- أساس
- تجهيز
- - مرق سيلينيت
- - تهيئة البيئة التجارية
- البديل مرق السيلينايت سيستين
- التطبيقات
- زرعت
- سؤال وجواب
- محددات
- المراجع
و سيلينات هو انتقائي مستنبت السائل. تم تصميمه من قبل Leifson لإثراء العينات التي يشتبه في وجود البكتيريا الممرضة المعوية من جنس السالمونيلا.
يتوافق هذا الوسيط مع متطلبات جمعية الصحة العامة الأمريكية (APHA) ، وبالتالي فهو مقبول للتحقيق في وجود السالمونيلا في عينات البراز أو البول أو الطعام السائل أو الصلب والماء وغيرها.
مرق السيلينايت. المصدر: صورة التقطها المؤلف ماجستير. مارييلسا جيل
يساعد تركيبه الكيميائي في استعادة هذه الكائنات الدقيقة وبالتالي يمنع نمو الكائنات الأخرى. وهو سام في المقام الأول لمعظم البكتيريا التي تنتمي إلى عائلة Enterobacteriaceae. ومع ذلك ، فإنه يسمح أيضًا باستعادة سلالات الشيغيلا ولا يمنع نمو Pseudomonas و Proteus.
وهو يتألف من سيلينيت هيدروجين الصوديوم اللامائي وفوسفات الصوديوم اللامائي والبيبتون واللاكتوز. هناك أيضًا متغير يضاف إليه السيستين ، ومن هنا جاء اسمه مرق سيلينيت-سيستين.
في الوقت الحالي ، يفضل استخدام مرق السيلينايت- السيستين ، حيث يتم الحصول على نسبة أعلى من استعادة السالمونيلا ، تعادل تلك التي لوحظت مع الوسائط الانتقائية الأخرى لنفس الغرض ، مثل مرق رباعي الصوديوم.
أساس
تعمل البيبتون الموجودة في المرق كمغذيات للتطور السليم للكائنات الحية الدقيقة. تستخدم سلالات السالمونيلا البيبتون كمصدر للنيتروجين والفيتامينات والأحماض الأمينية.
اللاكتوز هو الكربوهيدرات القابلة للتخمر ، بينما سيلينيت الصوديوم هو المادة المثبطة التي توقف نمو البكتيريا الموجبة للجرام ومعظم البكتيريا الموجودة في الفلورا المعوية ، وخاصة تلك التي تنتمي إلى عائلة البكتيريا المعوية. فوسفات الصوديوم هو المخزن المؤقت الذي يعمل على استقرار درجة الحموضة في الوسط.
في حالة متغير مرق السيلينيت الذي يحتوي على L-cystine ، فإن هذا المركب الإضافي هو عامل مختزل يقلل من سمية السيلانيت ، مما يزيد من تعافي السالمونيلا.
تجهيز
- مرق سيلينيت
إذا كان لديك مكونات الخليط ، فيمكنك أن تزن:
4 غرام من سيلينيت هيدروجين الصوديوم اللامائي.
10 غرام من فوسفات الصوديوم اللامائي.
5 جرام بيبتون.
4 جرامات من اللاكتوز.
قم بإذابة المركبات في لتر واحد من الماء المقطر المعقم. يمكن تسخينه قليلاً ليذوب تمامًا.
تعرض بعض المعامل الوسيط لمدة 10 دقائق في بخار بطلاقة لتعقيمه ، حيث لا ينبغي استخدام الأوتوكلاف. إذا تم تعقيم الوسيط ، فيمكن تخزينه في الثلاجة حتى الاستخدام.
يمكن أيضًا تحضيرها غير معقمة وتقديمها مباشرة من 10 إلى 15 مل في أنابيب اختبار معقمة.
في هذه الحالة ، يجب تركه للراحة والاستخدام على الفور. نظرًا لأن الوسيط غير معقم ، فلا يمكن تخزينه في الثلاجة لاستخدامه لاحقًا.
- تهيئة البيئة التجارية
إذا كان الوسيط التجاري متاحًا ، فقم بوزن 23 جم من الوسط المجفف وقم بإذابه في لتر واحد من الماء المقطر المعقم. تسخين لفترة وجيزة للانتهاء من الذوبان. لا تستخدم الأوتوكلاف. ضع 10 أو 15 مل بطريقة معقمة في أنابيب اختبار معقمة.
يجب أن يكون الرقم الهيدروجيني النهائي للوسيط 7.0 ± 0.2.
وتجدر الإشارة إلى أن لون الوسط المجفف هو البيج ومستحضره عنبر خفيف وشفاف.
البديل مرق السيلينايت سيستين
يحتوي على نفس مركبات مرق السيلينيت ، ولكن يضاف 10 ملغ من السيستين. باقي الإجراء هو نفسه تمامًا كما هو موضح أعلاه.
التطبيقات
هذه الوسيلة خاصة لاستخدامها في الدراسات الوبائية ، في الحالات التي لا يكون فيها المرض في مرحلته الحادة ، أو المرضى الذين لا يعانون من أعراض أو حاملين صحيين
يعد عزل جنس السالمونيلا أمرًا صعبًا بشكل عام ، حيث إنها عادةً ما تكون عينات تلوث سيئة فقط. كونها بكميات صغيرة ، يمكن تداخلها بسهولة مع نمو أجناس بكتيرية أخرى توجد بكميات أكبر.
من ناحية أخرى ، غالبًا ما تتعرض المواد الخام التي تُصنع بها الأطعمة المصنعة للحرارة وعمليات الجفاف واستخدام المطهرات والإشعاع والمواد الحافظة وغيرها.
لذلك ، فإن السالمونيلا الموجودة في المواد الخام تتعرض لسوء المعاملة عن طريق إخضاع المنتج للعمليات الصناعية المذكورة أعلاه. وبالمثل ، في حالة العينات السريرية مثل البراز ، قد تكون السلالات ضعيفة إذا جاءت من مرضى عولجوا بالمضادات الحيوية.
لذلك ، فإن أي عينة يشتبه في وجود السالمونيلا فيها يجب أن يتم تخصيبها مسبقًا في مرق اللاكتوز ، ومن ثم إثرائها في مرق السيلينيت لتحسين استعادتها في الوسائط الانتقائية ، مثل SS أجار ، أجار الزيلوز ، ليسين ديوكسيكولات (XLD)) ، وأجار Hektoen المعوي (HE) وأجار أخضر زاهي ، من بين أمور أخرى.
زرعت
بالنسبة لعينات البراز ، يتم أخذ 1 جرام من العينة وتعليقها في أنبوب مع 10 إلى 15 مل من مرق السيلينيت. إذا كان البراز سائلاً ، خذ 1 مل وقم بتعليقه في المرق. بالنسبة لمسحات المستقيم ، قم بتفريغ مادة المسحة في المرق.
في عينات الطعام الصلب ، يتم أخذ 1 غرام وتعليقه في مرق السيلينيت.
في الأطعمة السائلة تخلط في أجزاء متساوية مع مرق السيلينيت بتركيز مضاعف.
بالنسبة لعينات البول ، جهاز الطرد المركزي ، تخلص من المادة الطافية ، خذ كل الرواسب وعلقها في مرق السيلينيت.
يتم تحضين المرق عند 37 درجة مئوية لمدة 24 ساعة من الحضانة. يتضح النمو البكتيري من خلال التعكر. يمكن أيضًا تضمين أنبوب إضافي لكل عينة للحضانة عند 42 درجة مئوية. بعد ذلك ، بذر الوسائط الصلبة الانتقائية من مرق السيلينيت.
سؤال وجواب
للتحكم في العقم ، يتم تحضين مرق السيلينيت من كل دفعة غير محصنة عند 37 درجة مئوية لمدة 24 ساعة. من المتوقع ألا يكون هناك عكارة أو تغير لون للوسط.
يمكن استخدام السلالات المعروفة للتحكم في الأداء السليم للوسيط ، مثل:
Salmonella enteritidis ATCC 13076، Salmonella typhimurium ATCC 14028، Salmonella choleraesuis ATCC 12011، Escherichia coli ATCC 25922 and Proteus mirabilis ATCC 43071.
النتائج المتوقعة هي:
- بالنسبة للسلالات البكتيرية الثلاث الأولى ، يجب أن يكون النمو مرضيًا.
- للتثبيط الجزئي للإشريكية القولونية.
- لبروتيوس نمو معتدل.
محددات
وسط مرق السيلينايت سام لجلد الإنسان ، لذلك يجب تجنب الاتصال المباشر.
المراجع
- Flores-Abuxapqui J، Puc-Franco M، Heredia-Navarrete M، Vivas-Rosel M، Franco-Monsreal J. مقارنة بين وسائط ثقافة سيلينيت الصوديوم ورباعي تراثيونات الصوديوم ، كلاهما محتضن عند 37 درجة مئوية و 42 درجة مئوية من أجل عزل Salmonella spp من براز ناقلات المرض. ريف بيوميد 2003 ؛ 14 (4): 215-220
- مختبرات بريتانيا. مرق سيلينيتو. 2015 متاح على: britanialab.com
- مختبرات نيوجين. مرق السيلينايت. متاح على: foodafety.neogen.com
- González -Pedraza J، Pereira -Sanandres N، Soto -Varela Z، Hernández -Aguirre E، Villarreal- Camacho J. العزلة الميكروبيولوجية ل Salmonella spp. والأدوات الجزيئية للكشف عنها. الصحة ، بارانكويلا 2014 ؛ 30 (1): 73-94. متاح من:
- Forbes B، Sahm D، Weissfeld A. (2009). بيلي وسكوت التشخيص الميكروبيولوجي. 12 إد. التحرير Panamericana SA Argentina.