الحلقة البكتريولوجية: الخصائص والأنواع والاستخدامات - مادة الاحياء

في حلقة الجرثومية هي أداة العمل التي يستخدمها علماء الأحياء المجهرية لزرع الثقافات الميكروبية (البكتيريا أو الفطريات). ربما تكون الأداة الأكثر استخدامًا من قبل هؤلاء المحترفين.

يبدو استخدامه بسيطًا ، لكنه في الواقع يتطلب الكثير من التدريب. قبل البدء في البذر ، يجب تعقيم الحلقة في موقد بنسن ، ثم يتم أخذ اللقاح الميكروبي الذي يمكن أن يأتي من مزرعة سائلة أو ثقافة صلبة.

أنواع الحلقات البكتريولوجية. المصدر: لم يتم تقديم مؤلف يمكن قراءته آليًا. ばやお مفترض (بناءً على مطالبات حقوق النشر).

بمجرد أخذ اللقاح ، يمكن ترسيبه في وسط سائل أو بذره في وسط صلب. بعد كل إجراء يتم تعقيم الحلقة مرة أخرى. المقبض مناسب أيضًا لعمل المسحات الجرثومية على الشريحة.

تحتوي الحلقة البكتريولوجية على العديد من الأسماء ، بما في ذلك: حلقة أو حلقة البلاتين ، حلقة التلقيح أو حلقة البذور ، ولكن اسمها الحقيقي هو حلقة Kohle.

المادة التي يصنع بها المقبض عمومًا هي سبيكة من النيكل والكروم (نيتشروم) أو بلاتين. من الأنواع الأخرى المتوفرة في السوق الحلقات البكتريولوجية البلاستيكية التي يمكن التخلص منها.

من ناحية أخرى ، هناك عدة أنواع من الحلقات البكتريولوجية ، كل منها يؤدي وظيفة ضمن المهام التي يقوم بها عالم الأحياء الدقيقة. يعتمد اختيار المقبض على ما يجب القيام به.

على سبيل المثال ، لأداء مخطط عن طريق النضوب من أجل عزل كائن حي دقيق ، يتم استخدام حلقة البلاتين ، والتي تنتهي بحلقة مغلقة ، بغض النظر عما إذا كانت معايرة أم لا.

بينما ، إذا كان لزرع عينة بول ، حيث من المهم تحديد وحدات CFU ، فمن الضروري استخدام حلقة المعايرة. وبالمثل ، لتلقيح الاختبارات البيوكيميائية ، التي تتطلب أن تزرع عن طريق ثقب ، فإن حلقة الإبرة ضرورية. من المهم أن يتم التعامل مع المقبض بواسطة أفراد مدربين.

مميزات

تتكون الحلقات البكتريولوجية من طرفين متطرفين. أحد طرفيه يتوافق مع المقبض أو القاعدة ، بينما الآخر هو المقبض نفسه.

قاعدة المقبض أو المقبض

تعمل القاعدة على إمساك المقبض أثناء المناولة. عادة ما تكون معدنية ، ولكنها تحتوي على عازل حراري لمنع المشغل من الاحتراق عند تعقيم طرف المقبض على الولاعة. يبلغ طوله حوالي 20 سم ، على الرغم من أنه يمكن أن يكون أطول. لديها خيط لضبط المقبض.

مقبض

إنها النهاية الوظيفية ، أي الجزء الذي يتلامس مع الكائنات الحية الدقيقة ووسائط الثقافة. يتكون من سلك رفيع يتم إدخاله في القاعدة.

يمكن صنع المقبض من نيتشروم أو بلاتينيوم ، ولهذا يطلق عليه أحيانًا اسم مقبض بلاتيني. يبلغ طوله حوالي 6.5 سم ويبلغ قياسه حوالي 0.20 ملم. يمكن للمقبض مع المقبض قياس 26.5 سم. قد تختلف القياسات من مصنع لآخر.

أنواع

هناك عدة أنواع من الحلقات البكتريولوجية ولكل منها استخدام محدد. أنواع المقابض هي كما يلي: مقبض على شكل حلقة معايرة ، ومقبض على شكل حلقة غير معاير ، ومقبض مستقيم أو إبرة ، ومقبض ملق ، ومقبض على شكل "L" ، ومقبض ذو رأس حاد.

من ناحية أخرى ، يمكن أن تكون المقابض دائمة أو يمكن التخلص منها. يتم تعقيم تلك التي تستخدم بشكل دائم في أخف وزنا ، ويمكن إعادة استخدامها ومتينة للغاية. في حين أن المستهلكات معقمة من المصنع ، إلا أنها تستخدم مرة واحدة فقط ويتم التخلص منها.

التطبيقات

مقبض الحلقة ، غير معاير

إنه المقبض الأكثر استخدامًا في مختبر علم الأحياء الدقيقة. يتم استخدامه لأخذ لقاح من معلق جرثومي (وسط سائل) أو جزء من مستعمرة (وسط صلب) ، ليتم زرعه في وسط زراعة آخر ، إما اختبار كيميائي حيوي أو وسط أكثر إثراءًا أو انتقائيًا ، حسب الحالة. كما أنه مفيد لعمل مسحات جرثومية على شريحة.

مع هذا النوع من الحلقات ، يمكن أن يكون اللقاح الأولي مخططًا. وهي مصممة أيضًا بحيث تنزلق بسلاسة على الأجار دون الإضرار به. بالطبع ، يتطلب ذلك وجود طاقم مدرب للتعامل مع تقنية البذر ، وتطبيق القوة والحركات الصحيحة لعمل خط جيد.

يمكن إجراء تقنيات البذر المختلفة باستخدام هذا المقبض. على سبيل المثال ، عادةً ما يتم زرع الوسائط الصلبة في أطباق بتري عن طريق الإرهاق (هناك عدة تقنيات ، انظر الفيديو 1).

تهدف هذه التقنية إلى الحصول على مستعمرات معزولة من أجل دراستها وتحديدها ، خاصة عندما تكون العينة متعددة الميكروبات ، أي أن الثقافة ليست نقية (تحتوي على أكثر من نوع واحد من الكائنات الحية الدقيقة).

بدلاً من ذلك ، تُزرع الأوتاد في شكل متعرج بسيط للحصول على كتلة بكتيرية ، وليس ضروريًا في هذه الحالة لعزل المستعمرات.

في بعض الأحيان يتم استخدامها أيضًا لأخذ عينات معينة. على سبيل المثال ، استخدم روجاس وزملاؤه الحلقة البكتريولوجية لجمع عينات الأنسجة المهبلية من الفئران.

حلقة بكتريولوجية ذات طرف حلقية ، غير معايرة. المصدر: Pixinio.com

مقبض على شكل حلقة ، معاير

يتم معايرة هذا المقبض كما يوحي اسمه لأخذ كمية محددة من المعلق الميكروبي. يتم استخدامه عندما يكون من الضروري أن يمتثل اللقاح لما هو موحد في الفن.

على سبيل المثال ، من الشائع جدًا زراعة مزارع البول. في هذه الحالة ، يمكن استخدام حلقة معايرة 0.01 مل و 0.001 مل.

وتجدر الإشارة إلى أن المقابض التي تمت معايرتها لها هامش خطأ يختلف حسب الزاوية التي يتم أخذ العينة بها وحجم فوهة الحاوية.

إذا تم إدخال الحلقة 0.001 مل عموديًا في وعاء بفم صغير (7 مم) ، فإن الكمية المأخوذة ستكون أقل بنسبة 50٪ من المرغوبة.

يحدث هذا لأنه كلما كان قطر فوهة الحاوية أصغر ، كلما زاد التوتر السطحي وبالتالي تزداد قوى الالتصاق بين (الزجاج - السائل). هذا يتسبب في أن تكون شحنة السائل التي يأخذها المقبض أقل.

في حين أنه إذا تم أخذها بزاوية 45 درجة في حاوية ذات فوهة واسعة (≥ 22 مم) ، فيمكن جمع 150٪ أكثر من الكمية المطلوبة. في هذه الحالة ، يكون التوتر السطحي أقل وتقل قوى التماسك الزجاجي / البلاستيكي ، بينما تزداد قوة التماسك بين السائل والسائل.

بسبب ما سبق ، تُفضل أحيانًا طرق أخرى لتقدير وحدات تكوين المستعمرات في مزارع البول.

مقبض مستقيم أو إبرة

ويسمى أيضًا مقبض الخيط. يتم استخدامه لتلقيح بعض الاختبارات الكيميائية الحيوية ، وخاصة تلك التي تتطلب البذر بتقنية البزل. مثال ، وسائط شبه صلبة يتم تحضيرها في شكل كتلة ، مثل: وسط SIM و MIO و O / F.

بالإضافة إلى ذلك ، في حالة MIO و SIM التي تقيّم الحركة ، من الضروري إجراء الثقب بحلقة إبرة ، لأن تفسير الحركة الإيجابية يحدث عندما تنمو البكتيريا باتجاه جوانب اللقاح الأولي.

يمكن للاختبار الملقح بحلقة عروية أن يزيف النتائج (إيجابية كاذبة). لهذا السبب ، في هذا النوع من البذر ، يجب الحرص على أن الثقب فريد من نوعه ، وأنه عند إزالته يخرج في نفس الاتجاه الذي دخل إليه.

اختبار آخر يجب أن يتم بذره بواسطة الإبرة على الرغم من أنه تم تحضيره في شكل إسفين هو اختبار Kligler. في هذا الاختبار ، لا يُنصح أن يخترق الأكسجين عميقًا في الأجار ، حيث يلزم وجود وسط فقير بالأكسجين لحدوث تفاعلات كيميائية معينة. يستخدم هذا المقبض أيضًا للمس مستعمرة معينة لغرض الثقافة الفرعية.

مقبض ملعقة

تعطي معظم الكائنات الحية الدقيقة مستعمرات ناعمة وسهلة التساقط. ومع ذلك ، هناك بعض العوامل الميكروبية التي تكون مستعمراتها صلبة وجافة ، على سبيل المثال المتفطرات بشكل عام وبعض الفطريات. في هذه الحالات ، من المفيد استخدام مقبض spatulate.

مقبض على شكل حرف "L"

استخدامه الأكثر شيوعًا هو تناغم الثقافات الفطرية ، وخاصة العفن.

مقبض طرف حاد

من المفيد أخذ مستعمرات صغيرة جدًا موجودة في الثقافات متعددة الميكروبات ، حتى تتمكن من استنباتها.

تقنيات البذر

فيديو 1

تعقيم المقبض البلاتيني

يجب تعقيم المقبض قبل الاستخدام وبعده. لتعقيم الحلقة البكتريولوجية في الولاعة ، اتبع ما يلي: يجب وضع المقبض أعلى اللهب ، واعتماد الوضع الرأسي قدر الإمكان ، بطريقة يمكن التعقيم من طرفها لأعلى.

عندما يتحول الخيط الناعم إلى اللون الأحمر الفاتح ، يمكن القول أنه معقم لاستخدامه ، يتم تبريده وأخذ العينة المختارة. (انظر الفيديو 2).

تعقيم الحلقة البكتريولوجية

فيديو 2

المراجع

"الحلقة البكتريولوجية" ويكيبيديا ، الموسوعة الحرة. 23 تموز (يوليو) 2019، 13:31 UTC. 18 أغسطس 2019، 22:45. ويكيبيديا.
Herrera D، López P، Duque J، Pérez L، Golding R، Hernández C. مقابض معدنية معايرة لعلماء الأحياء المجهرية: بديل من التصنيع الوطني. سوك. تعال. ميكروبيول. 2010 ؛ 30 (1): 37-42. متاح على: ve.scielo.org
Forbes B، Sahm D، Weissfeld A. (2009). بيلي وسكوت التشخيص الميكروبيولوجي. 12 إد. التحرير Panamericana SA Argentina.
Koneman E ، Allen S ، Janda W ، Schreckenberger P ، Winn W. (2004). التشخيص الميكروبيولوجي. 5th إد. التحرير Panamericana SA Argentina.
Rojas A و Pardo-Novoa J و Río R و Gómez-Hurtado M و Limón D و Luna F et al. تحديد التأثير المسكن لمستخلص الهكسان من زهور Eupatorium arsenei في نموذج الألم الحاد في الفئران. مكس. علم. مزرعة. 2015 ؛ 46 (1): 64-69. متاح على: scielo.org

الحلقة البكتريولوجية: الخصائص والأنواع والاستخدامات - مادة الاحياء - 2026