Rose Bengal هو اختبار معملي يعتمد على تفاعل مستضد - مضاد لتشخيص داء البروسيلات. تسمح هذه التقنية باكتشاف أجسام مضادة معينة ضد بكتيريا البروسيلا أبورتس في عينات مصل الدم البشري. يمكن الإبلاغ عن النتيجة نوعيًا أو شبه كمي.
يوضح الشكل النوعي ما إذا كان المريض إيجابيًا أم سلبيًا للاختبار ، أي ما إذا كانت هناك أجسام مضادة أم لا. وفي الوقت نفسه ، يتم الإبلاغ عن التقرير شبه الكمي بوحدة IU / ml ويشير إلى الكمية التقريبية للأجسام المضادة الموجودة. وتجدر الإشارة إلى أنه لن يتم إنتاج الأجسام المضادة إلا إذا كان المريض على اتصال مع الكائنات الحية الدقيقة.
تفاعل روز بنغال في صفيحة تراص. المصدر: مأخوذ من الفيديو
نظرًا لبساطته الكبيرة وحساسيته العالية وخصوصياته ، فهو أحد تقنيات التراص المصلي الأكثر استخدامًا في الطب كاختبار أولي لتشخيص هذا المرض.
قارن بعض الباحثين فعالية اختبار Rose Bengal بتقنيات أخرى ، مثل التراص المصلي (مستضدات الحمى) ولاحظوا أنه على الرغم من وجود ارتباط جيد ، فقد رأوا حالات معزولة كان فيها اختبار مستضد الحمى سالبًا وكان Rose de توهج إيجابي.
يرجع الاختلاف الذي تم الحصول عليه إلى حقيقة أن هؤلاء المرضى لديهم فئة فرعية من الأجسام المضادة IgG ضد البروسيلا أبورتس مع قدرة ارتباط أفضل عند درجة الحموضة الحمضية ، وبالتالي يمكنهم التفاعل مع كاشف Rose Bengal ولكن ليس مع مستضدات الحمى.
وبهذا المعنى ، فقد اقترحوا تعديل كواشف تقنية مستضد الحمى إلى درجة حموضة حمضية حتى يتمكنوا من اكتشاف هذا النوع من الحالات.
أساس
يتكون كاشف روز البنغال من معلق مستضد. وتتكون من سلالة البروسيلا أبورتس S99 المخففة في محلول لاكتات حمضي (درجة الحموضة 3.6) ، بالإضافة إلى الفينول وصبغة روز البنغال.
لذلك ، في العينة ما يتم البحث عنه هو الأجسام المضادة لمقاومة البروسيلا ، إذا كانت موجودة فسوف تتفاعل مع مستضد الكاشف وسيتم ملاحظة تفاعل تراص مرئي ظاهريًا. يكتشف الاختبار الأجسام المضادة IgM أو الأجسام المضادة IgG.
هذا يعني أنه يمكن الكشف عن المرض سواء في مرحلته الحادة حيث تسود الأجسام المضادة IgM أو في مرحلته المزمنة حيث تسود الأجسام المضادة IgG.
يمثل هذا ميزة لأنه يزيد من حساسية الاختبار ، ولكنه في نفس الوقت يعتبر عيبًا لأنه لا يميز بين مرحلة وأخرى ، لأن التفاعل مع الأجسام المضادة IgM و IgG متطابقان.
يجب إجراء الاختبار دائمًا جنبًا إلى جنب مع تحكم سلبي وعنصر تحكم إيجابي. يحتوي الضبط السلبي على مصل حيواني بدون أجسام مضادة والتحكم الإيجابي يحتوي على مصل من أصل حيواني مع 50 وحدة دولية / مل من الأجسام المضادة لمضادات البروسيلا.
استعمال
الحمى المالطية مرض خطير يميل إلى أن يكون مزمنًا وخطيرًا ، لذلك من المهم جدًا أن يتم تشخيصه مبكرًا. إنه مرض حيواني المصدر ويمكن أن يصاب البشر بالعدوى عن طريق الاتصال المباشر بمواد ملوثة ، والأشخاص الأكثر عرضة للخطر هم الأطباء البيطريون والقائمون على رعاية الحيوانات.
يمكن أن تحدث العدوى أيضًا عن طريق تناول اللحوم النيئة المصابة ، من بين أشكال العدوى الأخرى.
يهاجم هذا المرض محليا أو نظاميا. الشكل الجهازي هو الأكثر خطورة ، حيث يمكن أن تتأثر أعضاء مختلفة ، بما في ذلك الجهاز البطاني الشبكي (الكبد والطحال ونخاع العظام) والجلد (التهاب النسيج الخلوي وتضخم العقد اللمفية) والجهاز التنفسي (الالتهاب الرئوي) والجهاز العضلي الهيكلي (التهاب المفاصل ، التهاب المفصل العجزي الحرقفي والتهاب الفقار) ، من بين أمور أخرى.
يعد اختبار Rose Bengal طريقة مفيدة جدًا لإجراء الفحص الأولي ، لأنه غير مكلف للغاية ، وسهل الاستخدام ، وله خصوصية وحساسية كبيرتان.
حالات السلبيات الكاذبة والإيجابيات الكاذبة نادرة جدًا ، ويمكن أن تحدث عند الأشخاص الذين يعانون من انخفاض عيار الأجسام المضادة (<25 وحدة دولية / مل) أو مرتفع للغاية (> 1000 وحدة دولية / مل) على التوالي.
معالجة
المواد
-روز البنغال كيت
- لوحة تراص خلفية بيضاء
-50 ميكرولتر ماصة
-Rotator (اختياري)
-دوامة
تقنية (طريقة نوعية)
تأتي مجموعات Rose Bengal التجارية مع كواشف جاهزة للاستخدام.
-تدبير الكواشف قبل البدء في العمل.
- لوحات التراص لها دوائر مرسومة كل واحدة لعينة مختلفة. استخدم 3 دوائر ، الأولى للتحكم السلبي ، والثانية للعينة ، والثالثة للتحكم الموجب.
- ضع قطرة أو 50 ميكرولتر من عناصر التحكم والعينة في الدائرة المقابلة.
- اخلطي كاشف زهرة البنغال باستخدام دوامة. ضع قطرة بجانب تلك الموضوعة مسبقًا.
- امزج مع أعواد أسنان خشبية (استخدم واحدة لكل عينة أو مجموعة تحكم). قم بعمل حركات دائرية وانتشر بحيث تغطي الدائرة بأكملها.
المصدر: صور مأخوذة من الفيديو: https://youtu.be/igAVQ-GiyGY. تحرير تخطيط الصورة.
- ضع اللوحة على محور دوار تلقائي بسرعة 80 إلى 100 دورة في الدقيقة أو قم بتدويرها يدويًا لمدة 4 دقائق. اقرأ الدليل في نهاية هذا الوقت.
-تحقق من أن عناصر التحكم أعطيت كما هو متوقع. قارن رد فعل عينة الاختبار مع الضوابط. الإبلاغ عن إيجابية إذا لوحظ تراص وسلبية إذا لم يكن هناك تراص.
يشير الاختبار الإيجابي إلى أن المريض لديه كمية تساوي أو تزيد عن 25 وحدة دولية / مل من الأجسام المضادة لمرض البروسيلا.
تفسير تفاعل إيجابي (مع تراص) وسلبي (بدون تراص). المصدر: سيترولين. تحرير الصورة.
تقنية (شبه كمية)
إذا كانت العينة إيجابية بشدة في التفاعل النوعي ، فيمكن أن تكون شبه كمية. لهذا الغرض ، يتم إجراء التخفيفات المزدوجة التسلسلية للعينة بمحلول ملحي فسيولوجي. يتم تنفيذ الإجراء الموصوف سابقًا مع كل تخفيف.
يتم تفسيره أيضًا من خلال مراقبة التراص ظاهريًا. ستكون النتيجة عيار أعلى تخفيف لوحظ فيه نتيجة إيجابية.
لحساب القيمة التقريبية للأجسام المضادة لمضادات البروسيلا ، يتم استخدام الصيغة التالية:
25 IU / ml x عيار التفاعل = IU / ml
مثال ، إذا كانت نتائج اختبار المريض في الاختبار شبه الكمي إيجابية عند التخفيف و و 1/8 وبدأت في أن تكون سلبية من التخفيف 1/16 وما بعده ، فهذا يعني أن المريض لديه عيار 8.
تطبيق الصيغة:
25 وحدة دولية / مل × 8 = 200 وحدة دولية / مل
سؤال وجواب
-المجموعات لها تاريخ انتهاء صلاحية ويجب احترامها. لا ينبغي استخدامه إذا انتهت صلاحية الكاشف.
- أثناء الاستخدام ، تأكد من أن الكاشف لا يحتوي على جزيئات صلبة ، فهذه علامة على التدهور.
- يحفظ بين 2 و 8 درجات مئوية.
- لا تجمد ، هذا الفعل يضر الكاشف بشكل لا يمكن علاجه.
- قم دائمًا بإجراء الاختبار مع الضوابط السلبية والإيجابية.
- تتسامح هذه التقنية مع عينات المصل بدرجة معينة من الشحوم وانحلال الدم ، ولكن لا يوصى باستخدام الأمصال الدهنية والمتحللة بشكل مفرط ، فكلا الحالتين تغير نتائج الاختبار.
- احضر دائمًا الكواشف إلى درجة حرارة الغرفة قبل بدء التحليل.
- لا تفسر ردود الفعل التي تستغرق وقتًا أطول من الوقت الموصى به ، لأن هذا يولد تقريرًا عن الإيجابيات الخاطئة ، لأنه بعد فترة معينة يترسب الكاشف ، محاكياً رد فعل إيجابي.
- هذه التقنية حساسة 100٪ وخصوصية 98٪.
- بعد التقدير شبه الكمي لـ 1000 وحدة دولية / مل هناك إمكانية ملاحظة تأثير prozone (سلبي كاذب بسبب زيادة الأجسام المضادة مقارنة بكمية المستضدات).
المراجع
- Rubio M و Barrio B و Díaz R. قيمة اختبارات Rosa de Bengala و Coombs واختبارات الرحلان المناعي الكهربائي لتشخيص حالات داء البروسيلات البشري التي يكون فيها تراص المصل سلبيًا. قسم الأحياء الدقيقة. خدمة علم الأحياء الدقيقة السريرية. عيادة الجامعة. جامعة نافارا. 406-407. متاح في: elsevier.es/es-revista-enfermedades-infecciosas
- "داء البروسيلات". ويكيبيديا، الموسوعة الحرة. 6 ديسمبر 2019، 14:37 UTC. 18 ديسمبر 2019، 18:09 en.wikipedia.org.
- مختبرات مونلاب. مونلاب البنغال روز - اختبار. 2016 متاح على: monlab.es/
- كاريلو سي ، غوتوزو إي. الحمى المالطية. القس بيرو. متوسط إكسب. الصحة العامة 1997 ؛ 14 (1): 63-66. متاح على: scielo.org
- Morales-García R، García-Méndez N، Regalado-Jacobo D، López-Merino A، Contreras-Rodríguez A. متابعة سريرية وسلسلة من تفاعل البوليميراز لعائلة مصابة بداء البروسيلات. القس تشيل. إنفيكتول. 2014 ؛ 31 (4): 425-433. متاح على: scielo.conicyt.