وسط ستيوارت: الأساس والتحضير والاستخدامات - مادة الاحياء - 2026

و ستيوارت المتوسط هو أجار نصف صلب أو مرق بدون أي من المغذيات، وتستخدم لنقل العينات البيولوجية. والغرض منه هو الحفاظ على السلالات الموجودة في العينة قابلة للحياة لفترة معينة ، ولكن دون زيادة عدد الميكروبات.

تم إنشاؤه بواسطة Moffet و Young و Stuart في عام 1948 وتم تعديله لاحقًا بواسطة Toshach و Patsula. وهو يتألف من جلسرين فوسفات الصوديوم ، ثيوجليكولات الصوديوم ، كلوريد الكالسيوم وأجار أجار. هذا الأخير موجود في الوسط شبه الصلب وغائب في السائل. بعض المختبرات تضيف الميثيلين الأزرق إليها.

Culturette مع نقل ستيوارت. المصدر: بقلم: CDC / د. جيلدا جونز ، بإذن من: مكتبة صور الصحة العامة

يتم استخدامها بشكل عام عندما لا يكون من الممكن زرع العينة على الفور. في هذه الحالة ، يتم وضع العينة في وسيط النقل ، بينما يتم نقلها إلى المختبر الذي سيعالج المزرعة.

وبهذه الطريقة ، يتم ضمان بقاء الكائنات الحية الدقيقة على قيد الحياة حتى يتم تلقيحها في وسائط الثقافة المقابلة.

في البداية ، كان الغرض من استخدامه هو نقل عينات مجرى البول أو المهبل حيث يشتبه في وجود النيسرية البنية. في وقت لاحق ، أدركوا أن فائدته يمكن أن تكون أوسع.

تبين أن وسيط ستيوارت فعال للغاية في الحفاظ على الكائنات الحية الدقيقة القابلة للتغير والحساسية مثل النيسرية السحائية ، والمستدمية النزلية ، والعقدية المقيحة ، والمكورات الرئوية ، والوتدية الخانقة ، والبورديتيلا الشاهقة ، وغيرها. بالإضافة إلى الكائنات الدقيقة الأخرى غير المزعجة مثل Enterobacteria.

يمنع وسيط ستيوارت تجفيف العينة بشكل أساسي ويحافظ على التوازن الاسموزي ويحافظ على الكائنات الحية الدقيقة عند درجة حموضة مثالية. من ناحية أخرى ، من الناحية الاستراتيجية ، لا تحتوي هذه الوسيلة على مغذيات ، وبالتالي تمنع الكائنات الحية الدقيقة من التكاثر.

يوجد في السوق أجهزة نقل عينات خاصة تحتوي على هذه الوسيلة أو غيرها من وسائل النقل ، تسمى الثقافة. يمكن أيضًا تحضيرها في المختبر.

أساس

الغرض من طريقة نقل ستيوارت هو إبقاء العينات قريبة من حالتها الأصلية حتى تتم معالجتها.

جلسرين فوسفات الصوديوم وكلوريد الكالسيوم هو نظام عازلة يعمل عن طريق الحفاظ على الأس الهيدروجيني والأسمولية.

وفي الوقت نفسه ، يعمل ثيوجليكولات الصوديوم كعامل اختزال وفي حالة احتوائه على أجار ، فإنه يمنحه تناسقًا شبه صلب لتأخير أكسجة الوسط. أخيرًا ، الميثيلين الأزرق هو مؤشر أكسدة ، أي أنه يكتشف وجود الأكسجين.

الوسيط شبه الصلب مع مؤشر الأكسدة والاختزال مثالي لنقل العينات حيث يشتبه في وجود البكتيريا اللاهوائية.

خصائص وسيلة النقل

يفي وسيط ستيوارت ، مثله مثل جميع وسائل النقل ، بخصائص معينة ، بما في ذلك:

- يحافظ على السلالات الميكروبية الحية الموجودة دون أن تتكاثر.

- لا تحتوي على مغذيات ؛ تهدف مركباته إلى الحفاظ على العينة رطبة ، تحت ظروف الأس الهيدروجيني والأسمولية المناسبة.

- يمنع التحلل الذاتي لبعض الكائنات الحية الدقيقة الدقيقة مثل المكورات الرئوية.

-استخدامه مؤقت ولا يجب أن يطول لفترة طويلة.

تجهيز

وسط ستيوارت شبه صلب مع مؤشر الأكسدة والاختزال

تحضير المنزل

مكونات

جلسروفوسفات الصوديوم 10 غ

ثيوجليكولات الصوديوم 1.0 غرام

كلوريد الكالسيوم 0.1 غرام

الميثيلين الأزرق 0.002 غرام

أجار أجار 3 غرام

ماء مقطر 1 لتر

تخلط المكونات وتسخن حتى تذوب تمامًا. تصب في أنابيب أو مسحات خاصة. يتم إدخالها في الأوتوكلاف وتعقيمها عند 121 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة. دع الأنابيب تبرد في وضع عمودي (على شكل كتلة). يحفظ في درجة حرارة الغرفة.

التحضير بالوسيط التجاري

تزن 14.1 جرام من الوسط في 1 لتر ماء مقطر. رجها يسخن بشكل متكرر حتى يذوب تماما ويمكن غليه. ما تبقى من الإجراء كما هو موضح بالفعل.

الوسط المجفف ذو لون كريمي ويجب أن يكون لونه أزرق على سطحه. هذا بسبب وجود الميثيلين الأزرق.

يجب تعديل الأس الهيدروجيني للوسط إلى 7.4 ± 0.2

سائل ستيوارت متوسط ​​معدل (محلي الصنع)

مكونات

جلسروفوسفات الصوديوم 10 غ

ثيوجليكولات الصوديوم 1 غرام

كلوريد الكالسيوم ثنائي هيدرات 0.1 غرام

ماء مقطر 1000 مل

يحتوي على نفس مكونات شبه صلبة ، لكنه لا يحتوي على أجار أو ميثيلين أزرق. في هذه الحالة ، يتم خلط المكونات بدون تسخين ويتم توزيع 0.5 مل في أنابيب مقاس 16 × 125 مم مع أغطية لولبية.

يتم تعقيمها في الأوتوكلاف عند 121 درجة مئوية لمدة 10 دقائق. لأخذ العينات ، يجب استخدام مسحات الداكرون إذا كانت العينة من أجل PCR أو الرايون إذا كانت مخصصة للزراعة.

يتم تخزين الأنابيب في درجة حرارة الغرفة.

التطبيقات

يوجد تجارياً أجهزة خاصة لنقل العينات تسمى الثقافة ؛ هذا الجهاز عبارة عن أنبوب ممدود ورفيع يحتوي على مسحة بداخله وفي نهايته يوجد مقطع يحتوي على وسط ستيوارت شبه صلب أو سائل.

يتم فتح الجهاز وأخذ العينة مع المسحة. ثم يتم إدخاله مرة أخرى في الأنبوب حتى يتم إدخال طرف المسحة في وسط النقل شبه الصلب ؛ يجلب البعض إسفنجة من مادة البولي يوريثين مشربة بوسط ستيوارت السائل ، حيث يتم حفظ العينة عندما تظل مبللة.

في حالة الاشتباه في وجود كائنات دقيقة حساسة ، يجب استخدام أعواد قطنية بالفحم لجمع العينة.

العينات التي يمكن أخذها بالمسحات أو المسحات ونقلها في هذا الوسط هي الإفرازات البلعومية ومسحات المستقيم والإفرازات المختلفة ، من بينها: المهبل ، الإحليل ، الجرح ، العين ، الأذني والخراج.

أثناء نقل العينة في وسيط النقل إلى المختبر ، يجب تجنب تعريض الوسط لظروف بيئية قاسية (شديدة البرودة أو شديدة الحرارة). يجب أيضًا تجنب التغيرات المفاجئة في الضغط الجوي.

يعتمد الوقت الذي تكون فيه الوسيلة قادرة على الحفاظ على الكائنات الحية الدقيقة قابلة للحياة على السلالة المعنية. على سبيل المثال ، بالنسبة للكائنات الدقيقة من جنس Neisserias و Haemophilus ، يمكن أن تظل قابلة للحياة لمدة تصل إلى 24 ساعة ، لكن سلالات مثل السالمونيلا أو الشيغيلا يمكن أن تستمر أيامًا وحتى أسابيع.

إذا تم تقدير أن معالجة العينة قد تستغرق أكثر من 4 أيام ، فمن الأفضل تجميد العينة عند -70 درجة مئوية.

تحديد العينة في وسيلة النقل

يجب أن تحمل وسيلة النقل المجهزة أو الثقافة التجارية ملصقًا يوضع فيه المعلومات التالية:

الاسم الأول والأخير للمريض: تجنب الالتباس في العينة.

رقم التعريف: من الملائم الاحتفاظ بأمر في العمل.

مصدر جمع العينات: يساعد اختصاصي علم البكتيريا على اختيار وسائط الاستزراع المناسبة.

الطبيب المعالج: في بعض الأحيان يكون من الضروري إجراء مشاورات محتملة.

تاريخ ووقت جمع العينة: من الضروري قبول أو رفض العينة حسب الوقت المنقضي بين جمع العينة والاستلام في المختبر.

المعلومات الأخرى التي قد يكون من المفيد إرفاقها هي:

التشخيص الإفتراضي: يوجه إضافة وسط زراعي خاص حسب التشخيص المشتبه به.

العلاج بالمضادات الحيوية: من المفيد أن يتم إلحاقه بالمضاد الحيوي.

كل هذه المعلومات حيوية لضمان المعالجة المناسبة للعينة.

سؤال وجواب

لتقييم أداء وسط ستيوارت ، يمكن تلقيح السلالات المعروفة وحفظها عند 25 درجة مئوية ، مثل: بورديتيلا السعال الديكي ATCC 9340 ، المستدمية النزلية ATCC 19418 ، النيسرية البنية ATCC 19424 ، النيسرية السحائية ATCC 13090 ، العقدية الرئوية ATCC 6301.

في جميع الحالات ، من المتوقع أن يتعافى الكائن الدقيق المعني ، محفوظًا لمدة 24 ساعة.

من ناحية أخرى ، يمكن استخدام سلالات أخرى مثل: Shigella flexneri ATCC 12022 و Staphylococcus aureus ATCC 6538 و Streptococcus pyogenes ATCC 12344 و Enterococcus faecalis ATCC 33186 و Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 و Escherichia coli ATCC 11775.

في جميع الحالات ، من المتوقع حدوث شفاء وفير لمدة تصل إلى 96 ساعة.

محددات

تؤكد بعض الدراسات أن فوسفات الجلسرين الموجود في وسط ستيوارت يمكن استقلابه بواسطة بعض القولونيات ، من بين بكتيريا أخرى سالبة الجرام ، وبالتالي يتكاثر في هذا الوسط.

يزيد هذا الخطر كلما تأخرت معالجة العينة. وبالمثل ، فإن تعرض متوسط ​​ستيوارت لدرجات حرارة عالية أثناء النقل يؤثر على ذلك.

المراجع

1. "وسيلة النقل (علم الأحياء الدقيقة)". ويكيبيديا، الموسوعة الحرة. 13 أبريل 2018 ، 10:36 UTC. 1 أبريل 2019 متاح على: es.wikipedia.org
2. مختبرات Microkit: الإعلام الثقافي. ستيوارت للنقل. متاح في: متاح على: Medioscultivo.com
3. لابليسان. وسيلة نقل ستيوارت. متاح على: lablinsan.cl
4. MDM العلمية. مزايا وجود وسيط نقل ميكروبيولوجي ستيوارت. متاح على: mdmcientifica.com
5. مختبرات ميتريكس. ستيوارت. 2017 متاح على: metrixlab.mx
6. Forbes B، Sahm D، Weissfeld A. (2009). بيلي وسكوت التشخيص الميكروبيولوجي. 12 إد. التحرير Panamericana SA Argentina.
7. Koneman E ، Allen S ، Janda W ، Schreckenberger P ، Winn W. (2004). التشخيص الميكروبيولوجي. 5th إد. التحرير Panamericana SA Argentina.