و orceína غير طبيعية ذات لون ارجواني، المستخرجة من مختلف الأشنات كما orchilla أو archill، fruticose المسطح Rocella TINCTORIA ولكنورا باريلا في المقام الأول. تم العثور على Rocella tinctoria في القارة الأفريقية والأمريكية ، على الرغم من أنه يمكن استبدالها بأنواع أخرى موجودة في أوروبا.
استخدمت هذه البقعة على نطاق واسع في دراسات الوراثة الخلوية منذ العصور القديمة. بهذا المعنى ، تم تقديم مستحضر orcein الذي يحتوي على حمض الأسيتيك بواسطة LaCourt في عام 1941 ، ولهذا السبب تم تسميته في البداية بتقنية LaCourt.
التركيب الكيميائي لمحلول الأورسين والأورسين. المصدر: Wikipedia.org/ Oguenther at de.wikipedia (Dr.Goenther)
وبالمثل ، نظرًا لبساطته وتكلفته المنخفضة ، فقد تم استخدامه لتصنيع عباد الشمس (بقعة مستخرجة من الأشنات) وفي الدراسات النسيجية (تلوين الخلايا والأنسجة).
استخدمت العديد من الدراسات هذا التلوين جنبًا إلى جنب مع مواد كيميائية أخرى ، مثل الأمونيا بيكروكارمينيت وحمض الخليك ، لتلطيخ الألياف المرنة والكروموسومات على التوالي. في الوقت الحاضر ، يستمر استخدام الأورسين في الدراسات الوراثية الخلوية للحيوانات والنباتات.
في الآونة الأخيرة ، سيلفا وآخرون. استخدم 2017 بنجاح هذه البقعة لمراقبة التغيرات المختلفة التي تحدث في الألياف المرنة لجلد الإبهام لدى كبار السن التشيليين. كشفت هذه الدراسة كيف تتغير ألياف الإبهام مع تقدم العمر.
وبهذا المعنى ، لوحظ أن لون الألياف المرنة بني-أسود في الأفراد الأكبر من 80 عامًا ؛ بينما في الأصغر سنًا (من 60 عامًا) يُنظر إليهم على أنهم بني محمر. يتحول السيتوبلازم وهياكل الخلايا الأخرى إلى اللون الأخضر المصفر.
سمح ذلك بتأكيد وجود وحالة الألياف المرنة من حيث التصرف فيها وكميتها وسلامتها. من ناحية أخرى ، تمت الإشارة أيضًا إلى أن الأورسين مفيد جدًا في تحديد تمدد الأوعية الدموية وتشخيص التهاب الشرايين ، من بين حالات أخرى.
أساس
Orcein هو جزء من مجموعة oxazine من الأصباغ ، ويستند التلوين إلى تقاربها مع الحمض النووي. ترتبط الصبغة بالشحنة السالبة لهذا الجزيء ، والتي تمثلها مجموعة الفوسفات. لهذا السبب ، فإن الكروموسومات ملطخة باللون الأرجواني.
ومع ذلك ، فإن باقي هياكل الخلية تأخذ لونًا مختلفًا. على وجه التحديد ، في حالة الألياف المرنة ، يتم تلوينها باللون البني المحمر ، نواة الخلية من الأزرق إلى البنفسجي الداكن ، بينما الكولاجين لا يصبغ.
لهذا السبب ، يستخدم الأورسين لتلوين الكروماتين وتمييز الجنس في بعض أنواع الذباب. وبالمثل ، يمكن تلطيخ النوى وبعض شوائب الكبد الناتجة عن مستضدات التهاب الكبد B.
حلول Orcein لها وظائف محددة في التلوين. يقوم Orcein A بوظيفة تليين أغشية الخلايا ، مما يتسبب في موتها وشل عملية انقسامها. وفي الوقت نفسه ، فإن orcein B مسؤول عن إكمال التلوين من خلال التصاقه بالكروموسومات.
تجهيز
محلول أسيتو أورسين 1٪
لتحضير محلول 1٪ من أسيتو أورسين ، يتم إذابة 2 جرام من الأورسين في 45 مل من حمض الأسيتيك الجليدي ، ويفضل أن يكون ساخنًا ، ويضاف 55 مل من الماء المقطر عند درجة حرارة الغرفة.
بعد ذلك ، يتم خلطه باستمرار لتجانس المحلول ، وتركه يرتاح لاحقًا حتى يبرد. أخيرًا ، يتم تخزينه عند 4 درجات مئوية في مرطبانات داكنة. تم استخدام هذا المستحضر بواسطة Flores 2012 ، لمراقبة مراحل نضوج بويضات البقر.
في هذه الحالة ، على سبيل المثال ، يتم وضع محلول أسيتو-أورسين على الأنسجة المثبتة مسبقًا في حمض الأسيتيك-إيثانول لمدة 24 ساعة. تتم عملية التلوين هذه لمدة 30 دقيقة ويتغير لون النسيج لاحقًا.
وبالمثل ، يمكن استخدامه في تحديد العضيات في الأنسجة متعددة الخلايا. في هذه الحالة ، تلطخ مسحة من الغشاء المخاطي الشدق بقطرة من محلول aceto-orcein ، ويتم وضع ساترة على الشريحة ويمكن ملاحظة نواة الخلية مع بنيتها التحتية على الفور.
محلول لاكتو بروبونيك أورسين 1٪
بالإضافة إلى ذلك ، يمكن تحضير الأورسين بمواد كيميائية أخرى مثل حمض اللاكتيك وحمض البروبيونيك. للقيام بذلك ، يتم إذابة جرام واحد من الأورسين في محلول مخلوط مسبقًا عند درجة حرارة الغرفة 23 مل من حمض اللاكتيك و 23 مل من حمض البروبيونيك ؛ تكوين الحجم بالماء المقطر حتى 100 مل.
مع محلول أورسين اللاكتو-بروبيونيك هذا ، من الممكن ملاحظة المراحل المختلفة للانقسام الانتصافي للخلايا النباتية. في هذه الحالة ، يتم وضع العينة المثبتة مسبقًا والمحللة بالماء لمدة 15 دقيقة في محلول أورسين اللاكتو-بروبيونيك ثم يتم نشر الأنسجة على شرائح المجهر.
في دراسة Duque 2016 على الكروموسومات متعددة الجينات ، استخدم مستحضرًا من 2 جرام من الأورسين المخفف في حمض الأسيتيك و 85٪ حمض اللاكتيك ، مخفف بمحلول حمض الأسيتيك بنسبة 65٪. أخيرًا ، نظر إلى الكروموسومات في الغدد اللعابية من ذبابة الفاكهة السوداء.
Orcein A و Orcein B
من المهم ملاحظة أنه بناءً على العينة وما سيتم تقييمه ، يتم تحضير محلول orcein المناسب. وهكذا ، على سبيل المثال ، يضاف 1N حمض الهيدروكلوريك إلى محلول orcein A لمراقبة الخلايا المنقسمة.
بينما يذوب محلول orcein B في 45٪ حمض أسيتيك. هذه التقنية هي طريقة تلطيخ مختصرة وتستخدم بشكل عام لتكملة تلطيخ الهياكل الكروموسومية.
افكار اخيرة
منذ القرون الماضية ، يمكن العثور على الأشنات مثل Lecanora و Parmelia و Umbilicaria في بلدان القارة الأمريكية مثل الأرجنتين ، والتي تعد مصادر كبيرة للأورسين. كما أن المناطق الأوروبية مثل جزر الكناري كانت في ذلك الوقت منتجة كبيرة للأوركيلا.
تم تصدير هذا إلى مدن أخرى من نفس القارة مثل جنوة ودول مثل إنجلترا ، بينما احتكرت هولندا تصنيع عباد الشمس من الأوركيلا. لذلك ، تم تقليل هذا الحزاز لاحقًا حتى كان على وشك الانقراض.
أدى ذلك إلى استبدال السحلية بنباتات أخرى ذات خصائص صبغية. ومع ذلك ، فإن ظهور الأصباغ الاصطناعية ساهم في إنهاء التجارة في هذا الحزاز المصدر أورسين.
كان هذا ممكنًا بفضل Cocq ، الذي وصف في عام 1812 تخليق الأورسين ، مع العلم أنه يتم تصنيعه بواسطة مركب فينولي يسمى أورسينول. ومع ذلك ، على الرغم من ذلك ، لا يزال الأورسين الطبيعي هو المفضل اليوم.
قد يكون هذا بسبب أن الأورسينول مركب قوي الرائحة للغاية ، ويمكن أن يؤدي تعرضه لفترة طويلة إلى مخاطر صحية ، مثل فقدان القدرة على اكتشاف الروائح. يمكن أن تنتقل هذه الأضرار التي تصيب الغدة النخامية من مؤقتة إلى دائمة كلما زاد التعرض.
المراجع
- Ortega L، García R، Morales C. «تطبيق اللاكاز الذي تنتجه الفطريات لتحلل الأصباغ الميكروبيولوجية (الأورسين والبنفسج الكريستالي).» الشباب في العلوم 2. 2015 ؛ 633-637. متاح على: jovenesenlaciencia.ugto.mx.
- أورثينا باركات والألياف المرنة. الطب (بوينس آيرس) 2003 ؛ 63: 453-456. متاح على: Medicinabuenosaires.com.
- Silva J ، Rojas M ، Araya C ، Villagra F. الخصائص النسيجية لبشرة الوجه الطائر للإبهام لدى الأفراد التشيليين الذين يعانون من تلاشي Dactylogram. مورفول. 2017 ؛ 35 (3): 1107-1113. متاح على: scielo.conicyt.
- Orrillo M، Merideth B. "البيولوجيا التناسلية للبطاطس وعلم الوراثة الخلوية." المركز الدولي للبطاطس (CIP). دليل تقني. متاح على: research.cip.cgiar.org/
- Flores F. «جمع وثقافة ونضوج بويضات الأبقار (bos taurus) في المرتفعات البوليفية.". الجامعة الوطنية في ألتيبلانو ، بونو بيرو ؛ 2012 متاح على: repositorio.unap.edu.pe.
- Duque C. الكروموسومات متعددة الخطوط: نظرة على ظاهرة التضاعف الداخلي. جامعة كولومبيا الوطنية ، ميديلين ؛ 2016. متاح في: edu.
- Camarena F. البيولوجيا الخلوية والجزيئية. دليل الممارسة. جامعة باجا كاليفورنيا المستقلة. 2017 متاح على: pez.ens.uabc.mx.
- منظمة الأغذية والزراعة / الوكالة الدولية للطاقة الذرية. 2018. دليل التفريق بين ذبابة Anastrepha ludens (Loew) البرية والمرباة من السلالة العادية ("ثنائية الجنس") والسلالة وراثياً (Tapachula-7) ، المشععة وغير المشعة. Guillen Aguilar JC و López Muñoz L و López Villalobos EF و Soto García DN منظمة الأغذية والزراعة للأمم المتحدة. روما ، إيطاليا ، 95 صفحة.
- أورسين. (2018 ، 30 نوفمبر). ويكيبيديا، الموسوعة الحرة. تاريخ الاستشارة: 03:38 ، 31 يوليو 2019 ، es.wikipedia.org.
- ميرك ميليبور. (2018 ، 16 يوليو). الفحص المجهري Orcein لمجهر معين. متاح على: merckmillipore.com