللاكتوز والسكروز غير المخمرة على هذا الوسط بلون أبيض وردي أو شفاف على خلفية حمراء. على سبيل المثال ، بكتيريا من جنس السالمونيلا.

بينما تقوم بكتيريا تخمير اللاكتوز أو السكروز القادرة على النمو على هذا الوسط بتطوير مستعمرات صفراء-خضراء أو صفراء-خضراء على خلفية صفراء مخضرة. على سبيل المثال ، Escherichia coli و Klebsiella pneumoniae.

متغيرات أجار خضراء زاهية (BGA)

هناك أنواع أخرى من أجار الأخضر الزاهي. Novobiocin Brilliant Green Glucose (NBG) Agar و Novobiocin Brilliant Green Glycerol Lactose (NBGL) Agar.

Novobiocin برايت جرين جلوكوز أجار

يحتوي على Trypticase Soy Agar و Ferric Ammonium Citrate و Sodium Thiosulfate Pentahydrate و Phenol Red و Glucose و Bright Green و Novobiocin وماء مقطر.

يتم استخدامه لعزل مستعمرات السالمونيلا من عينات البراز.

في هذه الحالة ، يعتبر اللون الأخضر الفاتح والنوفوبيوسين من المواد المثبطة التي تمنع نمو البكتيريا موجبة الجرام وبعض الكائنات الحية الدقيقة سالبة الجرام.

ثيوسلفات الصوديوم هو مصدر الكبريتيد وسيترات الحديديك هي مصدر الحديد ، وكلاهما ضروري للكشف عن إنتاج كبريتيد الهيدروجين من خلال تكوين راسب كبريتيد الحديديك الأسود.

الجلوكوز هو الكربوهيدرات القابلة للتخمير والفينول الأحمر هو مؤشر الأس الهيدروجيني.

على هذا الوسط ، تتطور مستعمرات السالمونيلا بشكل كبير مع مركز أسود محاط بهالة حمراء متبوعة بمنطقة واضحة مرئية. تنتج بعض سلالات Citrobacter freundii مستعمرات مماثلة لتلك الموجودة في السالمونيلا.

Novobiocin Brilliant Green Glycerol Lactose Agar (NBGL)

يحتوي هذا الوسط على أجار الصويا تريبتيسيز ، وسيترات الأمونيوم الحديديك ، وثيوسلفات الصوديوم ، واللاكتوز ، والجليسرول ، والأخضر الفاتح ، والنوفوبيوسين ، والماء المقطر.

الفرق بين هذا الوسيط والسابق هو أنه يتم استبدال الجلوكوز باللاكتوز والجلسرين ولا يتم استخدام الفينول الأحمر.

يستخدم الوسط أيضًا لعزل أنواع السالمونيلا ، حيث تتطور المستعمرات إلى اللون الأسود ، بسبب إنتاج كبريتيد الهيدروجين.

فقط المستعمرات التي لا تنتج حامض من الجلسرين أو اللاكتوز تحقيق ما يكفي من H ₂ S الإنتاج ، وذلك لأن انخفاض درجة الحموضة يتداخل مع H ₂ S تشكيل هذا النتائج في المستعمرات عديم اللون لمعظم أنواع بروتيوس وسيتروباكتر.

تجهيز

- تزن 58 جرام من الوسط المجفف المتحصل عليه تجارياً. أضفه إلى لتر من الماء المقطر. اخلطي ، اتركيها بضع دقائق ، وضعي المزيج على مصدر حرارة حتى يذوب تمامًا.

- الأوتوكلاف عند 121 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة ، لا تتجاوز مدة التعقيم.

- دعها ترتاح وتقدم وهي ساخنة في أطباق بتري المعقمة. يجب أن يكون الرقم الهيدروجيني النهائي 6.9 ± 0.2.

-تركها تتصلب وتخزن في الثلاجة حتى الاستخدام قبل البذر يجب أن تأخذ اللوحات درجة حرارة الغرفة.

- وسط المسحوق أخضر اللون ويأخذ لون برتقالي-بني أو أخضر مائل إلى الحمرة ، حسب درجة الحموضة والشركة التجارية. يشير اللون البني جدًا إلى ارتفاع درجة حرارة الأجار.

-بمجرد أن يصلب الأجار ، لا ينصح بإعادة الصياغة لأن الوسط يتدهور.

الاستخدامات / التطبيقات

تستخدم هذه الوسيلة للبحث عن سلالات من جنس السالمونيلا من عينات البراز وأطعمة الألبان وغيرها.

نظرًا لأنها بيئة غير مضيافة إلى حد ما ، فمن المستحسن زرع لقاح وفير إذا تم استخدام العينة المباشرة. خلاف ذلك ، يجب إجراء تخصيب مسبق للعينات وإثرائها قبل البذر في هذه الوسيلة.

نظرًا لأن بعض سلالات السالمونيلا يتم تثبيطها أو نموها بصعوبة ، فمن المستحسن مرافقة هذه الوسيلة مع أجار انتقائي آخر للسالمونيلا.

يجب أن تخضع كل مستعمرة بخاصية السالمونيلا النموذجية لاختبارات كيميائية حيوية للتعرف عليها بشكل نهائي.

سؤال وجواب

لاختبار الأداء الجيد لوسط أجار الأخضر اللامع ، يمكن استخدام سلالات ATCC لمراقبة تطورها عليه.

السلالات الأكثر شيوعًا المستخدمة لمراقبة الجودة هي: Salmonella enteritidis ATCC 13076 ، Salmonella typhimurium ATCC 14028 ، Proteus mirabilis ATCC 43071 ، Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 ، Escherichia coli ATCC 25922 ، Shigella flexneri ATCC 12022 ، Staphylococcus aureus.

يجب أن تعطي الثلاثة الأولى مستعمرات بيضاء زهرية أو شفافة على خلفية حمراء. السالمونيلا مع نمو جيد والبروتيوس مع نمو قليل أو منتظم.

بالنسبة لـ Klebsiella و Escherichia ، من المتوقع حدوث مستعمرات صفراء وخضراء ذات خلفية صفراء وفي حالة Shigella و Staphylococcus ، يجب تثبيطها.

يجب تخزين المادة المجففة في درجة حرارة الغرفة ، في مكان جاف ، لأن الوسط شديد الرطوبة.

المراجع

1. لابوراتوريو ديفكو فرانسيسكو سوريا ميلجيزو سا أجار خضراء رائعة. 2009
2. مختبر بريتانيا. برايت جرين أجار. 2015.
3. مختبر BD. BD بريليانت جرين أجار. 2013.
4. Koneman E ، Allen S ، Janda W ، Schreckenberger P ، Winn W. (2004). التشخيص الميكروبيولوجي. (الطبعة الخامسة). الأرجنتين ، الافتتاحية Panamericana SA
5. Forbes B، Sahm D، Weissfeld A. 2009. Bailey & Scott Microbiological Diagnosis. 12 إد. الأرجنتين. التحرير Panamericana SA