XLD AGAR: الأساس المنطقي والتحضير والاستخدامات - مادة الاحياء - 2025

و أجار XLD أو إكسيلوسي يسين desoxycholate أجار المتوسطة هو انتقائية والثقافة الصلبة التفاضلية للعزل enteropathogens. صمم تايلور صيغة XL agar (Xylose، Lysine) من أجل تحسين عزل جنس الشيغيلا.

لاحظ أن هذا الجنس تم تثبيطه في معظم الوسائط المخصصة لعزل مسببات الأمراض المعوية. بعد ذلك ، تمت إضافة ديوكسيكولات الصوديوم ، ثيوسلفات الصوديوم وسيترات الأمونيوم الحديديك لزيادة انتقائها. أثبتت هذه الصيغة أنها مفيدة لكل من عزل الشيغيلا والسالمونيلا.

الاختلافات في مستعمرات الشيغيلة ، السالمونيلا و القولونيات على أجار XLD. A. Shigella sp ، B. Salmonella sp ، C. Coliforms. المصادر: A. By: CDC / Amanda Moore، MT؛ تود باركر ، دكتوراه ؛ أودرا مارش ، من باب المجاملة: مكتبة صور الصحة العامة ب. JJ فارمر ، مجاملة: مكتبة صور الصحة العامة

يتكون أجار XLD من مستخلص الخميرة ، ديوكسيكولات الصوديوم ، الزيلوز ، اللايسين ، اللاكتوز ، السكروز ، ثيوسلفات الصوديوم ، سترات الأمونيوم الحديديك ، كلوريد الصوديوم ، الفينول الأحمر والأجار. يستخدم XLD Agar و SS Agar duo في معظم مختبرات علم الجراثيم لدراسة عينات البراز للشيغيلا والسالمونيلا.

تفضل المعامل الأخرى توليفة CHROMagar Salmonella و XLD agar ، من بين الخيارات المتاحة الأخرى. يمكن تحضير هذين الثنائي في أطباق بتري مزدوجة. على جانب واحد يضعون XLD أجار وعلى الجانب الآخر الوسيط المختار الآخر.

أساس

- القوة الغذائية

يحتوي أجار XLD على مستخلص الخميرة ، والذي يعمل كمصدر للمواد الغذائية للكائنات الحية الدقيقة التي تنمو في هذا الآجار. بالإضافة إلى ذلك ، فإن وجود الكربوهيدرات (الزيلوز والسكروز واللاكتوز) يوفر الطاقة للبكتيريا التي يمكن أن تخمرها.

- انتقائية الوسط

كمادة مثبطة ، فإنه يعرض ديوكسيكولات الصوديوم ؛ هذا يمنع نمو البكتيريا موجبة الجرام ، مما يعطي الوسيط صفة انتقائية.

- القوة التفاضلية

مستعمرات الشيغيلا النموذجية

كما ذكرنا سابقًا ، يحتوي أجار XLD على الزيلوز ؛ يتم تخمير هذه الكربوهيدرات بواسطة جميع البكتيريا التي تنمو في هذا الوسط باستثناء جنس الشيغيلا.

هذه إحدى الخصائص التي تضفي عليها طابعها التفاضلي ، حيث تتميز مستعمرات الشيغيلة عن الباقي بتكوين مستعمرات حمراء ، بينما تنتج البكتيريا الأخرى مستعمرات صفراء.

مستعمرات السالمونيلا النموذجية

يقوم جنس السالمونيلا أيضًا بتخمر الزيلوز ، مما يؤدي في البداية إلى تكوين مستعمرات صفراء. ومع ذلك ، بعد استنفاد الكربوهيدرات الزيلوز ، فإنه يهاجم اللايسين بسبب إنزيم اللايسين ديكاربوكسيلاز. يولد نزع الكربوكسيل من اللايسين القلويات التي تحول لون المستعمرة والوسط المحيط إلى اللون الأحمر الأصلي.

يتم تنفيذ هذا السلوك فقط بواسطة السالمونيلا ، حيث أن القولونيات التي تنزع الكربوكسيل ليسين لا يمكن أن تجعل الوسط قلويًا. وذلك لأن القولونيات تقوم أيضًا بتخمر اللاكتوز والسكروز. لذلك ، فإن إنتاج الأحماض مرتفع للغاية ، مما يترك المستعمرة الصفراء في هذه البكتيريا.

وتجدر الإشارة إلى أن جنس السالمونيلا لا يتخمر السكروز أو اللاكتوز.

إنتاج H

XLD أجار كما يتيح الكشف عن H ₂ S- الأنواع المنتجة السالمونيلا. لهذا ، فإنه يعتمد على مصدر الكبريت الذي يمثله ثيوسلفات الصوديوم ومطور التفاعل ، وهو سترات الأمونيوم الحديديك.

يتفاعل الأخير مع H ₂ S (غاز عديم اللون) ويشكل ترسبًا مرئيًا غير قابل للذوبان أسود من كبريتات الحديد. بهذا المعنى ، ستكون خصائص مستعمرات السالمونيلا باللون الأحمر مع مركز أسود.

وتجدر الإشارة إلى أن لH ₂ S رد فعل تشكيل ليحدث ، هناك حاجة إلى درجة الحموضة القلوية. هذا هو السبب المعوية الأخرى التي شكل H ₂ S لا تستطيع أن تفعل ذلك أو يفعل ذلك ضعيفا في هذه الوسيلة، لأن الحموضة العالية التي تنتجها تخمر الكربوهيدرات يمنع الحالية أو يعرقل رد الفعل.

- كلوريد الصوديوم والأجار والفينول الأحمر

أخيرًا ، يحافظ كلوريد الصوديوم على التوازن الأسموزي ؛ أجار هو عامل التصلب ويكشف الفينول الأحمر تغيرات الأس الهيدروجيني ، مما يحول لون المستعمرات والوسط.

تجهيز

يزن 55 جم من وسط XLD المجفف ويذوب في 1 لتر من الماء. سخني الخليط وحركيه حتى يصل إلى درجة الغليان. لا تسخن ، لأن الحرارة تلحق الضرر بالوسط وتخلق ترسبًا يغير شكل المستعمرات النموذجية.

يجب عدم تعقيم هذه الوسيلة بالبخار المضغوط. عند الذوبان ، يجب أن تنتقل إلى حمام مائي عند 50 درجة مئوية. عند التبريد ، يجب تقديمه مباشرة على أطباق بتري المعقمة. يمكن سكبها في أطباق مفردة أو أطباق مزدوجة. تُترك لتصلب وتُخزن في الثلاجة لحين استخدامها.

المزاج قبل الاستخدام. نظرًا لكونه وسيطًا غير معقم ، يوصى بتحضيره قريبًا من تاريخ الاستخدام.

يجب أن يكون الرقم الهيدروجيني النهائي للوسط 7.4 ± 0.2. لون الوسيط المحضر برتقالي-أحمر ، شفاف ، بدون راسب.

إذا كان لديك زيلوز ليسين (XL) أجار أساسي ، فيمكنك إضافة ديوكسيكولات الصوديوم وثيوسلفات الصوديوم وسيترات أمونيوم الحديد. بهذه الطريقة ، يتم الحصول على صيغة أجار XLD.

التطبيقات

يستخدم أجار XLD لاستعادة مسببات الأمراض المعوية ، خاصة من جنس الشيغيلا وثانيًا من جنس السالمونيلا. يفيد في تقييم عينات البراز والماء والغذاء.

أنواع العينات

البراز

يمكن زرع عينات البراز مباشرة على أجار XLD ، مما يؤدي إلى توزيع جيد للمواد للحصول على مستعمرات معزولة.

لتحسين استشفاء السالمونيلا ، يمكن تلطيخ أجار XLD من وسائط تخصيب السالمونيلا.

طعام

في حالة الطعام ، يمكن استخدام مرق التخصيب للسالمونيلا والشيغيلة. بالنسبة للسالمونيلا ، يمكنك استخدام مرق السيستين السيلانيت ، ومرق رباعي الارثيونات الخضراء الزاهية ، من بين أشياء أخرى.

في حالة الشيغيلا ، يمكن إثرائها بمرق الشيغيلا مع 0.5 ميكروغرام / مل من نوفوبيوسين ، المحتضنة عند 42 درجة مئوية 1 درجة مئوية لمدة 16-20 ساعة.

ماء

في تحليل المياه ، يوصى بتقنية الترشيح الغشائي واستخدام أجار XLD ، من بين أمور أخرى.

شروط الزراعة وتحديد الهوية

يتم تحضين وسط البذور بشكل هوائي عند 35 درجة مئوية لمدة 24 إلى 48 ساعة.

تمت ملاحظة المستعمرات النموذجية لكل جنس ، يجب أن تخضع المستعمرات المشبوهة لاختبارات كيميائية حيوية لتحديد هويتها.

سؤال وجواب

لتقييم مراقبة جودة الوسط ، يمكن استخدام السلالات البكتيرية التالية: Salmonella typhimurium ATCC 14028 ، Salmonella enteritidis ATCC 13076 ، Salmonella abony DSM 4224 ، Shigella flexneri ATCC 12022 ، Shigella sonnei ATCC 25931 ، Escherichia coli ATCC 25922 ، ATCC 430 ، الكلبسيلة الرئوية ATCC 33495.

يتميز جنس السالمونيلا بتقديم مستعمرات حمراء ذات مركز أسود أو مستعمرات سوداء بالكامل على هذا الوسط. بينما في جنس الشيغيلة يجب أن تكون المستعمرات حمراء ، أي لون الوسط.

في حالة Escherichia coli ، من المتوقع أن يتم تثبيطها كليًا أو جزئيًا ؛ إذا نمت تكون المستعمرات صفراء. بالنسبة لمتقلبة المتقلبة الرائعة ، من المتوقع أن يكون النمو ضعيفًا مع وجود مستعمرات وردية مع أو بدون مركز أسود. في النهاية ، سينمو جنس الكلبسيلا كمستعمرات صفراء.

افكار اخيرة

يستخدم أجار XLD على نطاق واسع في مختبرات علم الجراثيم لكفاءته العالية في استعادة الشيغيلا وله أيضًا انتعاش جيد من جنس السالمونيلا.

أظهر Rall et al. (2005) في عملهم بعنوان "تقييم ثلاثة مرق مخصب وخمسة وسائط صلبة للكشف عن السالمونيلا في الدواجن" أنه من بين 3 وسائط كلاسيكية تم اختبارها (أجار أخضر ساطع ، أجار SS وأجار XLD) ، XLD كان لديه أفضل معدل استرداد.

كانت نسب الاسترداد كما يلي: 13.8٪ للأجار الأخضر الساطع ، و 27.6٪ لـ SS ، و 34.5٪ لـ XLD. تم تجاوز أجار رامباش بنسبة 48 ٪ من الانتعاش و CHROMagar بنسبة 79.3 ٪ فقط بواسطة الوسائط الكروموجينية.

المراجع

1. الأمراض المنقولة بالغذاء. داء الشيغيلات. متاح على: anmat.gov.ar
2. "XLD أجار." ويكيبيديا، الموسوعة الحرة. 9 فبراير 2019، 11:46 UTC. 10 أبريل 2019 ، 19:25 wikipedia.org
3. مختبرات BBL. CHROMagar Salmonella / BD XLD Agar (biplate).2013 متاح في: bd.com
4. مختبر نيوجين. XLD أجار. متوفر في: foodafety.neogen
5. مختبر فرانسيسكو سوريا ملغيزو. XLD أجار. متاح على:
6. Rall L ، Rall R ، Aragon C ، Silva M. تقييم ثلاثة مرق تخصيب وخمسة وسائط طلاء للكشف عن السالمونيلا في الدواجن. براز. J. ميكروبيول. 2005 ؛ 36 (2): 147-150. متاح من: scielo.br
7. Forbes B، Sahm D، Weissfeld A. (2009). بيلي وسكوت التشخيص الميكروبيولوجي. 12 إد. التحرير Panamericana SA Argentina.