اللاكتوفينول الأزرق: الخصائص والتكوين والتحضير والاستخدامات - كيمياء - 2026

يتم تحضير قطن اللاكتوفينول الأزرق أو الأزرق بخصائص صبغة واحدة. يتم استخدامه في المختبرات السريرية لتلوين الهياكل الفطرية بشكل أساسي مثل الخيوط والأنابيب الجرثومية والجراثيم.

يساعد في التشخيص الافتراضي أو الأولي لبعض الفطريات ، ومع ذلك ، فمن المستحسن دائمًا تعزيز التشخيص باختبارات أكثر تحديدًا ، مثل الاختبارات البيوكيميائية أو المصلية.

تمثيل رسومي للبقعة الزرقاء لاكتوفينول ، مسحة ملطخة بأزرق لاكتوفينول ، تحضير مثبت بالمجهر. المصدر: public domain Pictures.net/https://www.youtube.com/watch؟v=P-kiFFZ7NvU /https://www.youtube.com/watch؟v=wSZ77T5L6e8

يتكون اللاكتوفينول الأزرق من حمض اللاكتيك والأزرق الأنيلين والجلسرين والفينول والماء منزوع الأيونات. يمكن تحضيرها في المختبر أو يمكن شراؤها جاهزة للاستخدام. بمجرد إعداده يصبح جاهزًا للاستخدام ، لا يجب تخفيفه تحت أي ظرف من الظروف ، لأن هذا الإجراء سيعطي نتائج رهيبة.

تركيز مكوناته يجعله مثالياً لتلطيخ الهياكل الفطرية ، حيث يقضي الفينول على الميكروبات البكتيرية المصاحبة ، بينما يولد حمض اللاكتيك طبقة واقية حول البنية الفطرية. أخيرًا ، يمتلك الأزرق الأنيلين تقاربًا للالتزام بهياكل الفطر.

أساس

باستخدام لون اللاكتوفينول الأزرق ، يتم إجراء تلطيخ بسيط للتركيبات الفطرية لثقافة فطرية معينة. يطلق عليه بسيط لأنه يستخدم فقط تلوين واحد.

يعمل لون اللاكتوفينول الأزرق ، بصرف النظر عن التلوين ، أيضًا كمصفي للعينة ، وذلك بفضل العمل المشترك لحمض اللاكتيك والفينول ، بالإضافة إلى ذلك ، يتصرف الفينول كرائد وفي نفس الوقت يمنع تحلل الكائنات الحية الدقيقة عن طريق تثبيط إنزيمات التحلل المائي التي قد تكون موجودة.

بينما يحافظ حمض اللاكتيك على مورفولوجيا تراكيب الفطريات.

من ناحية أخرى ، يمتلك الأزرق الأنيلين خاصية الالتصاق أو الارتباط بالبنى المحتوية على الكيتين. الهياكل ملطخة باللون الأزرق الفاتح.

وتجدر الإشارة إلى أن جدار الخلية للكائنات الدقيقة الفطرية ، وخاصة العفن ، يحتوي على مادة الكيتين ، ولهذا تعتبر هذه الصبغة مثالية لتلطيخ هذه الكائنات الدقيقة.

مميزات

محلول اللاكتوفينول الأزرق هو صبغة مائية شديدة الحمضية ، عكرة قليلاً ، ولونها أزرق فاتح. يظل ثابتًا إذا تم تخزينه بين 15 درجة مئوية و 25 درجة مئوية. يجب أن تبقى الزجاجة مغلقة بشكل صحيح. إنه مهيج ومسبب للتآكل للجلد والأغشية المخاطية.

تكوين

صيغة تحضير لتر واحد من اللاكتوفينول الأزرق هي كما يلي:

-250 جم / لتر حمض اللاكتيك

-1.0 جم / لتر أزرق الأنيلين أو أزرق ميثيل

- 500 جم / لتر من الجلسرين

-250 جم / لتر فينول

-250 مل من الماء المقطر أو منزوع الأيونات.

يذوب الفينول في الماء الدافئ مسبقًا. يضاف حمض اللاكتيك والجلسرين وخلطهما جيدًا. أخيرًا ، يذوب الأزرق الأنيلين. يمتزج مرة أخرى ويكون جاهزًا للاستخدام.

الأجزاء المعدة لتحضير 80 مل من محلول اللاكتوفينول الأزرق هي:

-20 جرام من بلورات الفينول

- 20 مل من حمض اللاكتيك

-40 مل من الجلسرين أو الجلسرين

- 20 مل ماء مقطر.

استعمال

يتم استخدامه لتلطيخ الهياكل الفطرية ، ومن خلال الخصائص المورفولوجية الملاحظة على المستوى المجهري ، لتكون قادرة على إجراء تشخيص افتراضي للفطر.

معالجة

تلطيخ التراكيب الفطرية للثقافات

- خذ ثقافة نقية للفطر الذي يجب ملاحظة هياكله.

- يفضل العمل في غطاء تدفق رقائقي ، أو تحت ولاعة ، باستخدام قناع وقفازات ، لأنه من الضروري الامتثال لمعايير السلامة الحيوية ، لأن معظم القوالب يسهل انتشارها في البيئة وبالتالي تمثل خطرًا للمشغل.

- توضع قطرة من اللاكتوفينول الأزرق على شريحة.

- قم بقص مربع صغير من شريط لاصق عالي الجودة وألصقه بحذر شديد حتى نهاية مقبض البلاتين المعقم على البارد.

- يقترب المقبض البلاتيني من الجزء الأكثر سطحية من المستعمرة الفطرية ويتم لمس الثقافة بعناية شديدة ، حيث يوجد الشريط اللاصق بالضبط.

- يتم نقله بعد ذلك إلى الشريحة ووضعه مباشرة على قطرة اللاكتوفينول الأزرق ، مع الحرص على أن الشريط ممتد تمامًا ومزيت الصبغة. يتم إزالة المقبض البلاتيني بدقة شديدة.

- توضع قطرة أخرى من اللاكتوفينول الأزرق على الشريط وغطاء على القمة. لا تضغط كثيرًا حتى لا تدمر هياكل الفطريات ، لأنها هشة للغاية. يجب السماح للملون بالعمل لمدة 3 إلى 4 دقائق تقريبًا.

- بعد هذا الوقت ، يكون المستحضر جاهزًا للمراقبة تحت المجهر بتكبير 10x أو 40X. إذا كانت الملاحظة 100X مطلوبة ، فيجب استخدام زيت الغمر.

- تكون تراكيب الفطريات بشكل عام ملطخة باللون الأزرق ، باستثناء الفطريات الديماتيكية التي ستحتفظ بلونها البني المميز لهذا النوع من الفطريات.

تلطيخ العينة البيولوجية المباشر

إذا كان مطلوبًا دراسة عينة بيولوجية مباشرة ، مثل البلغم ، والقيح ، والإفرازات ، والإفرازات ، من بين أمور أخرى ، فإنها تحتاج إلى إجراء مسبق لتطهير العينة. يستخدم محلول هيدروكسيد الصوديوم لهذا الغرض.

في حالة عينات الشعر يمكن صبغها مباشرة.

تؤخذ عدة شعيرات مصابة (10 في المجموع) من آفات سعفة الرأس المفترضة (مناطق الثعلبة) وتوضع على شريحة (3 إلى 4 شعيرات لكل شريحة). يتم وضع بضع قطرات من اللاكتوفينول الأزرق في الأعلى ومغطاة على الفور بغطاء ساترة.

أمسك الشريحة بالملقط وقم بالتسخين برفق فوق الموقد. للقيام بذلك ، قم بعمل 3 إلى 4 تمريرات سريعة عبر اللهب. راقب المجهر عند 40X وابحث عن جراثيم خارج أو داخل الشعر (ectothrix أو endothrix على التوالي). إذا لزم الأمر أضف زيت الغطس ولاحظ 100X.

تلطيخ أنبوب الجرثومة في تحديد

بعد احتضان الثقافة الافتراضية لمبيضات المبيضات البيضاء في مصل الدم لمدة 2 إلى 4 ساعات عند 37 درجة مئوية ، يتم أخذ جزء من المحلول وصبغه بلون اللاكتوفينول الأزرق. تمت ملاحظة التحضير تحت المجهر عند 40X. الأنبوب الجرثومي موجود وتلطخ الأبواغ المتفجرة باللون الأزرق الفاتح.

ورقة بيانات سلامة اللاكتوفينول

تحدد الجمعية الوطنية للحماية من الحرائق (NFPA) ورقة بيانات السلامة للمواد الكيميائية من حيث المخاطر التي تمثلها وفقًا للجوانب المختلفة ، والتي يرمز إليها بمعين ملون وعدد يتراوح من 0- أربعة.

يتم تحديد المخاطر الصحية باللون الأزرق ، والقابلية للاشتعال باللون الأحمر ، وعدم الاستقرار أو التفاعل باللون الأصفر ، وأي خطر خاص باللون الأبيض.

الصحة

الخطر الصحي الذي يشكله اللاكتوفينول الأزرق وفقًا لـ NFPA هو المستوى 3. وهذا يعني أن المادة خطيرة للغاية عند تناولها أو ملامستها مباشرة للجلد أو الغشاء المخاطي.

إنها مادة شديدة التآكل ومزعجة.

عند ملامسته للجلد والأغشية المخاطية فإنه يسبب حروقًا شديدة.

إذا تم تناوله يمكن أن يسبب الصداع والارتباك والخمول وفقدان الوعي وتوقف التنفس وحتى الموت.

القابلية للاشتعال

وفقًا لـ NFPA ، تم تصنيف Lactophenol Blue في المستوى 1 لقابلية الاشتعال. هذا يعني أنه لا يحترق إلا إذا تم تسخينه فوق 94 درجة مئوية.

عدم الاستقرار

مُدرج وفقًا لـ NFPA عند المستوى 0 (صفر) من حيث التفاعل. هذا يعني أنه ليس لديه خطر التفاعل ، أي أنه مادة مستقرة كيميائيًا.

الأخطار الخاصة

لا تقدم أي مخاطر خاصة إضافية.

المراجع

1. مختبر SAR. لاكتوفينول بلو. 2010. متاح في: labsar.com.
2. معمل الكيمياء السريرية التطبيقية. اللاكتوفينول الأزرق. 2015 متاح على: cromakit.es
3. مختبرات ميرك. الفحص المجهري الأزرق اللاكتوفينول في المحلول. 2017 متاح على: Users / Equipo / Downloads
4. بطاقة الطوارئ. محلول اللاكتوفينول الأزرق للتلطيخ الفطري. Universidad Pontificia Javeriana ، بوغوتا ، كولومبيا. 2014 متوفر على: javeriana.edu.co
5. González M، Diamont D، Gutiérrez B. تقنية لتلطيخ الهياكل الفطرية بأصباغ نباتية كبديل غير ملوث. بيواجرو ، 2011 ؛ 23 (1): 65-68. متاح في: Redalyc.
6. الوسائط المختبرية. لاكتوفينول قطن ازرق. 2017. متاح من: himedialabs.com
7. Wanger A، Chavez V، Huang R، Wahed A، Actor J، Dasgupta A. الاختبارات البيوكيميائية وتقنيات التلوين لتحديد الميكروبات. ساينس دايركت ، 2017 ؛ 61-73. متوفر من: Elsevier