أحمر الكونغو: الخصائص والتحضير والتطبيقات - مادة الاحياء - 2026

و أحمر الكونغو هو صبغة آزو للبروتينات التي شكلتها اقتران الملح الديازونيوم وخاتم العطرية الفعالة. هذه المادة قادرة على امتصاص الإشعاع الكهرومغناطيسي في الطيف المرئي ، ولهذا السبب لها لون كثيف.

مشحون سلبيا. لذلك ، لديه تقارب للمكونات الخلوية موجبة الشحنة ، مثل بعض المواد البروتينية. يختلف لونه باختلاف الرقم الهيدروجيني. بهذا المعنى ، إذا كان الوسط حمضيًا (<من pH3) ، يكون اللون أزرقًا كثيفًا. بين الرقم الهيدروجيني 3 - الرقم الهيدروجيني 5.2 هو فوشيا (منطقة تحول) ، ومع> درجة الحموضة 5.2 يكون اللون أحمر غامق.

مجففة الكونغو الأحمر والكونغو الحل الغرواني الأحمر. المصدر: Pixinio.com و Wikipedia.com

إنها مادة متعددة الاستخدامات للغاية ، حيث لها استخدامات متعددة. تم استخدامه كملون في صناعة النسيج وكذلك للخلايا والأقمشة.

أيضا لجعل وسائط الثقافة التي تقيس العمل الأنزيمي ، كمؤشر الأس الهيدروجيني ، كمادة تحكم في تقييم الأداء السليم لمقاييس الطيف الضوئي ، في دراسة تكوين الأغشية الحيوية ، أو في تشخيص الأميلويد.

وبالمثل ، فقد أتاح التمييز بين الأنماط المصلية البكتيرية والفطرية من خلال تحديد هياكل معينة في جدارها (عديدات السكاريد الدهنية).

خصائص أحمر الكونغو

تم اكتشاف هذه المادة بواسطة Böttiger في عام 1884. وهي مشتق من الديازونيوم يتكون من حمض bis-diazoic للبنزيدين مع حمض النفثيونيك. يقيس جزيء الكونغو الأحمر 21 Armstrong ويبلغ الوزن الجزيئي حوالي 8000 جم / مول.

يتميز أحمر الكونغو بأنه قابل للذوبان في الماء ، وأكثر من ذلك في المذيبات العضوية مثل الإيثانول ، مما يشكل محلولًا غروانيًا.

له انجذاب للسليلوز والأنسجة الأميلويد والمكونات الخلوية موجبة الشحنة.

تجهيز

يتم تحضير الكونغو الأحمر بتركيزات مختلفة اعتمادًا على التقنية المستخدمة. يستخدم معظمهم أحمر الكونغو بنسبة 1٪ ، 2٪ ، 0.1٪ ، من بين أمور أخرى.

على سبيل المثال ، لتحضير 2٪ أحمر كونغو ، يجب وزن 2 جرام من ألوان الطعام المجففة وإضافة 100 مل من الماء المقطر. ثم يتم حفظها في زجاجة العنبر.

التطبيقات

كمادة تلوين في صناعة النسيج

لفترة من الوقت كان يستخدم على نطاق واسع في صناعة النسيج بسبب تثبيته على القطن ، لكنه في الوقت الحالي غير مستخدم لأنه مادة مسرطنة وأيضًا لأن اللون غير مستقر ، فقد تغير لونه بسبب الاحتكاك.

تحديد قدرة تكوين البيوفيلم

وقد ثبت أن قدرة الكائنات الحية الدقيقة على تكوين الأغشية الحيوية هي عامل ضراوة.

بهذا المعنى ، يتم استخدام صبغة الكونغو الحمراء كطريقة لتحديد تكوين البيوفيلم. يرتبط أحمر الكونغو بالسكريات الخارجية الموجودة في الأغشية الحيوية. ومع ذلك ، بالمقارنة مع الطرق الأخرى ، فهو الأقل موصى به بسبب ارتفاع عدد السلبيات الخاطئة التي تحدث.

تستخدم الطريقة أجار الكونغو الأحمر ، ويتكون من أجار الدم كقاعدة ، والجلوكوز (10 جم / لتر) وصبغة الكونغو الحمراء (0.4 جم / لتر). يتم بذر السلالات المراد تقييمها في الوسط وتحضينها لمدة 24 ساعة عند 37 درجة مئوية ، وبعد ذلك تحضين لمدة 48 ساعة في درجة حرارة الغرفة.

يتم إثبات الاختبار الإيجابي إذا لوحظت المستعمرات البلورية ذات اللون الأسود والمظهر الجاف.

مراقبة جودة أجهزة الطيف الضوئي

لتقييم ما إذا كانت معدات قياس الامتصاص أو المعاملة تتوافق مع المعلمات الضوئية التي تحددها اللوائح الدولية ، يمكن استخدام تقنية بسيطة لتحديد ما إذا كانت المعدات تصدر نتائج ضمن نطاقات القبول.

إحدى تقنيات التقييم هي استخدام أحمر الكونغو ، بناءً على النقطة المتساوية.

النقطة المتساوية هي الطول الموجي الذي ينبعث عنده أحمر الكونغو نفس الامتصاصية بغض النظر عن الرقم الهيدروجيني والتركيز ودرجة الحرارة. قيمة الامتصاصية ثابتة ويمكن استخدامها كمرجع.

من المعروف أن النقطة النظرية المتساوية لأحمر الكونغو هي 541 نانومتر. إذا كانت القيمة التي تم الحصول عليها مختلفة ، فمن المعروف أن الجهاز يعاني من مشاكل انجراف الطول الموجي ، ويحتاج إلى فحصه بواسطة فني متخصص.

إعداد الإعلام الثقافي

أورتيز وزملاؤه وصف وسط زراعة محضر من صبغة الكونغو الحمراء وكربوكسي ميثيل سلولوز يسمى أجار CMC ، من أجل الكشف عن السلالات الميكروبية للسيلوليت ؛ وهذا هو ، منتجي السليلاز (endogluconeses ، exoglucanases و ß-glucosidase).

هذا الوسط له لون مكثف. سوف يتبدد اللون بفعل عمل إنزيم الإندوغلوكاناز الذي يكسر بنية كربوكسي ميثيل سلولوز. هذا يشير إلى رد فعل إيجابي.

يسمح الانخفاض في اللزوجة والامتصاص بقياس نشاط الإنزيم. على سبيل المثال ، في سلالات Streptomyces sp.

تحديد الكائنات الحية الدقيقة

أحمر الكونغو له تقارب لهياكل عديد السكاريد لسلالات معينة ، وبالتالي تحقيق تحديد هذه الكائنات الدقيقة. من بينها Escherichia coli و Shigella flexneri.

تُستخدم أيضًا لوحات أجار الكونغو الأحمر للحصول على مستعمرات مميزة ، كما هو الحال مع Azospirillum sp ، الذي يعطي مستعمرات حمراء قرمزية ، من بين أمور أخرى.

بقعة الخلايا والأنسجة

أحد أكثر التطبيقات شيوعًا للون الأحمر هو فائدته في تشخيص الداء النشواني. يتكون هذا المرض الغريب من تراكم بروتين غير طبيعي في أعضاء مختلفة خارج الخلية. يتكون هذا البروتين غير الطبيعي في نخاع العظام ويسمى أميلويد.

أحمر الكونغو لديه انجذاب كبير لهذه المادة. تم استخدام هذه الخاصية لإظهار وجودها في أقسام الأنسجة النسيجية. يستخدم الكونغو الأحمر مع الهيماتوكسيلين / يوزين لهذا الغرض.

يحدث اتحاد أنسجة الأميلويد وأحمر الكونغو من خلال روابط هيدروجينية غير قطبية ، بين مجموعات الكربوكسيل والمجموعة الأمينية. يوفر بروتين Amyloid مجموعات الكربوكسيل (COOH) ومجموعة الأحمر الكونغو الأمينية.

يتم تلوين نسيج الأميلويد بألوان مختلفة تتراوح من الوردي إلى الأحمر الغامق عند رؤيته تحت المجهر الضوئي. في المجاهر ذات الضوء المستقطب بشكل مزدوج ، لوحظت هذه المستحضرات مع انكسار التفاح الأخضر الممرض.

أي أنها تقدم ثنائية اللون ، حيث أن الألياف النشوية متباينة الخواص. هذه الملاحظة تؤكد التشخيص.

تلطيخ الأنسجة باللون الأحمر الكونغولي متوافق مع منهجيات التشخيص الأخرى ، مثل الطرق الكيميائية الخلوية المناعية ، ويمكن حتى إعادة تلوينها.

كمؤشر pH

يتم استخدام خاصية الانقلاب على التغيرات في الأس الهيدروجيني بواسطة تقنية تسمى تنظير الكروموسومات.

تستخدم هذه التقنية الملونات ومؤشرات الأس الهيدروجيني التي تسمح باكتشاف بعض الأمراض. من بينها استخدام أحمر الكونغو ، الذي يمكن أن يكشف عن بؤر السرطان المبكرة في الغشاء المخاطي في المعدة ، حيث يتم استخدامه كعلامة على الحموضة.

تعتمد هذه التقنية على حقيقة أن أحمر الكونغو عند درجة الحموضة الحمضية أسود. لذلك ، بعد وضع محلول أحمر الكونغو على الغشاء المخاطي في المعدة ، سيتم اختيار المناطق التي يوجد بها شحوب لأخذ عينة للخزعة ، أي حيث لا يوجد إنتاج حمض. يشير هذا إلى وجود تركيز سرطاني أو فقدان الخلايا الجدارية.

المراجع

1. "الكونغو الأحمر". ويكيبيديا، الموسوعة الحرة. 8 مايو 2019، 12:13 UTC. 16 مايو 2019، 04:08، es.wikipedia.org.
2. Ortiz M، Uribe D. طريقة جديدة لتقدير نشاط endoglucanase على أساس مركب السليلوز-الكونغو الأحمر. Orinoquia. 2011 يونيو ؛ 15 (1): 7-15. متاح من: scielo.org.
3. Peña J، Uffo O. إنتاج البيوفيلم في الأنماط الجينية للمكورات العنقودية الذهبية المعزولة من التهاب الضرع البقري في كوبا. القس Salud الرسوم المتحركة.. 2013 ديسمبر ؛ 35 (3): 189-196. متاح في: scielo.s
4. Fich F و Chahuán M و Farías M و Cárdenas C و Abarzúa A و Araya G et al. المظاهر الجلدية للداء النشواني الجهازي كمفتاح تشخيصي: حالة سريرية. القس مسعف. تشيلي. 2012 أبريل ؛ 140 (4): 499-502. متوفر في: scielo.
5. Duymovich C ، Acheme R ، Sesini S ، Mazziotta D. مقاييس الطيف الضوئي ومقاييس ضوئية دليل التحديث العملي. Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana 2005 ، 39 (سبتمبر-ديسمبر): متاح على: redalyc.org
6. Marín J و Díaz J و Solís J. Chromoendoscopy في عدوى هيليكوباكتر بيلوري: هل حان وقت رد الفعل؟ Rev Esp Enferm Dig 2012 ؛ 104 (1): 1-3
7. Fieser L، Fieser M. 1985. الكيمياء العضوية. افتتاحية Reverté. برشلونة ، أسبانيا. متاح على: books.google.co.ve
8. موريللو M. تقنيات تلطيخ الأنسجة. جامعة جوادالاخارا ، المكسيك. متاح على: Academia.edu
9. Paillié M. تحديد النشاط الخلوي والمحلل للجنين والمحلول النشواني للبكتيريا الشعاعية المعزولة من تربة جذور البرسيم الأبيض (Trifolium repens). 2012. Pontificia Universidad Javeriana كلية العلوم الأحياء الدقيقة الصناعية بوغوتا العاصمة متاح على: repository.javeriana.edu.co
10. Cárdenas، D، Garrido M، Bonilla R، & Baldani V. عزل وتحديد Azospirillum sp. على عشب غينيا (Panicum max Jacq.) من وادي سيزار. المراعي والأعلاف ، 2010 ؛ 33 (3): 1-8 متوفر في: scielo.