- الأصباغ المستخدمة في تلطيخ بسيط
- الخطوات الست للتلوين البسيط
- الخطوة 1
- الملاحظة
- الخطوة 2
- الملاحظة
- الخطوه 3
- الخطوة 4
- الملاحظة
- الخطوة الخامسة
- المراجع
و تلطيخ واحد هو تلطيخ سريعة الداخلي وبسيطة تستخدم فيها صبغة واحدة، لذلك يطلق عليه بسيطة. يتم استخدامه بشكل أساسي لتحديد مورفولوجيا وتنظيم الخلايا الموجودة في العينة.
الخلايا عديمة اللون بشكل طبيعي ، لذلك من الضروري جعلها مرئية بطريقة ما عند عرضها تحت المجهر.

خلايا خد الإنسان ملطخة بتلطيخ بسيط باللون الأزرق الميثيلين.
من المهم ملاحظة أن الأصباغ المستخدمة في التلوين البسيط يجب أن تكون أساسية بشحنة موجبة (كاتيوني) ، حتى تتمكن من الارتباط تلقائيًا بجدار الخلية والسيتوبلازم.
هذه الهياكل الخلوية مشحونة سلبًا. هذا هو السبب في أن الصبغة موجبة الشحنة تنجذب إلى الخلايا وترتبط بها تلقائيًا. وبالتالي ، فإن جميع الخلايا الموجودة في العينة ملطخة بسرعة.
الأصباغ المستخدمة في تلطيخ بسيط
هناك العديد من البقع الأساسية التي يمكن استخدامها في معمل الأحياء الدقيقة. الأكثر استخدامًا هي:
- الميثيلين الأزرق.
- الكريستال البنفسجي.
- المسرطنة.
- فوشين أساسي.
تعمل كل هذه الأصباغ بشكل جيد في البكتيريا لأنها تحتوي على أيونات لونية موجبة الشحنة (حوامل الكروم).
أوقات تلطيخ معظم هذه البقع قصيرة نسبيًا. تتراوح عمومًا من 30 ثانية إلى دقيقتين ، اعتمادًا على تقارب الصبغة.
من المهم أن تضع في اعتبارك أنه قبل تلطيخ العينة عن طريق تلطيخ بسيط ، يجب تمديدها وتثبيتها على الشريحة الزجاجية (الشريحة) ؛ تسمى العينة الممتدة والثابتة مسحة.
الخطوات الست للتلوين البسيط
الخطوة 1
ضع الشريحة على رف تلطيخ وقم بتطبيق البقعة المطلوبة. دع الوقت المقابل يعمل.
عادةً ما يستغرق التلوين البسيط من بضع ثوانٍ إلى دقيقتين ، اعتمادًا على البقعة المستخدمة.
الملاحظة
في هذه الخطوة ، من المهم عدم تجاوز الوقت الموصى به للصبغة المستخدمة ، حيث يمكن أن تتشكل البلورات على الورقة ، مما ينتج عنه ما يُعرف بـ "القطع الأثرية" التي تشوه شكل الخلايا.
الخطوة 2
اغسل اللطاخة جيدًا من الشريحة بالماء المقطر من زجاجة ، أو أيضًا ماء الصنبور المتدفق ببطء ، حتى يصبح الجريان السطحي واضحًا. يستغرق هذا عادةً من 5 إلى 10 ثوانٍ.
الملاحظة
لا تضع مجرى الماء مباشرة على اللطاخة لتجنب أن نفس القوة تلحق الضرر بالعينة.
إذا لم يكن لديك ماء مقطر ، يمكنك استخدام ماء الصنبور بدون مشكلة لأنه لن يؤثر على نتيجة التلوين.
الخطوه 3
امسح الشريحة بمناشف ورقية ماصة في اتجاه واحد وبدون فرك. تأكد من نظافة الجانب السفلي من الشريحة.
الخطوة 4
مراقبة المسحة الملطخة تحت المجهر. ابدأ بالأهداف الأبعد لتحديد المنطقة التي تريد مراقبتها بمزيد من التفصيل. قم بتغيير الهدف للاقتراب من العينة.
الملاحظة
لاستخدام الهدف مع تكبير أعلى (عادةً 100X) ، يجب استخدام زيت الغمر ، حيث يساعد ذلك على اختراق الضوء بشكل أفضل وتبدو الصورة أكثر وضوحًا. ليس من الضروري استخدام ساترة.
الخطوة الخامسة
أخيرًا ، تخلص من جميع العينات في حاوية مناسبة تحمل علامة "خطر بيولوجي" بشكل صحيح.
المراجع
- (2001). التطبيقات الميكروبيولوجية: دليل المختبر في علم الأحياء الدقيقة العام (الطبعة الثامنة). شركات ماكجرو هيل.
- هاريشا ، س. (2006). مقدمة في التكنولوجيا الحيوية العملية (1 ش). وسائط جدار الحماية.
- Moyes ، RB ، Reynolds ، J. ، & Breakwell ، DP (2009). التلوين الأولي للبكتيريا: بقع بسيطة. البروتوكولات الحالية في علم الأحياء الدقيقة ، (ملحق 15) ، 1-5.
- بومرفيل ، ج. (2013). أساسيات الكامو من مختبر علم الأحياء الدقيقة (10 تشرين). جونز وبارتليت التعلم.
- بريسكوت ، هـ. (2002). مختبر تمارين في علم الأحياء الدقيقة (5 عشر). شركات ماكجرو هيل.
- سومبالي ، جي وميهروترا ، ر. (2009). مبادئ علم الأحياء الدقيقة (1 ش). تاتا ماكجرو هيل التعليم.
