اختبار تجلط الدم: الأساس المنطقي ، والإجراءات ، والاستخدامات - مادة الاحياء - 2026

ل اختبار المخثرة هي تقنية المختبرات المستخدمة للكشف عن وجود المخثرة الانزيم. هذا الإنزيم له خاصية تخثر البلازما. كان لوب عام 1903 أول من وصف هذا الإنزيم.

يتم إجراء هذا الاختبار على المكورات الموجبة للجرام وإيجابية الكاتلاز ، مما يسمح بتمييز سلالات Staphylococcus aureus عن باقي المكورات العنقودية ، حيث إنها الكائنات الحية الدقيقة الوحيدة ذات الأهمية السريرية التي تنتجها.

تكشف كلتا الصورتين عن اختبار Coagulase إيجابي. المصدر: الصورة اليسرى: Philippinjl. الصورة اليمنى: صورة التقطها المؤلف ماجستير. مارييلسا جيل.

بهذا المعنى ، غالبًا ما يُشار إلى أفراد عائلة Staphylocaceae الذين تم اختبارهم بشكل سلبي باسم المكورات العنقودية السلبية المخثرة.

هناك بعض السلالات غير S. aureus التي يمكنها إنتاج تجلط الدم ، مثل Staphylococcus schleiferi spp coagulans و S. hyicus و S. intermedius و S. delphini.

ومع ذلك ، فإن الثلاثة الأولى لها أهمية إكلينيكية على المستوى البيطري ونادرًا ما يتم العثور عليها كعامل مسبب للعدوى في البشر ، بينما توجد S. delphini في البيئات البحرية فقط.

علاوة على ذلك ، يمكن تمييزها بسهولة لأن S. hyicus و S. intermedius لا تخمر المانيتول ولا تخمر S. schleiferi spp coagulans المالتوز أو التريهالوز ، بينما S. aureus تخمر هذه الكربوهيدرات.

تم ربط وجود إنزيم تجلط الدم في ضراوة السلالات. ومع ذلك ، فإن هذه النظرية تتفكك ، حيث لوحظت أنواع ضارة أخرى سلبية تجلط الدم قادرة على إنتاج عدوى كبيرة.

أساس

ترجمة

التراص في غضون 5-20 ثانية (اختبار إيجابي قوي).

تراص متغير يحدث بين 20 ثانية ودقيقة واحدة (اختبار إيجابي متأخر).

درجة من التراص بعد دقيقة واحدة (دليل مشكوك فيه). يوصى بتكرار الاختبار أو التأكيد بطريقة الأنبوب.

لا يوجد تراص (اختبار سلبي).

النتيجة مع SSF. يجب أن يعطي دائمًا سلبيًا ، إذا كان يعطي إيجابيًا تلقائيًا ، فإن نتيجة الاختبار باطلة.

-اختبار تجلط الدم

المواد

- أنبوب اختبار معقم

-بلازما

- حمام مريم عند 37 درجة مئوية.

تقنية

ماصة 0.5 مل من البلازما في أنبوب اختبار 12 × 75 باستخدام ماصة معقمة. قم بتحميل حلقة البلاتين من 2 إلى 4 مستعمرات نقية للدراسة من مزرعة صلبة لمدة 18 إلى 24 ساعة وتذوب في البلازما يخلط ويحضن بعناية عند 37 درجة مئوية لمدة 4 ساعات.

افحص الأنبوب في الساعة الأولى دون رجّه ، فقط قم بإمالته برفق. إذا لم تظهر الجلطة بعد ، فيمكن ملاحظتها كل 30 دقيقة حتى اكتمال 4 ساعات. إذا ظلت النتيجة سلبية بعد 4 ساعات ، فيمكن تركها لمدة تصل إلى 24 ساعة ولكن في درجة حرارة الغرفة. مراقبة والإبلاغ عن النتيجة.

بناءً على الخبرة ، يوصي بعض علماء الأحياء الدقيقة باستخدام 500 ميكرولتر من المعلق البكتيري من 18 ساعة في وسط سائل لإجراء الاختبار.

يبدو أنه يقدم نتائج أسرع وأكثر موثوقية مما كانت عليه عند استحلاب المستعمرات من الوسائط الصلبة ، خاصة إذا تم استخدام البلازما البشرية التي تم الحصول عليها من بنك الدم.

يساعد استخدام سلالات من المرق على تخفيف الوجود المحتمل للأجسام المضادة البشرية المضادة للمكورات العنقودية في البلازما التي يمكن أن تمنع عمل تجلط الدم.

ترجمة

إذا شوهدت جلطة تشمل كل السائل (تخثر كامل) أو جلطة لا تحتوي على أي شيء في السائل المتبقي (تخثر جزئي) ، فيجب اعتبارها اختبارًا إيجابيًا.

إذا لم يتم تكوين جلطة ، أي أن التعليق يظل متجانسًا ، يكون الاختبار سالبًا.

- اختبار Coagulase باستخدام الفيبرينوجين

يستخدم الفيبرينوجين مثل البلازما ويستخدم في اختبارات الشريحة والأنبوب. استمر كما هو موصوف للبلازما وفسر بنفس الطريقة.

استعمال

يتم استخدامه للتمييز بين المكورات العنقودية الذهبية والمكورات العنقودية السلبية المخثرة.

سؤال وجواب

هل لديك مزارع جديدة من سلالة العنقودية الذهبية المتاحة لاستخدامها كعنصر تحكم إيجابي. سلالة S. البشروية متاحة أيضا كعنصر تحكم سلبي.

محددات

- لا ينبغي ترك الاختبار الإيجابي في الحضانة لمدة 24 ساعة ، لأن S. aureus تنتج الفيبرينوليسين الذي يذيب الجلطة.

- لإجراء اختبار موثوق ، يجب استخدام بلازما طازجة أو معاد تشكيلها حديثًا ، كما أنه من المهم استخدام مزارع بكتيرية جديدة (18 إلى 24 ساعة). هذا يتجنب السلبيات الكاذبة.

- يجب إجراء الاختبار مع تحكم سلبي وإيجابي.

- يمكن لبعض الوسائط الصلبة أن تتداخل مع اختبار تجلط الدم. لا ينصح باستخدام مستعمرات من أجار مانيتول المالح.

- في حالة استخدام البلازما السيترية يوصى بوضع 5 وحدات من الهيبارين لكل مل من البلازما لتجنب النتائج الإيجابية الكاذبة. وذلك لأن بعض الكائنات الحية الدقيقة غير المكورات العنقودية الذهبية يمكن أن تكسر السترات وتتسبب في تجلط البلازما. في هذه الحالة ، يُنصح بإجراء اختبار الجرام والكتلاز.

- من المهم ، في اختبار الأنبوب ، مراقبة التفاعل كل 30 دقيقة ، حيث توجد سلالات من بكتريا S. aureus تنتج تركيزات عالية من الفيبرينوليسين وستخفف الجلطة المتكونة حديثًا بسرعة. تجنب السلبيات الكاذبة.

- عند مراقبة الاختبار ، تجنب اهتزاز الأنبوب فجأة ، فقد يؤدي ذلك إلى تدمير بداية تكوين الجلطة التي لن يتم استعادتها لاحقًا ، مما يتسبب في حدوث سلبيات خاطئة.

المراجع

1. Koneman E ، Allen S ، Janda W ، Schreckenberger P ، Winn W. (2004). التشخيص الميكروبيولوجي. 5th إد. التحرير Panamericana SA Argentina.
2. Forbes B، Sahm D، Weissfeld A. (2009). بيلي وسكوت التشخيص الميكروبيولوجي. 12 إد. التحرير Panamericana SA Argentina.
3. ماك فادن ج. (2003). الاختبارات البيوكيميائية لتحديد البكتيريا ذات الأهمية السريرية. الطبعة الثالثة. افتتاحية بان أميريكانا. بوينس ايرس. الأرجنتين.
4. مختبرات Pro-Lab. أرنب يتخثر البلازما. متاح في: pro-lab.com
5. "تجلط الدم". ويكيبيديا، الموسوعة الحرة. 12 فبراير 2019، 04:23 UTC. 22 أبريل 2019 ، 15:50 wikipedia.org.