فوغل جونسون أجار: الأساس المنطقي والتحضير والاستخدامات - مادة الاحياء - 2025

يعتبر Agar Vogel-Johnson مستنبتًا انتقائيًا وتفاضليًا صلبًا ، وقد تم تصميمه خصيصًا لعزل Staphylococcus aureus. تم إنشاء هذه الوسيلة بواسطة Vogel and Johnson في عام 1960 من تعديل أجار التيلوريت الجليسين الذي تمت صياغته في عام 1955 بواسطة Zebovitz و Evans و Niven.

يتكون التعديل في زيادة تركيز المانيتول الموجود في الوسط وفي دمج مؤشر الأس الهيدروجيني. تتكون الصيغة الحالية من تريبتين ، مستخلص الخميرة ، مانيتول ، فوسفات ثنائي البوتاسيوم ، كلوريد الليثيوم ، جلايسين ، أحمر الفينول ، أجار ، محلول تيلوريت بوتاسيوم 1٪ ، وماء.

المصدر: Pixinio.com/Laboratorio de la Clínica ProcreaTec. فليكر.

وتجدر الإشارة إلى أن هناك وسائط أخرى ، مثل Vogel-Johnson agar ، انتقائية لعزل S. aureus ، مثل أجار المانيتول المالح وأجار بيرد باركر. بهذا المعنى ، يمكن القول أن أساس Vogel-Johnson أجار هو مزيج بين أجار مانيتول المالح وأجار بيرد باركر.

في الأولى ، تتميز مستعمرات العقدية الذهبية بتخمير المانيتول وتحويل مؤشر الرقم الهيدروجيني إلى اللون الأصفر. من ناحية أخرى ، في الثانية ، تتميز S. aureus باختزال التيلوريت إلى التيلوريوم وتشكيل مستعمرات رمادية إلى سوداء. تمت ملاحظة كلتا الخاصيتين في أجار فوغل جونسون.

هذه الوسيلة ، مثل نظيراتها ، مفيدة للكشف عن المكورات العنقودية الذهبية في عينات الطعام ، والضوابط الصحية للمنتجات الصناعية وفي العينات السريرية.

أساس

توريد المغذيات

تحتوي وسط Vogel-Johnson على التريبتين وخلاصة الخميرة. توفر كلتا المادتين أحماض أمينية طويلة السلسلة تعمل كمصادر للكربون والنيتروجين الضروريين لنمو البكتيريا. ستأخذ البكتيريا القادرة على النمو في هذا الوسط المغذيات من هذه المواد.

القوة الانتقائية

أجار فوغل جونسون قادر على تثبيط نمو البكتيريا سالبة الجرام وحتى بعض البكتيريا موجبة الجرام ، مما يساعد على تطوير المكورات العنقودية الموجبة للتخثر. المواد المثبطة هي تيلوريت البوتاسيوم وكلوريد الليثيوم والجليسين.

القوة التفاضلية

المواد التي تجعل هذا الوسط التفاضلي هي مانيتول وتيلوريت البوتاسيوم. المانيتول عبارة عن كربوهيدرات ، وعندما يتم تخميره يتم إنتاج الأحماض التي تجعل المتوسط ​​يتحول من الأحمر إلى الأصفر ، والذي يحدث بفضل وجود مؤشر الفينول الأحمر لدرجة الحموضة.

في حين أن التيلوريت عديم اللون عند اختزاله إلى تيلوريوم معدني مجاني ، يأخذ اللون الرمادي الداكن إلى الأسود.

المكورات العنقودية الذهبية تخمر المانيتول وتقلل من التيلوريت إلى التيلوريوم. لهذا السبب ، تكون المستعمرات النموذجية للعقديات الذهبية في هذا الوسط رمادية أو سوداء محاطة بوسط أصفر.

البكتيريا التي تنمو في هذا الوسط ولا تقلل من التيلوريت أو تخمر المانيتول ستشكل مستعمرات شفافة محاطة بوسط أحمر اللون ، أكثر كثافة من اللون الأصلي ، بسبب قلونة الوسط عن طريق استخدام الببتون.

من ناحية أخرى ، فإن البكتيريا التي تقلل التيلوريت ولكنها لا تخمر المانيتول ستنمو كمستعمرات رمادية أو سوداء محاطة بوسط أحمر عميق.

إذا تم تحضير الوسط بدون إضافة تيلوريت البوتاسيوم ، فإن مستعمرات S. aureus ستتطور كمستعمرات صفراء ، محاطة بوسط أصفر ، كما هو الحال في أجار المانيتول المالح.

عامل التوازن والتصلب الاسموزي

يحافظ فوسفات ثنائي البوتاسيوم على التوازن التناضحي للوسط ويضبط درجة الحموضة على الحياد 7.2. بينما يعطي الأجار الاتساق القوي لوسط الثقافة.

تجهيز

محلول تيلوريت البوتاسيوم 1٪ وزن / حجم

لا يتم تضمين هذا المحلول في الوسط المجفف ، حيث لا يمكن تعقيمه في الأوتوكلاف. لهذا السبب يتم تحضيرها بشكل منفصل وإضافتها إلى الوسط المعقم بالفعل.

تبيع بعض البيوت التجارية محلول تيلوريت البوتاسيوم الجاهز للاستخدام بنسبة 1٪. إذا كنت ترغب في التحضير في المختبر ، فتابع على النحو التالي:

يزن 1.0 جرام من تيلوريت البوتاسيوم ويقيس 100 مل من الماء المقطر. قم بإذابة تيلوريت البوتاسيوم في جزء من الماء ثم أكمل كمية الماء حتى تصل إلى 100 مل. عقم المحلول بطريقة الترشيح.

قاعدة فوغل جونسون أجار متوسطة

يزن 60 جرام من الوسط المجفف ويذوب في لتر واحد من الماء المقطر. يسخن الخليط حتى يغلي للمساعدة في الذوبان الكامل. أثناء عملية الذوبان يتم تقليب الوسيط بشكل متكرر.

تعقيم في الأوتوكلاف عند ضغط 15 رطلاً و 121 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة. أخرجه من الأوتوكلاف واتركه يرتاح حتى تصل درجة حرارة الوسط إلى حوالي 45 إلى 50 درجة مئوية. أضف 20 مل من محلول تيلوريت البوتاسيوم 1٪ المحضر مسبقًا.

تخلط وتصب في أطباق بتري المعقمة. دعها تتصلب وتطلب مقلوبة على حاملات الأطباق لتخزنها لاحقًا في الثلاجة حتى الاستخدام.

يجب أن يكون الرقم الهيدروجيني النهائي للوسط المحضر 7.2 ± 0.2.

قبل زرع عينة ، انتظر حتى تصل اللوحة إلى درجة حرارة الغرفة.

لون الوسيط المحضر أحمر.

استعمال

على الرغم من أنه يمكن استخدامه لعزل S. aureus في أي نوع من العينات ، إلا أنه يستخدم بشكل أساسي في التحليل الميكروبيولوجي للمنتجات الصيدلانية ومستحضرات التجميل والأغذية.

من المستحسن أن تكون اللقاح كثيفة. يمكن أن يتم البذر عن طريق التهديف بمقبض بلاتيني أو السطح باستخدام ملعقة Drigalski.

يتم تحضين الألواح عند 35-37 درجة مئوية لمدة 24 إلى 48 ساعة.

سؤال وجواب

يمكن استخدام سلالات التحكم التالية لإجراء مراقبة الجودة على وسيط Vogel-Johnson:

Staphylococcus aureus ATCC 25923 ، Staphylococcus aureus ATCC 6538 ، Staphylococcus epidermidis ATCC 12228 ، Escherichia coli ATCC 25922 أو Proteus mirabilis ATCC 43071.

والنتيجة المتوقعة هي كما يلي: لنمو سلالات المكورات العنقودية الذهبية مرضية مع مستعمرات سوداء محاطة بمتوسط ​​أصفر. للنمو المنتظم في S. البشروية مع مستعمرات شفافة أو سوداء تحيط بها وسط أحمر.

وبالمثل ، من المتوقع تثبيط كلي للإشريكية القولونية ، والتثبيط الجزئي أو الكلي للمتقلبة الرائعة. إذا نمت فإنها ستفعل ذلك باعتدال وستكون المستعمرات سوداء محاطة باللون الأحمر.

المراجع

1. مختبرات BD. VJ (فوجل وجونسون أجار). 2006 متاح في: bd.com
2. مختبرات بريتانيا. فوجل- جونسون أجار. 2015 متاح على: britanialab.com
3. مختبرات بريتانيا. تيلوريت البوتاسيوم. 2015 متاح على: britania.com
4. معمل Himedia. فوجل- جونسون أجار متوسط. 2018 متوفر على: himedialabs.com/TD/MU023.pdf
5. فوجل- قاعدة جونسون آجار. دليل ميرك لعلم الأحياء الدقيقة. الطبعة الثانية عشر ، ص 502-503. متاح في: المستخدمون / الفريق / التنزيلات
6. المساهمون في Wikipédia ، "Ágar Vogel Johnson" ، ويكيبيديا موسوعة مجانية ، متاحة على: wikipedia.org.
7. المعيار الفنزويلي كوفينين 1292-89. (1989). أغذية. عزل وتعداد Staphylococcus aureus. متاح على: sencamer.gob.ve