الاختبارات المتقاطعة: ما الغرض منها ، التقنية ، الأساس المنطقي ، المراحل - الدواء - 2025

و Crossmatch هي تجري عددا من الدراسات المخبرية لتحديد ما إذا كانت منتجات الدم من متبرع (أساسا الدم الكامل وكروي معبأة) متوافقة مع دم المتلقي.

إنه اختبار تكميلي إضافي لتوافق ABO وعامل Rh. سبب المطابقة هو أنه في بعض الأحيان قد يكون لدى شخصين (متبرع - متلقي) نفس مجموعة ABO و Rh ولكن دمهم لا يزال غير متوافق.

المصدر: unsplash.com

يرجع هذا عدم التوافق إلى وجود أجسام مضادة ضد سلسلة من بروتينات خلايا الدم الحمراء المعروفة باسم المستضدات الثانوية. لا يتم اختبار هذه المستضدات بشكل روتيني كما هو الحال بالنسبة لفصيلة الدم (ABO) وعامل Rh.

هذا لأن المستضدات الصغرى أقل تواترًا ولها تعبير متغير في كل فرد ، لذلك من المستحيل تقريبًا تجميعها في فئات كما هو الحال مع المجموعة وعامل Rh.

بدلاً من ذلك ، يتم خلط خلايا الدم الحمراء للمتبرع مع مصل المريض (اختبار المطابقة الرئيسي) وخلايا الدم الحمراء للمريض مع مصل المتبرع (اختبار المطابقة الثانوية) للكشف عن وجود تفاعلات المستضد والأجسام المضادة.

عندما تكون هناك أجسام مضادة لمستضدات طفيفة ، إما في مصل المريض أو مصل المتبرع ، يُقال أن الاختبار إيجابي ، لذلك في معظم الحالات لا يمكن نقل وحدة معينة من الدم.

مجموعة ABO

لفهم ما هي ردود الفعل المتصالبة تمامًا ، تحتاج أولاً إلى معرفة أساسيات فصائل الدم.

بهذا المعنى ، فإن أهم شيء هو معرفة أنه يمكن تصنيف الدم إلى أربع مجموعات: A و B و AB و O.

تعبر كل مجموعة من هذه المجموعات على سطح خلايا الدم الحمراء عن بروتين معين (مستضد) ، والذي يتم تحديده كعنصر غريب بواسطة الأجسام المضادة لمستقبل محتمل لمجموعة مختلفة.

الشيء الأكثر لفتًا للانتباه في تفاعلات المستضد والأجسام المضادة في مطابقة الدم هو أنه لا يلزم التعرض المسبق للمستضد من أجل وجود الأجسام المضادة. يُعرف هذا باسم الأجسام المضادة الطبيعية.

الأجسام المضادة الطبيعية

بشكل عام ، لكي توجد الأجسام المضادة في جسم الفرد ، من الضروري أن تكون خلايا الدم البيضاء للفرد قد تعرضت مسبقًا للمستضد.

هذا يعني أنه في أول اتصال بين المستضد الأجنبي والكائن الحي ، لا توجد أجسام مضادة ، حيث يتم تكوينها لاحقًا ، بعد الاتصال الأولي. لذلك ، من المستحيل أن يمتلك الجهاز المناعي أجسامًا مضادة ضد فيروس معين على سبيل المثال ، إذا لم يكن قد تعرض له في الماضي.

الاستثناء الوحيد لما سبق هو مضادات AB. في هذه الحالات ، يكون لدى الشخص أجسام مضادة ضد المستضد لا تمتلكها خلايا الدم الحمراء ، على الرغم من أنها لم تتلامس أبدًا مع خلايا الدم الحمراء لشخص آخر. يُعرف هذا باسم الأجسام المضادة الطبيعية.

المستضدات والأجسام المضادة المتعلقة بفصيلة الدم

يتم تحديد فصائل الدم في حالة نظام ABO من خلال وجود مستضدات محددة (A أو B) على غشاء خلايا الدم الحمراء ، وعلى النقيض من ذلك ، توجد أجسام مضادة ضد المستضد الغائب على غشاء كرات الدم الحمراء.

وهكذا ، فإن الشخص الذي يحمل فصيلة الدم A يعبر عن المستضد A على سطح خلايا الدم الحمراء ، بينما توجد أجسام مضادة لـ B في المصل.

على العكس من ذلك ، في مرضى المجموعة ب ، تم العثور على مستضد B بينما تكون الأجسام المضادة مضادة لـ A.

الآن ، المرضى الذين يعانون من الدم AB لديهم مستضدات A و B. لذلك ، لا توجد أجسام مضادة لأن القيام بذلك من شأنه تدمير خلايا الدم الحمراء لهذا الشخص.

يحدث العكس تمامًا في المجموعة O ، حيث لا يظهر غشاء كرات الدم الحمراء أيًا من المستضدين (لا A ولا B) ، بينما يوجد في المصل أجسام مضادة لـ A و B.

عدم توافق مجموعة ABO

مما سبق ، يمكن استنتاج توافق فصائل الدم ABO بسهولة ، لأنه من خلال معرفة مستضد غشاء كرات الدم الحمراء ، تُعرف الأجسام المضادة في المصل تلقائيًا. لهذا السبب:

- Blood A متوافق مع المجموعة A والمجموعة O.

- فصيلة الدم B متوافقة مع الدم B و O.

- يمكن للأشخاص الذين يعانون من المجموعة O تلقي الدم O فقط (لأن لديهم أجسامًا مضادة لـ A و B) ، على الرغم من أن دمهم يتم استقباله من قبل جميع المجموعات الأخرى دون مشاكل لأنه يفتقر إلى المستضدات.

- أخيرا. يمكن لأولئك الذين لديهم فصيلة الدم AB تلقي الدم من جميع المجموعات الأخرى (A ، B ، O وبالطبع AB) ، نظرًا لعدم وجود أجسام مضادة ضد أي من المستضدات. ومع ذلك ، يمكن فقط للأشخاص في المجموعة AB تلقي الدم AB ، حيث أن جميع المجموعات الأخرى لديها أجسام مضادة من شأنها تدمير خلايا الدم الحمراء هذه.

مستضدات طفيفة

كما هو الحال مع مجموعات ABO ، يمكن العثور على سلسلة من البروتينات على سطح خلايا الدم الحمراء التي تعمل كمستضدات بنفس طريقة مستضدات مجموعة ABO.

ومع ذلك ، فإن هذه المستضدات غير موجودة في جميع الأفراد. مزيجهم غير متجانس والاختراق (مستوى التعبير البروتيني) متغير ، وبالتالي فإن التصنيف إلى مجموعات مثل تلك الموجودة لـ ABO و Rh أمر مستحيل. هذا هو المكان الذي اشتق منه اسمه من "المستضدات الصغرى" ، والمعروفة أيضًا باسم "المستضدات منخفضة الحدوث".

على الرغم من عدم تكرارها ، فقد تكون هناك أجسام مضادة طبيعية ضد المستضدات الصغرى. من بينها الأكثر شيوعًا لويس و MNSs و anti N و Kell و Duffy و anti Fyb و Kidd. كلهم مسؤولون عن تفاعلات انحلال الدم وما بعد نقل الدم.

بالإضافة إلى ذلك ، قد تكون هناك حالة تحسيس ضد المستضدات الصغرى عن طريق الاتصال السابق ، إما مع البروتينات المستضدية المذكورة بسبب عمليات نقل الدم السابقة أو بسبب المناعة المتقاطعة.

عبر الحصانة

يقال أن هناك مناعة متصالبة عندما يكون مستضدان من مصدرين مختلفين (على سبيل المثال خلية دم حمراء وبكتيريا) متشابهين للغاية ، لدرجة أن الأجسام المضادة ضد أحد هذه البروتينات المستضدية تتفاعل أيضًا مع الآخر لأنها متطابقة تقريبًا.

لفهم هذا بشكل أفضل ، خذ المثال الافتراضي السابق (مستضدات من خلية دم حمراء وبكتيريا). في كلتا الحالتين لا توجد أجسام مضادة طبيعية ، ولكن إذا تعرض الشخص للبكتيريا ، فسوف ينتج عنه أجسام مضادة ضده.

ستتفاعل هذه الأجسام المضادة لاحقًا ضد خلايا الدم الحمراء إذا كانت مستضداتها مشابهة جدًا لتلك الموجودة في البكتيريا التي تسببت في تكوين الأجسام المضادة.

إذا حدث هذا ، لا يمكن إعطاء خلايا الدم الحمراء التي تحتوي على هذا البروتين المستضد إلى الشخص الذي لديه الأجسام المضادة ، حيث سيكون هناك رفض. هنا تكمن أهمية ردود الفعل المتصالبة.

ما هو المطابقة؟

نظرًا لأنه من المستحيل تجميع دم أفراد مختلفين بناءً على المستضدات الصغرى ، فإن الطريقة الوحيدة لمعرفة ما إذا كانت هناك أجسام مضادة ضد المستضدات الصغرى لخلايا الدم الحمراء لشخص آخر في دم شخص واحد هي من خلال التطابق..

في الحالات التي توجد فيها أجسام مضادة ، يتم تحفيز تفاعل انحلال الدم أو التراص ، وهذا هو سبب استنتاج أن التفاعل كان إيجابيًا ؛ أي أن هناك أجسامًا مضادة ضد المستضدات الصغيرة (على الرغم من عدم معرفة أي منها بالضبط). وإلا فإن الاختبار سلبي.

أساس

تعتمد المطابقات المتقاطعة على تفاعل الجسم المضاد للمستضد. لذلك ، من الممكن اكتشاف ما إذا كانت هناك أجسام مضادة في مصل المستلم ضد مستضدات خلايا الدم الحمراء للمتبرع (أو العكس) ، مما يؤدي إلى تفاعل مستضد - جسم مضاد.

في حالة عدم وجود أجسام مضادة ، لا يحدث أي تفاعل ويتم الإبلاغ عن نتيجة سلبية للاختبار. على العكس من ذلك ، إذا كان التفاعل إيجابيًا (هناك انحلال دموي أو تراص أثناء الاختبار) ، فيمكن الاستنتاج أن الأجسام المضادة موجودة.

في هذا الصدد ، من المهم ملاحظة أنه قد تكون هناك أجسام مضادة ضد خلايا الدم الحمراء في كل من مصل المتبرع والمتلقي. هذا هو سبب وجود نوعين من ردود الفعل المتصالبة.

أنواع التفاعلات المتصالبة

قد توجد أجسام مضادة ضد كريات الدم الحمراء المانحة في مصل المريض ؛ ولكن يمكن أن يحدث العكس أيضًا ، أي أجسامًا مضادة في مصل المتبرع ضد خلايا الدم الحمراء للمريض.

هذا هو سبب وجود نوعين من المطابقة المتقاطعة:

- مباراة رئيسية.

- تطابق بسيط.

يتم إجراء كلا النوعين بشكل روتيني في بنك الدم قبل نقل منتجات الدم ، لأنه إذا كان أي من الاختبارات إيجابية ، فهناك مخاطر عالية لتفاعلات نقل الدم التي يمكن أن تعرض حياة المريض للخطر.

مباراة رئيسية

يقيس هذا الاختبار ما إذا كان مصل المستلم يحتوي على أجسام مضادة لخلايا الدم الحمراء للمتبرع.

إذا حدث هذا ، لا يمكن إعطاء منتجات الدم ، حيث أن كمية كبيرة من الأجسام المضادة الموجودة في بلازما المريض ستدمر خلايا الدم الحمراء للمتبرع بسرعة كبيرة ، مما ينتج عنه تفاعلات كارثية في جسم المتلقي في هذه العملية. ردود الفعل هذه شديدة لدرجة أنها يمكن أن تكون مهددة للحياة.

تطابق بسيط

في هذه الحالة ، يتم تحديد ما إذا كانت هناك أجسام مضادة لخلايا الدم الحمراء للمتلقي في مصل المتبرع.

إذا كان الأمر كذلك ، ستبدأ الأجسام المضادة في تدمير كريات الدم الحمراء للمتلقي. ومع ذلك ، نظرًا لأن كمية الأجسام المضادة محدودة ، يكون التفاعل أقل حدة ؛ على الرغم من أنها لا تزال خطيرة.

المراحل

يتم تقسيم كل من المطابقة الرئيسية والثانوية إلى ثلاث مراحل:

- محلول ملحي.

- حراري أو حضانة.

- كومبس.

في المرحلة الأولى ، يتم خلط خلايا الدم الحمراء والمصل في محلول ملحي. بعد ذلك ، يضاف الألبومين ، وتحضن العينة عند 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة لتنتقل أخيرًا إلى مرحلة كومبس.

تقنية

تقنية المطابقة المتصالبة بسيطة نسبيًا ، حيث تتضمن إضافة خلايا الدم الحمراء للمتبرع إلى مصل المريض (تطابق رئيسي) وكذلك كريات الدم الحمراء المتلقية إلى مصل المتبرع (تطابق بسيط).

من أجل إحداث تفاعل الجسم المضاد للمستضد في وقت قصير نسبيًا ، يجب اتباع سلسلة من الخطوات المعيارية. يتم تلخيص هذه الخطوات بطريقة مبسطة أدناه.

من المهم ملاحظة أن القسم التالي يصف اختبار التوافق الرئيسي ، على الرغم من أن الخطوات هي نفسها لاختبار التوافق البسيط ، ولكن مع تبادل أصل خلايا الدم الحمراء والمصل.

المرحلة الملحية

- يضاف إلى أنبوب الاختبار قطرتان من المصل من المتلقي (من المتبرع إذا كان التطابق البسيط).

- أخذ عينة من خلايا الدم الحمراء من المتبرع (من المتلقي إذا كان التطابق البسيط).

- اغسل وطرد كريات الدم الحمراء.

- أعاده التعليق بمحلول بين 3٪ و 5٪.

- ضع قطرة من هذا المحلول في الأنبوب الذي يحتوي على مصل المستلم.

- تخلط بلطف.

- جهاز الطرد المركزي.

- اقرأ النتيجة في مصباح العرض.

المرحلة الحرارية

- أضف قطرتين من الزلال 22٪ إلى الأنبوب حيث اكتملت المرحلة الملحية.

- يحضن على حرارة 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة.

- جهاز طرد مركزي لمدة 15 ثانية.

- اقرأ النتيجة في مصباح العرض.

مرحلة كومبس

- خذ الخلايا من الأنبوب واغسلها بمحلول ملحي.

- القضاء على المادة طافية.

- أضف قطرتين من كاشف كومبس.

- تخلط بلطف.

- جهاز طرد مركزي لمدة 15 إلى 30 ثانية.

- إعادة تعليق الخلايا وتقييمها في مصباح الرؤية من أجل التراص أو انحلال الدم.

إذا كان هناك تراص أو انحلال دم في أي من المراحل ، فإن النتيجة تعتبر إيجابية.

المراجع

1. Hall ، TC ، Pattenden ، C. ، Hollobone ، C. ، Pollard ، C. ، & Dennison ، AR (2013). سياسات نقل الدم في الجراحة العامة الاختيارية: كيفية تحسين نسب التطابق إلى نقل الدم. طب نقل الدم والعلاج بالدم ، 40 (1) ، 27-31.
2. Silvergleid ، AJ ، Wells ، RF ، Hafleigh ، EB ، Korn ، G. ، Kellner ، JJ ، & Grumet ، FC (1978). اختبار التوافق باستخدام 51 كروموم - خلايا الدم الحمراء المسمى بالكروم في المرضى الموجبة التصالب. نقل الدم ، 18 (1) ، 8-14.
3. كولكارني ، ن. ، علي ، م ، هاري ، بي إن ، جوزيف ، أ. ، مسعود ، أ. (2006). نظام المطابقة الإلكترونية. هل المطابقة الروتينية قبل الجراحة للدم لاستئصال القولون والمستقيم مطلوبة بعد الآن؟ التنظير ، 38 (11) ، Poster_50.
4. Heal ، JM ، Blumberg ، N. ، & Masel ، D. (1987). تقييم المطابقة المتصالبة و HLA و ABO لعمليات نقل الصفائح الدموية للمرضى المقاومين للحرارة. الدم ، 70 (1) ، 23-30.
5. أرسلان ، Ö. (2006). المطابقة الإلكترونية. مراجعات طب نقل الدم، 20 (1) ، 75-79.
6. Wu، KK، Hoak، JC، Koepke، JA، & Thompson، JS (1977). اختيار المتبرعين المتوافقين مع الصفائح الدموية: تقييم مستقبلي لثلاث تقنيات مطابقة مشتركة. نقل الدم، 17 (6) ، 638-643.
7. Schonewille ، H. ، Zijl ، AMV ، & Wijermans ، PW (2003). أهمية الأجسام المضادة ضد مستضدات كرات الدم الحمراء منخفضة الحدوث في المطابقة التصالبية الكاملة والمختصرة. نقل الدم، 43 (7) ، 939-944.